In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar. * Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties. * Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)
Voorbereiden van stamoplossingen
Biologische activiteit
Beschrijving
PI-1840 is een reversibele en selectieve chymotrypsine-achtige (CT-L) remmer met een IC50 van 27 nM met weinig effecten op de andere twee belangrijke Proteasome proteolytische activiteiten, trypsine-achtig (T-L) en postglutamyl-peptide-hydrolyse-achtig (PGPH-L).
Doelen
Chymotrypsin-like proteasome
27 nM
In vitro
PI-1840 remt potent de proteasomale CT-L-activiteit met een IC50 van 0,37 μM in intacte menselijke MDA-MB-468 kankercellen, en remt de proliferatie/overleving van menselijke MDA-MB-468-cellen. In intacte kankercellen remt deze verbinding de CT-L-activiteit, induceert de accumulatie van Proteasome-substraten p27, Bax en IκB-α, remt overlevingsroutes en levensvatbaarheid, en induceert apoptose.
In vivo
PI-1840 (150 mg/kg i.p.) remt de tumorgroei bij muizen met MDA-MB-231 borsttumoren.
Bij de high-throughput screening worden fluorogene peptiden gebruikt als substraten om (bij 10 μM) de 50.000 verbindingen tellende bibliotheek van ChemBridge te testen op remmende activiteit tegen de CT-L proteolytische activiteit van het gezuiverde konijn 20S Proteasome. Om de selectiviteit voor CT-L boven T-L en PGPH-L te testen, worden de overeenkomstige fluorogene peptiden gebruikt. Kort gezegd wordt 1 nM gezuiverd 20S konijn Proteasome geïncubeerd met 20 μM Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC voor de CT-L-activiteit, Bz-Val-Gly-Arg-AMC voor de T-L-activiteit, en benzyloxycarbonyl Z-Leu-Leu-Glu-AMC voor de PGPH-L-activiteit gedurende 1 uur bij 37 °C in 100 μL assaybuffer (50 mM Tris-HCl, pH 7,6) met of zonder deze verbinding. Na incubatie wordt de productie van gehydrolyseerde 7-amido-4-methylcoumarine (AMC) groepen gemeten met een WALLAC Victor2 1420 Multilabel Counter met een excitatie filter van 355 nm en een emissie filter van 460 nm. De hoeveelheid vrijgekomen AMC ligt binnen het lineaire bereik. Bortezomib wordt gebruikt als positieve controle voor IC50-bepalingen. Om de Proteasome-activiteit in hele cellen te bepalen, worden extracten (5 μg) van gekweekte celysaat gebruikt in plaats van 20S konijn Proteasome, en wordt dezelfde hierboven genoemde assay gevolgd.
Cells are plated in 96-well plates in 100 μL medium and allowed to attach overnight. Cells are then incubated for 120 h with varying concentrations of this compound. Media is aspirated and replaced with 100 μL complete media containing 1 mg/ml MTT and incubated for three hours at 37 °C in 5% CO2 humidified incubator. Media is then aspirated and DMSO is added. Cells are incubated for 10 min at room temperature while shaking, and the absorbance is determined at 540 nm using a μQuant spectrophotometric plate reader. The IC50 values are determined using equation under CT-L, T-L, PGPH-L proteolytic activity assays.
Prolonged unfolded protein reaction is involved in the induction of chronic myeloid leukemia cell death upon oprozomib treatment
[ Cancer Sci, 2020, 112(1):133-143]
RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.
VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.
NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.
