P5091

CatalogusnummerS7132 Batch:S713202

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C12H7Cl2NO3S2
Moleculair gewicht 348.22 CAS-nr. 882257-11-6
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 35 mg/mL (100.51 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
6.5%DMSO 40%PEG300 5%Tween80 48.5%ddH2O

Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.

 1.950mg/ml (5.60mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 65 μL of 30 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 485 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving P5091 is een selectieve en potente remmer van ubiquitin-specific protease 7 (USP7) met een EC50 van 4,2 μM en de nauw verwante USP47.
Doelen
USP7
(Cell-free assay)		 USP47
(Cell-free assay)
4.2 μM(EC50) 4.3 μM
In vitro

P5091 is een trisubstituted thiofeen met dichloorfenylthio-, nitro- en acetylsubstituenten die anti-USP7-activiteit mediëren. Deze verbinding vertoont potente, specifieke en selectieve deubiquitylerende activiteit tegen USP7. In tegenstelling hiermee remt het geen andere DUBs of andere geteste families van cysteïne-proteasen (EC50 > 100 mM). Dit chemische middel remt de labeling van USP7 met HA-UbVME op een concentratieafhankelijke manier. USP7-gemedieerde splitsing van polyubiquitineketens met hoog moleculair gewicht wordt op een dosisafhankelijke manier geremd door deze verbinding. Bovendien remt het USP7-, maar niet USP2- of USP8-gemedieerde splitsing van poly-K48-gekoppelde ubiquitineketens. USP7-remming door deze verbinding induceert HDM2-polyubiquitylering en versnelt de afbraak van HDM2. Het remt de USP7-deubiquitylerende activiteit, zonder de proteasoomactiviteit in MM-cellen te blokkeren. Dit chemische middel induceert een dosisafhankelijke afname van de levensvatbaarheid van verschillende MM-cellijnen. Het overwint door beenmergstroomacellen geïnduceerde groei van MM-cellen. Deze verbinding verlaagde HDM2 en HDMX, en verhoogde p53- en p21-niveaus. Over het algemeen wordt de door deze verbinding geïnduceerde cytotoxiciteit deels gemedieerd via de HDM2-p21-signaalas en hoewel p53 wordt opgereguleerd als reactie op deze chemische behandeling, is de cytotoxische activiteit ervan niet afhankelijk van p53.

In vivo

In dierlijke tumormodelstudies wordt P5091 goed verdragen, remt het de tumorgroei en verlengt het de overleving. Het combineren van deze verbinding met HDAC-remmer SAHA veroorzaakt synergistische anti-MM-activiteit.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • Ubiquitin Protease Assays

    Recombinante enzymen in 20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 2 mM CaCl2 en 2 mM β-mercapto-ethanol worden gedurende 30 min geïncubeerd met dosisbereiken van P5091 in een 96-well plaat vóór de toevoeging van Ub-PLA2 en NBD C6-HPC of Ub-EKL en EKL-substraat. De afgifte van een fluorescent product binnen het lineaire bereik van de assay wordt gecontroleerd met een Perkin Elmer Envision fluorescentieplaatlezer. Voertuig (2% [v/v] DMSO) en 10 mM N-ethylmaleïmide (NEM) zijn als controles opgenomen.
Celassay:

[3]
  • Cellijnen

    293T cells

  • Concentraties

    10 μM

  • Incubatietijd

    24 h

  • Methode

    Cells were treated with indicated concentration of P5091 for 24 h.
Dierstudie:

[1]
  • Dierlijke modellen

    CB-17 SCID-mice

  • Doseringen

    10 mg/kg

  • Toediening

    --

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22975377/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24900381/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35061527/

Klantproductvalidatie

MM.1S cells were treated with RRx-001 (1.25 µM), P5091 (3 µM), or RRx-001 plus P5091 for 12h; protein extracts were analyzed for total DNMT activity using EpiQuik DNMT activity kit (mean ± SD; p < 0.001; n=3).

Gegevens van [ , , Leukemia, 2016, 30(11):2187-2197 ]

(e) MM.1S cells were treated with RRx-001 (1.25 μM), P5091 (3 μM) or RRx-001 plus P5091 for 12 h; protein extracts were analyzed for total DNMT activity using the EpiQuik DNMT activity kit (mean±s.d.; P<0.001; n=3). (f) MM.1S cells were treated with RRx-001 (1.25 μM), P5091 (3 μM) or RRx-001 plus P5091 for 12 h; protein lysates were then subjected to immunoblot analysis using antibodies specific against p21, HDM2, p53 or GAPDH.

Gegevens van [ , , Leukemia, 2016, 30(11):2187-2197. ]

The USP7 inhibitor P5091 suppresses ovarian cancer cell growth in vitro. Cultured ovarian cancer cells were treated with various concentrations of P5091 as indicated and cell proliferation was measured with MTT assays. A, B, C, and D represent SKOV3, HeyA8, OVCAR-8, and T80 cells, respectively. All error bars represent standard error of the mean (n = 3, * represents p<0.05). E and F, HeyA8 and OVCAR-8 cells were treated with 50 µM of P5091 for 12 and 24 hours before examination under a phase contrast microscope. Control cells were treated with DMSO. Representative micrographs are shown to illustrate morphology changes (scale bar = 100 µm).

Gegevens van [ , , Cell Physiol Biochem, 2017, 43(5):1755-1766 ]

P5091 attenuates the TopFlash activity and the expression of Wnt target genes in colorectal cancer cells. (A) P5091 repressed the activity of Wnt signaling in HEK293W cells. HEK293W cells seeded in 96-well plates were incubated with indicated concentrations of P5091 for 24 h. The Luciferase activity was then measured and normalized to the activity of the Renilla (Relative Luciferase Activity, RLA). (B) P5091 attenuated the activation of Wnt signaling initiated by Wnt1 in HEK293 cells. HEK293 cells in 96-well plates were transiently transfected with SuperTopflash and Renilla constructs, with or without Wnt1. 3 h after transfection, cells were treated with indicated doses of P5091 for 24 h, and the luciferase activity were measured and normalized to the activity of Renilla. (C) HCT116 cells, SW480 cells and Caco-2 cells in 96-well plates were transiently cotransfected with plasmids of SuperTopflash and Renilla. After Incubation for 3 h, cells were treated with the indicated concentrations of P5091 for 24 h, after which cells were lysed and underwent dual luciferase reporter assay. The values represented the mean ± SD (n = 3). The significance was determined by student’s t test (ap < 0.05 and bp ≤ 0.01 vs. control). (D) Western blot of Wnt signaling downstream target protein in HCT116 cells, SW480 cells and Caco-2 cells treated with the indicated doses of P5091, actin were used as the loading control. (E) Quantification of indicated protein levels in (D) by NIH ImageJ software. The values represented the mean ± SD (n = 3). The significance was determined by student’s t test (ap < 0.05, bp ≤ 0.01 and cp ≤ 0.001 vs. control). RLA is the abbreviation of relative luciferase activity.

Gegevens van [ , , Biochem Pharmacol, 2017, 131:29-39 ]

Sellecks P5091 Is geciteerd door 57 Publicaties

ACC1 is a dual metabolic-epigenetic regulator of Treg stability and immune tolerance [ Mol Metab, 2025, 94:102111] PubMed: 39929287
The deubiquitinase USP7 stabilizes HER2 expression and promotes breast cancer progression [ Neoplasia, 2025, 66:101192] PubMed: 40472738
Stabilization of KPNB1 by deubiquitinase USP7 promotes glioblastoma progression through the YBX1-NLGN3 axis [ J Exp Clin Cancer Res, 2024, 43(1):28] PubMed: 38254206
ER Stress-Activated HSF1 Governs Cancer Cell Resistance to USP7 Inhibitor-Based Chemotherapy through the PERK Pathway [ Int J Mol Sci, 2024, 25(5)2768] PubMed: 38474017
USP7/Maged1-mediated H2A monoubiquitination in the paraventricular thalamus: an epigenetic mechanism involved in cocaine use disorder [ Nat Commun, 2023, 14(1):8481] PubMed: 38123574
Engineered Microparticles for Treatment of Murine Brain Metastasis by Reprograming Tumor Microenvironment and Inhibiting MAPK Pathway [ Adv Sci (Weinh), 2023, 10(8):e2206212] PubMed: 36698296
USP7 promotes non-small-cell lung cancer cell glycolysis and survival by stabilizing and activating c-Abl [ Clin Transl Med, 2023, 13(12):e1509] PubMed: 38082439
De-ubiquitination of SAMHD1 by USP7 promotes DNA damage repair to overcome oncogenic stress and affect chemotherapy sensitivity [ Oncogene, 2023, 42(22):1843-1856] PubMed: 37081042
Suppression of USP7 negatively regulates the stability of ETS proto-oncogene 2 protein [ Biomed Pharmacother, 2023, 162:114700] PubMed: 37062218
USP7 Inhibits Osteoclastogenesis via Dual Effects of Attenuating TRAF6/TAK1 Axis and Stimulating STING Signaling [ Aging Dis, 2023, 14(6):2267-2283] PubMed: 37199589

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.