PF-543 hydrochloride

CatalogusnummerS7177 Batch:S717702

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C27H32ClNO4S
Moleculair gewicht 502.07 CAS-nr. 1706522-79-3
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 100 mg/mL (199.17 mM)
Ethanol 100 mg/mL (199.17 mM)
Water Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving PF-543 hydrochloride, een nieuwe sfingosine-competitieve remmer van SphK1, remt SphK1 met IC50 en Ki van 2,0 nM en 3,6 nM, en vertoont >100-voudige selectiviteit ten opzichte van de SphK2-isoform. Deze verbinding induceert apoptose, necrose en autofagie.
Doelen
SphK1
(Cell-free assay)		 SphK1
(Cell-free assay)
2.0 nM 3.6 nM(Ki)
In vitro

PF543 is een celpermeabele hydroxylmethylpyrrolidine-verbinding die SphK-1/SphK1-gekatalyseerde sfingosinefosforylering op een reversibele en sfingosine-competitieve manier remt, waarbij het geen affiniteit vertoont voor S1P-receptoren en een veel verminderde remmende activiteit tegen Sphk2 (6,8% remming bij 10 μM) of 46 andere lipide- en proteïnekinasen (IC50 >10 μM). In de SphK1-overexpressie 1483 hoofd- en halscarcinoomcellen verlaagt deze verbinding het niveau van endogeen S1P 10-voudig met een evenredige toename van het sfingosineniveau. Het bindt SphK1 reversibel (k off t1/2=8,5 min) en met hoge affiniteit en de bindingsconstante (Kd) is 5 nM. Deze chemische stof had geen effect op de proliferatie en overleving van 1483, A549, LN229, Jurkat, U937 en MCF-7 cellen, ondanks een dramatische verandering in de cellulaire S1P/sfingosine-verhouding. Het is effectief als een potente remmer van S1P-vorming in volbloed, wat aangeeft dat de SphK1-isoform van sfingosinekinase de belangrijkste bron van S1P in menselijk bloed is.

In vivo PF-543 hydrochloride, een potente sfingosinekinase 1-remmer, verminderde disfunctionele hypertrofie, geassocieerd met bescherming tegen cardiomyocyte-apoptose.
Kenmerken De meest potente remmer van SphK1 tot nu toe beschreven.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • FITC-S1P kwantificatie/Caliper assay

    Een 384-wells formaat van de SphK-enzymtest, gebaseerd op de scheiding van FITC-S1P van niet-gereageerd FITC-sfingosinesubstraat met behulp van een microfluïdisch capillair-elektroforese-mobiliteitsshift-systeem, wordt ontwikkeld. Kortom, 3 nM SphK1–His6 wordt geïncubeerd met 1 μM FITC-sfingosine, 20 μM ATP en 10 μM van deze verbinding (een uiteindelijke DMSO-concentratie van 2 %) in een buffer die 100 mM Hepes (pH 7,4), 1 mM MgCl2, 0,01% Triton X-100, 10% glycerol, 100 μM natriumorthovanadaat en 1 mM DTT bevat gedurende 1 uur in een 384-wells Matrical MP-101-1-PP-plaat. Reactiemengsels (10 μL) worden geblust door toevoeging van 20 μL van 30 mM EDTA en 0,15% Coating Reagent-3 in 100 mM Hepes, en een klein aliquot van elke reactie (enkele nanoliters) wordt geanalyseerd in het Caliper LabChip 3000-instrument onder -1,5 psi (psi=6,9 kPa) druk, een stroomafwaartse spanning van -1900 V en een sip-tijd van 0,2 s. Gefosforyleerd fluorescent product en niet-gefosforyleerd fluorescent substraat verschenen als kenmerkende pieken en worden gekwantificeerd met behulp van de Caliper-gegevens.
Celassay:

[1]
  • Cellijnen

    1483, A549, LN229, Jurkat, U937, MCF-7

  • Concentraties

    ~1 μM

  • Incubatietijd

    7 days

  • Methode

    CellTiter-Glo Assay
Dierstudie:

[2]
  • Dierlijke modellen

    C57BL/6 mice

  • Doseringen

    1 mg/kg

  • Toediening

    i.p.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22397330/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27063355/

Klantproductvalidatie

(C) Western blot analysis of mature TGF-β1, FN and Col-I protein levels in sham, sham+ PF-543, UUO and UUO +PF-543 groups at 7 days (n =3). (average ± SEM; ANOVA; *P < 0.05, **P < 0.01 versus sham group. #P < 0.05 versus UUO group). (D) Periodic acid-Schiff staning showed that tubular atrophy was evident in the obstructed kidneys at UUO 7 days after PF-543 treatment (n =6). (E) Masson

Gegevens van [ , , Int J Biochem Cell Biol, 2017, 90:17-28 ]

PF-543 is anti-proliferative and cytotoxic to CRC cells. Human CRC cell lines, including HCT-116 (a-d), DLD-1 and HT-29 (e), as well as patient-derived primary colon cancer cells (P1, P2 and P3, f), were incubated with regular or PF-543-containg medium for indicated time, cell proliferation was tested by viable cell counting assay (a) and colony formation assay (b); Cell survival was examined by MTT assay (c-f). Expression of SphK1 and Tubulin (the equal loading) was examined by Western blots (e and f, upper panels). Relative SphK1 expression (verse Tubulin) was quantified. “C” stands for untreated control cells (For all Figs). Values represented the mean ± SEM (n = 5). Experiments in this figure were repeated three times, with similar results achieved. *P < 0.05 versus “C” group.

Gegevens van [ , , Biochem Biophys Res Commun, 2016, 470(3):728-34. ]

Sellecks PF-543 hydrochloride Is geciteerd door 30 Publicaties

SPHK1 enhances olaparib resistance in ovarian cancer through the NFκB/NRF2/ferroptosis pathway [ Cell Death Discov, 2025, 11(1):29] PubMed: 39875359
Elevated Sphingosine Levels Suppress Profibrotic TGF-β Signaling via the PKC/miR-21/SMAD7 Axis in Sphingosine Kinase 2-Deficient Renal Fibroblasts and Unilateral Ureteral Obstruction-Induced Kidney Fibrosis [ FASEB J, 2025, 39(12):e70768] PubMed: 40558859
Molecular subtyping of renal clear cell carcinoma based on prognostic RASSF family genes and validation of C1QL1 as a key prognostic marker [ Sci Rep, 2025, 15(1):9786] PubMed: 40118977
Targeting the SphK1/S1P/PFKFB3 axis suppresses hepatocellular carcinoma progression by disrupting glycolytic energy supply that drives tumor angiogenesis [ J Transl Med, 2024, 22(1):43] PubMed: 38200582
Cannabinoid-Induced Immunogenic Cell Death of Colorectal Cancer Cells Through De Novo Synthesis of Ceramide Is Partially Mediated by CB2 Receptor [ Cancers (Basel), 2024, 16(23)3973] PubMed: 39682160
Induction of Inflammation Disrupts the Negative Interplay between STING and S1P Axis That Is Observed during Physiological Conditions in the Lung [ Int J Mol Sci, 2023, 24(9)8303] PubMed: 37176007
Comprehensive metabolomics expands precision medicine for triple-negative breast cancer [ Cell Res, 2022, 10.1038/s41422-022-00614-0] PubMed: 35105939
Sphingosine kinase 1 promotes tumor immune evasion by regulating the MTA3-PD-L1 axis [ Cell Mol Immunol, 2022, 19(10):1153-1167] PubMed: 36050478
Targeting sphingosine kinase 1/2 by a novel dual inhibitor SKI-349 suppresses non-small cell lung cancer cell growth [ Cell Death Dis, 2022, 13(7):602] PubMed: 35831279
The anti-osteosarcoma cell activity by the sphingosine kinase 1 inhibitor SKI-V [ Cell Death Discov, 2022, 8(1):48] PubMed: 35115496

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.