In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO
Corn oil
Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.
2.800mg/ml
(9.95mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 56 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution
2%DMSO
30%PEG300
5%TWEEN80
63%ddH2O
Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.
1.000mg/ml
(3.55mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 20 μL of 50 mg/ml clarified DMSO stock solution to 300 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 630 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar. * Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties. * Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)
Voorbereiden van stamoplossingen
Biologische activiteit
Beschrijving
RS-127445 (MT500) is een selectieve 5-HT2B receptorantagonist met een pKi van 9,5 en een pIC50 van 10,4, die een >1000-voudige selectiviteit vertoont ten opzichte van andere 5-HT receptoren.
Doelen
5-HT2B
5-HT2B
10.4(pIC50)
9.5(pKi)
In vitro
RS-127445 is een nieuwe, hoge affiniteit, selectieve 5-HT2B-receptorantagonist zonder detecteerbare intrinsieke activiteit. Van deze verbinding is vastgesteld dat deze nM-affiniteit en 1000-voudige selectiviteit heeft voor de 5-HT2B-receptor. Het behoort dus tot de liganden van de 5-HT2B-receptor met de hoogste affiniteit en de meeste selectiviteit. Dit chemische middel blokkeert potent de 5-HT-geïnduceerde toename van inositolphosphatevorming en blokkeert de 5-HT-geïnduceerde toenames van intracellulaire calciumconcentraties met een potentie die 1000 keer groter is dan die van yohimbine.
In vivo
RS-127445 wordt gemakkelijk opgenomen zonder duidelijke dosis- of routeafhankelijke beperkingen en wordt snel opgenomen na zowel orale als intraperitoneale toediening, waarbij piekplasmaconcentraties binnen 15 minuten na dosering worden bereikt. De concentratie van dit compound in het plasma is evenredig met de toegediende dosis. Bij toediening van een dosis van 5 mg/kg is ongeveer 60% van een intraperitoneale dosis en 14% van de orale dosis biologisch beschikbaar. De concentratie in het plasma zal naar verwachting toegankelijke 5-HT2B receptoren volledig verzadigen en kan gemakkelijk worden bereikt en gehandhaafd bij de rat. Deze chemische stof, oraal toegediend van 1 tot 10 mg/kg, remt de viscerale overgevoeligheid tot 35 tot 74% die wordt veroorzaakt door stress door fixatie significant. Orale toediening produceert een significante onderdrukking van TNBS-geïnduceerde viscerale overgevoeligheid (15 tot 62% remming bij 3 tot 30 mg/kg), hoewel het geen significant effect heeft op de viscerale nociceptieve drempel van naïeve ratten. Oraal toegediend met 1 tot 30 mg/kg vermindert het ook dosisafhankelijk de door fixatiestress geïnduceerde defecatie bij naïeve en TNBS-behandelde ratten. . Dit compound remt de colonmotiliteit en defecatie.
De selectiviteit van RS-127445 voor 5-HT2B receptoren wordt onderzocht door dit compound te testen op affiniteit voor meer dan 100 additionele ionkanaal- of receptorbindingsplaatsen. CHO-K1 cellen die humane 5-HT2A, 5-HT2B of 5-HT2C receptoren tot expressie brengen, worden geoogst met behulp van 2 mM EDTA in fosfaatgebufferde zoutoplossing. Celmembranen worden bereid door vier cycli van homogenisatie en centrifugatie (48.000×g gedurende 15 min). Elke assay wordt zo opgezet dat evenwichtstoestanden worden bereikt en specifieke binding wordt geoptimaliseerd. Voor de 5-HT2A receptor worden membranen van 1×106 cellen geïncubeerd met 0,2 nM [3H]-ketanserin bij 32 °C gedurende 60 min. Niet-specifieke binding wordt bepaald met behulp van 10 μM methysergide. Voor de 5-HT2B receptor worden membranen van 1,5×106 cellen geïncubeerd met 0,2 nM [3H]-5-HT bij 48 °C gedurende 120 min. Niet-specifieke binding wordt bepaald met behulp van 10 μM 5-HT. Voor de 5-HT2C receptor worden membranen van 3×105 cellen geïncubeerd met 0,5 nM [3H]-mesulergine bij 32 °C gedurende 60 min. Niet-specifieke binding wordt bepaald met behulp van 10 μM methysergide. Assays worden beëindigd door vacuümfiltratie door glasvezelfilters (GF/B) die voorbehandeld zijn met 0,1% polyethyleenimine. Totale en gebonden radioactiviteit wordt bepaald door vloeistofscintillatietelling. In elk van deze assays wordt meer dan 90% specifieke binding bereikt.
HEK-293 cells expressing the human 5-HT2B receptor
Concentraties
10 μM
Incubatietijd
20 min
Methode
RS-127445, vehicle or other antagonists are pre-incubated with 240 μl of HEK-293 cells expressing the human 5-HT2B receptor suspension at 37 °C for 20 min. HEK-293 cells are incubated with[3H]-myoinositol (1.67 μCi/ml) in 162 cm2 flasks overnight at 37 °C in an inositol free Ham's F12 medium containing 10% dialyzed foetal bovine serum. The cells are harvested, washed five times with phosphate bufffered saline and resuspended in inositol free Ham's F12 media at density of approximately 3×103 cells/ml. The reactions are initiated by addition of 5-HT. Sixty minutes later, the reactions are terminated by adding 50 μl of ice-cold 20% perchloric acid, chilled in an ice-water bath for 10 min and then neutralized with 160μl of 1 N KOH. Each sample is diluted with 2 ml of 50 mM Tris-HCl, pH 7.4 at room temperature. The aqueous portion (2.2 ml) is transferred onto Dowex AG1X8 columns (1 ml, 1 : 1, w/v) which has been washed with 5 ml of distilled water. The columns are then washed with 18 ml of distilled water and the inositol phosphates are eluted with 3 ml of 1 N HCl. The eluted radioactivity is determined by liquid scintillation spectroscopy using a Packard 1900CA analyzer. [1]
Oral for 2.5 h ,intraperitoneal and intravenousroutes for 0.08 h
Referenties
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10455251/
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/ 19740115
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19371340/
Sellecks RS-127445 Is geciteerd door 4 Publicaties
Fluoxetine inhibited the activation of A1 reactive astrocyte in a mouse model of major depressive disorder through astrocytic 5-HT2BR/β-arrestin2 pathway
[ J Neuroinflammation, 2022, 19(1):23]
Serotonin-induced vascular permeability is mediated by transient receptor potential vanilloid 4 in the airways and upper gastrointestinal tract of mice
[ Lab Invest, 2021, 1-14]
Serotonin receptors 5-HTR2A and 5-HTR2B are involved in cigarette smoke-induced airway inflammation, mucus hypersecretion and airway remodeling in mice.
[ Int Immunopharmacol, 2019, 10.1016/j.intimp.2019.106036]
α2- and β2-Adrenoreceptor-Mediated Efficacy of the Atypical Antidepressant Agomelatine Combined With Gabapentin to Suppress Allodynia in Neuropathic Rats With Ligated Infraorbital or Sciatic Nerve
[M'Dahoma S, et al. Front Pharmacol, 2018, 9:587]
RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.
VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.
NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.
