RKI-1447

CatalogusnummerS7195 Batch:S719501

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C16H14N4O2S
Moleculair gewicht 326.37 CAS-nr. 1342278-01-6
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 65 mg/mL (199.16 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension
15% Captisol

Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.

 10.000mg/ml (30.64mM) Taking the 1 mL working solution as an example, take 10 mg of this product, add it to 1 ml of 15% Captisol clear solution, and mix evenly to form a uniform suspension. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
Clear solution
5%DMSO 40%PEG300 5%Tween80 50%ddH2O

Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.

 10.000mg/ml (30.64mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 200 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
Clear solution
5% DMSO 95% Corn oil

Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.

 0.250mg/ml (0.77mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 5 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving RKI-1447 is een potente remmer van ROCK1 en ROCK2, met een IC50 van respectievelijk 14,5 nM en 6,2 nM, en heeft anti-invasieve en antitumorale activiteiten.
Doelen
ROCK2
(Cell-free assay)		 ROCK1
(Cell-free assay)
6.2 nM 14.5 nM
In vitro

RKI-1447 is een celpermeabele pyridylthiazolyl-ureum die fungeert als een potente, op de ATP-plaats gerichte Rho Kinase-remmer, met een veel lagere potentie tegen PKA, PKN1/PRK1, p70S6K/RPS6kB1, AKT1, MRCKa/CDC42BPA (respectievelijk 85,5%, 80,5%, 61,9%, 56,0% en 50,4% remming door 1 µM van deze verbinding) of 15 andere kinasen. Kristalstructuren van het chemische stof/ROCK1-complex onthullen dat deze remmer een Type I kinase-remmer is die zich bindt aan de ATP-bindingsplaats door interacties met het scharniergebied en het DFG-motief. Het onderdrukt de fosforylering van de ROCK-substraten MLC-2 en MYPT-1 in menselijke kankercellen, maar had geen effect op de fosforyleringsniveaus van de AKT, MEK en S6 kinase bij concentraties tot 10 μM. Deze verbinding is ook zeer selectief in het remmen van ROCK-gemedieerde cytoskeletreorganisatie (actine stressvezelvorming) na LPA-stimulatie, maar beïnvloedt de PAK-gemedieerde lamellipodia- en filopodiavorming na PDGF- en bradykinine-stimulatie niet. Het remt migratie, invasie en verankering-onafhankelijke tumorgroei van borstkankercellen.

In vivo

RKI-1447 is zeer effectief in het remmen van de uitgroei van mammatumoren in een transgeen muismodel. Tumoren van muizen behandeld met deze verbinding nemen in grootte toe met een gemiddelde procentuele verandering in tumorvolume van slechts 8,8%. Aldus remde het de groei van mammatumoren met 87%, en gemiddeld waren de mammatumoren van Vergeleken met die tumoren van muizen behandeld met de vehikelcontrole, zijn de muizen behandeld met deze chemische stof 7,7 keer kleiner. Deze behandelingen met verbindingen leiden niet tot gewichtsverlies bij muizen.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[2]
  • Z-Lyte FRET kinase-assay

    Kinase-inhibitie wordt gemeten met behulp van de Invitrogen Z-Lyte® FRET kinase-assay met Ser/Thr 13 peptiden-substraat gebaseerd op de myosine lichte keten sequentie KKRPQRRYSNVF. Deze verbinding wordt op drie afzonderlijke dagen getest met 8-puntsverdunningen die in duplo worden uitgevoerd om gemiddelde IC50-waarden te bepalen. De assaycondities zijn geoptimaliseerd tot 15 μL kinase-reactievolume met 5 ng enzym in 50 mM HEPES (pH 7,5), 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA en 0,01% Brij-35. De reactie wordt gedurende 1 uur bij kamertemperatuur geïncubeerd in aanwezigheid van 1,5 μM peptide-substraat met 12,5 μM ATP (voor ROCK1) of 2 μM substraat met 50 μM ATP (voor ROCK2).
Celassay:

[1]
  • Cellijnen

    MDA-MB-231

  • Concentraties

    ~600 μM

  • Incubatietijd

    72 h

  • Methode

    Cells are plated in a 96 well tissue culture plate (1200 cells per well) and incubated for 24 hours. After incubation the cells are treated with vehicle or increasing concentrations of RKI-1447 for 72 hours. After incubation, freshly prepared MTT (2mg/ml) is added to each well and incubated for 3 hours. After incubation the plates are read at 540 nm.
Dierstudie:

[1]
  • Dierlijke modellen

    MMTV/neu transgenic mice [FVB/N-Tg (MMTVneu) 202 Mul/J]

  • Doseringen

    200 mpk/day

  • Toediening

    i.p.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22846914/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23275831/

Klantproductvalidatie

(d) ROCK inhibition blocks CC-RCC migration in a transwell assay. RCC10 or 786-O cells were treated with Y-27632, RKI 1447 or DMSO vehicle (as indicated) for 6 h. The assay was performed in duplicate and the experiment was repeated three times. Statistical analysis in (b-d) was performed using a paired t-test comparing each normalized dose to the negative control (*P<0.05, **P<0.01 and ***P<0.001); s.e.m.

Gegevens van [ , , Oncogene, 2016, 1-10. ]

Western blotting analysis of the indicated proteins in MSC-4H-FC cells treated with increasing concentrations of dasatinib, PF-573228, or RKI-1447 for 24 hours. β-Actin levels were used as loading control.

Gegevens van [ , , Neoplasia, 2018, 20(1):44-56 ]

The cells were treated with 5 μM of the PAK1-specific inhibitor IPA-3 or 1 μM of the ROCK1/2-specific inhibitor RKI-1447 for 24 h. Total cell lysates were immunoblotted with antibodies against p110β, p110δ, p-PAK1, PAK1, ROCK1, ROCK2, p-LIMK1, LIMK1 or β-actin, which served as an internal control. The results are representative of three independent experiments.

Gegevens van [ , , Anticancer Res, 2017, 37(4):1805-1818 ]

Sellecks RKI-1447 Is geciteerd door 12 Publicaties

Therapeutic targeting of tumor spheroids in a 3D microphysiological renal cell carcinoma-on-a-chip system [ Neoplasia, 2023, 10.1016/j.neo.2023.100948] PubMed: 37944353
Correlating Basal Gene Expression across Chemical Sensitivity Data to Screen for Novel Synergistic Interactors of HDAC Inhibitors in Pancreatic Carcinoma [ Pharmaceuticals (Basel), 2023, 16(2)294] PubMed: 37259439
Establishment and characterization of immortalized sweat gland myoepithelial cells [ Sci Rep, 2022, 12(1):7] PubMed: 34997030
İnsan kornea endotel hücreleri üzerine farklı RHO kinaz inhibitörlerinin etkinliğinin araştırılması [ GCRIS, 2022, ] PubMed: none
Synapse-specific Lrp4 mRNA enrichment requires Lrp4/MuSK signaling, muscle activity and Wnt non-canonical pathway [ Cell Biosci, 2021, 11(1):105] PubMed: 34090516
RKI-1447 suppresses colorectal carcinoma cell growth via disrupting cellular bioenergetics and mitochondrial dynamics. [ J Cell Physiol, 2020, 235(1):254-266] PubMed: 31237697
A novel human colon signet-ring cell carcinoma organoid line: establishment, characterization and application [ Carcinogenesis, 2020, 41(7):993-1004] PubMed: 31740922
[ Cell Rep, 2019, ] PubMed: 31825822
FUS-CHOP Promotes Invasion in Myxoid Liposarcoma through a SRC/FAK/RHO/ROCK-Dependent Pathway [Tornin J Neoplasia, 2018, 20(1):44-56] PubMed: 29190494
Prominent oncogenic roles of EVI1 in breast carcinoma [Wang H Cancer Res, 2017, 77(8):2148-2160] PubMed: 28209621

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.