Ro-3306

CatalogusnummerS7747 Batch:S774705

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C18H13N3OS2
Moleculair gewicht 351.45 CAS-nr. 872573-93-8
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 35 mg/mL (99.58 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO 40%PEG300 5%Tween80 50%ddH2O

Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.

 0.440mg/ml (1.25mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 8.75 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to make it clear. Volume up to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving RO-3306 is een ATP-competitieve en selectieve CDK1-remmer met een Ki van 20 nM, >15-voudige selectiviteit tegenover een divers panel van humane kinasen. RO-3306 versterkt p53-gemedieerde Bax-activering en mitochondriale apoptose.
Doelen
CDK1
(Cell-free assay)		 PKCδ
(Cell-free assay)		 SGK
(Cell-free assay)		 ERK
(Cell-free assay)
20 nM(Ki) 318 nM(Ki) 497 nM(Ki) 1980 nM(Ki)
In vitro

RO-3306 remt de activiteit van CDK1/cyclin B1, CDK1/cyclin A, CDK2/cyclin E en CDK4/cyclin D met een Ki van respectievelijk 35 nM, 110 nM, 340 nM en meer dan 2000 nM. Behandeling van HCT116-, SW480- en HeLa-cellen met RO-3306 gedurende 20 uur leidt tot een volledige blokkering van de celcyclus in de G2/M-fase. De proliferatie van zowel HCT116 als SW480 wordt effectief geblokkeerd door RO-3306. RO-3306 lijkt pro-apoptotischer te zijn in kankercellen (HCT116 en SW480) dan in niet-tumorige cellen (MCF 10A en MCF 12A).

RO-3306 remt de oöcytrijping effectief bij een concentratie van 10 μM.
In vivo

RO-3306 is een ATP-competitieve en selectieve CDK1 remmer.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • CDK-test

    De activiteit van CDK1 cycline B1, CDK1 cycline A, CDK2 cycline E en CDK4 cycline D wordt gemeten door middel van een homogene tijdopgeloste fluorescentietest in een 96-well formaat. De testbuffer bevatte 25 mM Hepes, 6,25 mM MgCl2, 0,003% Tween 20, 0,3 mg/mL BSA, 1,5 mM DTT en ATP als volgt: 162 μM (CDK1), 90 mM (CDK2) of 135 μM (CDK4). De CDK1- en CDK2-buffer bevatte 10 mM MgCl2. Testverbindingen worden in testbuffer verdund tot 3 keer hun uiteindelijke concentratie in 20 μL, en de reactie wordt gestart door toevoeging van 40 μL testbuffer die het pRB-substraat (0,185 μM) bevat. De platen worden 30 min geïncubeerd bij 37°C met constante agitatie, en de reactie wordt beëindigd door toevoeging van 15 μL van 1,6 μM anti-fosfo pRB-antilichaam (Ser-780) in 25 mM Hepes, 24 mM EDTA en 0,2 mg/mL BSA. Na nog eens 30 min incubatie met schudden, wordt 15 μL van 3 nM Lance-Eu-W1024-gelabeld anti-konijn IgG en 60 nM Alophycocyanine-geconjugeerd anti-His-6-antilichaam in 25 mM Hepes en 0,5 mg/mL BSA toegevoegd en 1 uur geïncubeerd. De platen worden afgelezen in de Victor-V multi-label reader bij excitatie 340 nm en emissie 615 nm en 665 nm. De IC50-waarden worden berekend uit de aflezingen bij 665 nm en genormaliseerd voor Europium-aflezingen bij 615 nm. Ki-waarden worden berekend volgens de vergelijking: Ki = IC50/(1 + S/Km), waarbij S de ATP-concentratie in de test is en Km de Michaelis-Menten-constante voor ATP. De remmende activiteit tegen het panel van kinasen wordt bepaald door de IMAP-testtechnologie.
Celassay:

[3]
  • Cellijnen

    MDA-MB-231 cell line

  • Concentraties

    20 μM

  • Incubatietijd

    72 h

  • Methode

    Log phases cells (25,000) are seeed in 96-well plates and incubated in a 37℃ incubator with CO2, After 24 h, different concentrations of RO-3306 are administered to determine the drug concentrations required to achieve a 50% growth inhibition (IC50). MTT (20 μL, 5mg/mL stock solution in saline) is added to each well and the cells are incubated for 4 h. Supernatants are removed and formazan crystals from viable cells are solubilized with 200 μL anhydrous DMSO. The absorbance is detected with a 550 model microplate reader at the 565 nm wavelength.
Dierstudie:

[4]
  • Dierlijke modellen

    Female BALB/c mice

  • Doseringen

    1.5 mg/kg

  • Toediening

    i.n.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16818887/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24374180/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24378347/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35367281/

Klantproductvalidatie

HeLa cells were untreated or treated with either colcemid (10 μg/ml for 16 h), RO-3306 (9 μM for 16 h), or both colcemid and RO-3306, as indicated. Cells were then lysed, and proteins were detected by Western analysis.

Gegevens van [ , , J Cell Biol, 2015, 209(2): 221-34 ]

A, Expression of IFIT3 in HeLa cells pretreated with 5 μM RO-3306 for 12 hours and then stimulated with type I IFN (1,000 units/ml) for 8 hours. The cells were collected and total RNA was extracted for the detection of IFIT3 mRNA. Results are the relative expression levels of IFIT3 mRNA normalized to endogenous GAPDH mRNA levels. B, Expression of IFI27 in HeLa cells measured in the same samples as in A.

Gegevens van [ , , Arthritis Rheumatol, 2016, 68(5):1222-32. ]

AML cells were treated with AZ20 in the absence or presence of RO-3306 (RO) for 24 h. Cells were then subjected to annexin V-FITC/PI staining and flow cytometry analyses. Combined treatment was compared to AZ20 treatment alone using pair-wise two-sample t-test. ***Indicates p < 0.001.

Gegevens van [ , , Sci Rep, 2017, 7:41950 ]

Cell cycle synchronization in M phase. Cells were treated with 6 µM RO-3306 for 20 h. After release from RO-3306 treatment, the cells were fixed at 0.5, 1, and 1.5 h after the release. α-tubulin (green), DNA (red). Scale bars, 20 µm.

Gegevens van [ , , Int J Mol Sci, 2018, 19(12) ]

Sellecks Ro-3306 Is geciteerd door 181 Publicaties

TRF1 relies on fork reversal to prevent fragility at human telomeres [ Nat Commun, 2025, 16(1):6439] PubMed: 40645989
The cAMP-PKA signaling initiates mitosis by phosphorylating Bora [ Nat Commun, 2025, 16(1):7898] PubMed: 40849432
Nuclear DAB2IP regulates DNA replication initiation through activating PLK1-mediated HBO1 phosphorylation [ Nucleic Acids Res, 2025, 53(21)gkaf1179] PubMed: 41261855
Cell cycle progression of under-replicated cells [ Nucleic Acids Res, 2025, 53(1)gkae1311] PubMed: 39778868
Combined therapy with DR5-targeting antibody-drug conjugate and CDK inhibitors as a strategy for advanced colorectal cancer [ Cell Rep Med, 2025, S2666-3791(25)00231-9] PubMed: 40449480
HOXC10 Protects from Skin Aging by Targeting the FZD6/Wnt/β-Catenin Signaling Pathway [ Research (Wash D C), 2025, 8:0976] PubMed: 41268215
SMAD2 linker phosphorylation impacts overall survival, proliferation, TGFβ1-dependent gene expression and pluripotency-related proteins in NSCLC [ Br J Cancer, 2025, 133(1):52-65] PubMed: 40319202
An Aurora kinase A-BOD1L1-PP2A B56 axis promotes chromosome segregation fidelity [ Cell Rep, 2025, 44(2):115317] PubMed: 39970043
Genomic context influences translesion synthesis DNA polymerase-dependent mechanisms of micronuclei induction by G-quadruplexes [ Cell Rep, 2025, 44(5):115706] PubMed: 40349342
CDK2 Inhibition Produces a Persistent Population of Polyploid Cancer Cells [ JCI Insight, 2025, e189901] PubMed: 40232858

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.