AMD3100 (Plerixafor)

Plerixafor (AMD3100) remt CXCL12-gemedieerde chemotaxis met een potentie die iets beter is dan zijn affiniteit voor CXCR4. [1]

Het antagoniseert ook SDF-1/CXCL12-ligandbinding met een IC50 van 651 nM. Deze verbinding remt SDF-1-gemedieerde GTP-binding, SDF-1-gemedieerde calciumflux en SDF-1-gestimuleerde chemotaxis met een IC50 van respectievelijk 27 nM, 572 nM en 51 nM. Het remt geen calciumflux tegen cellen die CXCR3, CCR1, CCR2b, CCR4, CCR5 of CCR7 tot expressie brengen wanneer gestimuleerd met hun cognate liganden, noch remt het de receptorbinding van LTB4. Op zichzelf induceert het geen calciumflux in de CCRF–CEM-cellen, die meerdere GPCRs tot expressie brengen, waaronder CXCR4, CCR4 en CCR7. [2]

Bij diabetische muizen bevordert een enkele topische toepassing van Plerixafor (AMD3100) wondgenezing door de cytokineproductie te verhogen, EPC's uit het beenmerg te mobiliseren en de activiteit van fibroblasten en monocyten/macrofagen te verbeteren, waardoor zowel angiogenese als vasculogenese toenemen. [3]

Cohorten muizen krijgen gedurende vijf opeenvolgende dagen PBS, IGF1, PDGF, SCF of VEGF toegediend, en op de 5e dag dit compound. Het aantal en de grootte van de kolonies zijn het hoogst bij muizen die IGF1 plus dit compound geïnjecteerd hebben gekregen, vergeleken met de met PDGF, SCF en VEGF behandelde groepen, in combinatie met Plerixafor. [4]

• Receptorbindingsassays

  Voor de competitiebindingsstudies tegen CXCR4 wordt Plerixafor (AMD3100) gedurende 3 uur bij 4 °C in een concentratiebereik geïncubeerd in bindingsbuffer (PBS met 5 mM MgCl₂, 1 mM CaCl₂, 0,25% BSA, pH 7,4) met 5 × 10⁵ CCRF–CEM-cellen en 100 pM ¹²⁵I-SDF-1α (2200 Ci/mmol) in Milipore Durapore^TM filterplaten. Ongebonden ¹²⁵I-SDF-1α wordt verwijderd door te wassen met koude 50 mM HEPES, 0,5 M NaCl pH 7,4. De competitiebindingsassay tegen BLT1 wordt uitgevoerd op membranen van CHO-S-cellen die recombinant BLT1 tot expressie brengen. De membranen worden bereid door mechanische cellyse gevolgd door hogesnelheidscentrifugatie, geresuspendeerd in 50 mM HEPES, 5 mM MgCl₂-buffer en snel ingevroren. Deze verbinding wordt gedurende 1 uur bij kamertemperatuur geïncubeerd met de membraanbereiding in een assaymengsel dat 50 mM Tris, pH 7,4, 10 mM MgCl₂, 10 mM CaCl₂, 4 nM LTB₄ gemengd met 1 nM ³H-LTB₄ (195,0 Ci/mmol) en 8 μg membraan bevat. Het ongebonden ³H-LTB₄ wordt gescheiden door filtratie op Millipore Type GF-C filterplaten.

• Dierlijke modellen

  Twelve-week-old C57BL/6 mice with segmental bone defect

• Doseringen

  5 mg/kg

• Toediening

  Administered via i.p.