MLN4924 (Pevonedistat)

CatalogusnummerS7109 Batch:S710905

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C21H25N5O4S
Moleculair gewicht 443.52 CAS-nr. 905579-51-3
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 89 mg/mL (200.66 mM)
Ethanol 89 mg/mL (200.66 mM)
Water Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving MLN4924 is een kleinmoleculair remmer van het Nedd8 activerende enzym (NAE) met een IC50 van 4 nM.
Doelen
NAE
(Cell-free assay)
4 nM
In vitro Pevonedistat (MLN4924) is structureel verwant aan adenosine 59-monofosfaat (AMP) – een sterk bindend product van de NAE-reactie. Het (3 μM) remt selectief NAE in HCT-116-cellysaten en remt de totale eiwit turnover met <9% in HCT-116-cellen. Deze verbinding resulteert in een dosisafhankelijke afname van Ubc12–NEDD8-thioester en NEDD8–cullin-conjugaten met een IC50 < 0,1 μM in HCT-116-cellen, wat resulteert in een wederzijdse toename van de abundantie van de bekende CRL-substraten CDT1, p27 en NRF2, maar niet van niet-CRL-substraten. Het (3 μM) leidt ertoe dat cellen zich al na 8 uur in de S-fase ophopen en resulteert in een significant deel van de cellen met 4N DNA-gehalte na 24 uur in HCT-116-cellen. Bij dezelfde concentratie resulteert het in snelle accumulatie van pIkappaBalpha, afname van nucleair p65-gehalte, vermindering van nucleaire factor-kappaB (NF-kappaB) transcriptieactiviteit, en G(1)-arrest, wat uiteindelijk resulteert in apoptose-inductie, gebeurtenissen die consistent zijn met potente NF-kappaB-pathway-remming in ABC DLBCL-cellen. Bij 1 μM triggert het DNA-replicatie en remt het celproliferatie door stabilisatie van de DNA-replicatiefactor Cdt1, een substraat van cullins 1 en 4. Deze concentratie, die voldoende is om Cdt1 gedurende 4-5 uur te verhogen, blijkt voldoende te zijn om DNA-replicatie te induceren en apoptose- en senescentie-pathways te activeren. Behandeling met deze verbinding induceert de kenmerken van senescentiefenotypen, zoals blijkt uit een vergrote en afgeplatte cellulaire morfologie en positieve kleuring van senescentie-geassocieerd β-Gal. MLN4924-geïnduceerde senescentie is geassocieerd met cellulaire respons op DNA-schade, getriggerd door accumulatie van DNA-licensing-eiwitten CDT1 en ORC1, als gevolg van inactivatie van CRL/SCF E3s. Het is irreversibel en gekoppeld aan aanhoudende accumulatie van p21 en aanhoudende activering van de DNA-schaderespons.
In vivo Pevonedistat (MLN4924) (60 mg/kg) resulteert in een dosis- en tijdsafhankelijke afname van NEDD8–cullin-niveaus al 30 min na toediening bij HCT-116 tumor-dragende muizen, met een maximaal effect 1–2 uur na de dosis. Het leidt ook tot een dosis- en tijdsafhankelijke toename van de steady-state-niveaus van NRF2 en CDT1 bij HCT-116 tumor-dragende muizen. Deze verbinding leidt tot DNA-schade in de tumor, aangegeven door de verhoogde niveaus van gefosforyleerd CHK1 bij HCT-116 tumor-dragende muizen. Wanneer toegediend volgens een BID-schema met 30 mg/kg en 60 mg/kg, remt het tumorgroei met T/C-waarden van respectievelijk 0,36 en 0,15 bij muizen met HCT-116-xenografts. Het (60 mg/kg) blokkeert NAE-pathway-biomarkers en resulteert in volledige tumorgroei-inhibitie bij muizen met humane xenograft-tumoren van ABC- en GCB-DLBCL. Deze verbinding (60 mg/kg) resulteert in NF-kappaB-pathway-inhibitie, gepaard gaande met tumorregressies in primaire humane tumor-muismodellen van ABC-DLBCL.
Kenmerken Een op mechanismen gebaseerde remmer van NAE, die een covalent NEDD8-MLN4924-adduct vormt dat door het enzym wordt gekatalyseerd.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[1]
  • In vitro E1 Activating enzymassays

    Een tijdopgeloste fluorescentie-energietransferassayformaat wordt gebruikt om de in vitro activiteit van NAE te meten. De enzymatische reactie, die 50 μL 50 mM HEPES, pH 7,5, 0,05% BSA, 5 mM MgCl2, 20 μM ATP, 250 μM glutathion, 10 nM Ubc12–GST, 75 nM NEDD8–Flag en 0,3 nM recombinant humaan NAE-enzym bevat, wordt gedurende 90 min bij 24 ℃ in een 384-wells plaat geïncubeerd, alvorens te worden beëindigd met 25 μL stop/detectiebuffer (0,1 M HEPES, pH 7,5, 0,05% Tween20, 20 mM EDTA, 410 mM KF, 0,53 nM Europium-Cryptaat-gelabeld monoklonaal Flag-M2-specifiek antilichaam en 8,125 μg/mL PHYCOLINK allophycocyanine (XL-APC)-gelabeld GST-specifiek antilichaam. Na incubatie gedurende 2 uur bij 24 ℃ wordt de plaat afgelezen op het LJL Analyst HT Multi-Mode instrument met behulp van een tijdopgeloste fluorescentiemethode. Een vergelijkbaar assayprotocol wordt gebruikt om andere E1-enzymen te meten.
Celassay:[1]
  • Cellijnen

    HCT-116 cells

  • Concentraties

    3 μM

  • Incubatietijd

    72 hours

  • Methode

    Cell suspensions are seeded at 3,000–8,000 cells per well in 96-well culture plates and incubated overnight at 37 ℃. Pevonedistat (MLN4924) is then added to the cells in complete growth media and incubated for 72  hours at 37 ℃. Cell number is quantified using the ATPlite assay.
Dierstudie:[1]
  • Dierlijke modellen

    mice bearing HCT-116 xenografts

  • Doseringen

    60 mg/kg

  • Toediening

    Subcutaneously injection

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19360080/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20525923/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21159650/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21677879/

Klantproductvalidatie

Immunoblot analysis of IKZF1/3 and CRBN levels in MM.1S cells treated with Poma (P, 10 nM) for 16 h, after incubating with MLN4924 (M, 0.2 μM) or DMSO for 48 h

Gegevens van [ , , Leukemia, 2019, 33(1):171-180 ]

BEL7402 or HepG2 cells were transfected with GFP-tagged Hakai and treated with 0.5% DMSO, 10 μM MG132 and 5 μM MLN4924 (c). Endogenous Ajuba levels were determined by immunoblotting using anti-Ajuba antibody. GAPDH was used as a loading control. Densitometry was performed for quantification, and the ratios of Ajuba and GAPDH are presented.

Gegevens van [ , , J Exp Clin Cancer Res, 2018, 37(1):165 ]

(A) Mouse peritoneal macrophages were pretreated with DMSO or MLN4924 for 2 h and then stimulated with LPS or poly(I:C) for the indicated time period. Phosphorylated and total signaling proteins were examined by Western blot analysis.

Gegevens van [ , , J Immunol, 2016, 196(7):3117-23 ]

Sellecks MLN4924 (Pevonedistat) Is geciteerd door 153 Publicaties

Multigenerational cell tracking of DNA replication and heritable DNA damage [ Nature, 2025, 642(8068):785-795] PubMed: 40399682
USP7 V517F mutation as a mechanism of inhibitor resistance [ Nat Commun, 2025, 16(1):2526] PubMed: 40087304
SAMD9 senses cytosolic double-stranded nucleic acids in epithelial and mesenchymal cells to induce antiviral immunity [ Nat Commun, 2025, 16(1):3756] PubMed: 40263291
The E3 ligase RNF32 controls the IκB kinase complex and NF-κB signaling in intestinal stem cells [ Mol Cell, 2025, 85(22):4254-4267.e9] PubMed: 41167191
LC3-dependent intercellular transfer of phosphorylated STAT1/2 elicits CXCL9+ macrophages and enhances radiation-induced antitumor immunity [ J Clin Invest, 2025, 135(23)e195279] PubMed: 41321309
Disrupting AGR2/IGF1 paracrine and reciprocal signaling for pancreatic cancer therapy [ Cell Rep Med, 2025, 6(2):101927] PubMed: 39914384
Functional landscape of ubiquitin linkages couples K29-linked ubiquitylation to epigenome integrity [ EMBO J, 2025, 10.1038/s44318-025-00599-7] PubMed: 41125851
Identification of a BACH1 lung cancer signature: A novel tool for understanding BACH1 biology and identifying new inhibitors [ Redox Biol, 2025, 85:103789] PubMed: 40716152
A genome-wide, CRISPR-based screen reveals new requirements for translation initiation and ubiquitination in driving adipogenic fate change [ Genes Dev, 2025, 10.1101/gad.352779.125] PubMed: 40675820
DTL dose-dependent control of sex-dimorphic ferroptosis in liver ischemia reperfusion injury [ Cell Rep, 2025, 44(7):115920] PubMed: 40560731

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.