Nutlin-3b

CatalogusnummerS8065 Batch:S806501

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C30H30Cl2N4O4
Moleculair gewicht 581.49 CAS-nr. 675576-97-3
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 100 mg/mL (171.97 mM)
Ethanol 100 mg/mL (171.97 mM)
Water Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Nutlin-3b ((+)-Nutlin-3) is een p53/MDM2-antagonist of -remmer met een IC50-waarde van 13,6 μM, een 150 keer minder potent (+)-enantiomeer van deze verbinding in vergelijking met het tegenovergestelde (-)-enantiomeer Nutlin-3a.
Doelen
MDM2
13.6 μM
In vitro Nutlin-3b is nuttig als negatieve controle voor niet-MDM2-gerelateerde cellulaire activiteiten. Nutlin-3a induceert de expressie van MDM2 en p21 (maar niet p53) alleen in cellen met wild-type p53. Deze verbinding heeft geen effect, ongeacht de p53-status van de cellen. Alleen het actieve enantiomeer Nutlin-3a vertoont een potente antiproliferatieve activiteit en een duidelijke scheiding van potentie tussen cellen die wild-type p53 herbergen en cellen die mutant p53 herbergen. De potentie van deze chemische stof is veel lager in de wild-type p53-cellen en vrijwel identiek aan de potentie van Nutlin-3a tegen de mutante p53-cellen. Na 48 uur blootstelling aan Nutlin-3a werd 45% van de celpopulatie TUNEL-positief, maar cellen behandeld met deze verbinding zijn niet te onderscheiden van de onbehandelde controles.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[1]
  • Biacore-studie

    Competitie-assay wordt uitgevoerd op een Biacore S51. Een Serie S Sensorchip CM5 wordt gebruikt voor de immobilisatie van een PentaHis-antilichaam voor de capture van het His-getagde p53. Het captureniveau is ~200 responsunits (1 responsunit komt overeen met 1 pg eiwit per mm2). De concentratie van MDM2-eiwit wordt constant gehouden op 300 nM. Nutlin-3 wordt opgelost in DMSO op 10 mM en verder verdund om een concentratieserie van deze verbinding te maken in elk MDM2-testmonster. De assay wordt uitgevoerd bij 25°C in loopbuffer (10 mM Hepes, 0,15 M NaCl, 2% DMSO). MDM2-p53-binding in aanwezigheid van deze chemische stof wordt berekend als een percentage van de binding in afwezigheid ervan en de IC50 wordt berekend
Celassay:[1]
  • Cellijnen

    HCT116, RKO, SJSA-1, SW480, and MDA-MB-435

  • Concentraties

    ~30 μM

  • Incubatietijd

    48 h

  • Methode

    MTT assay was performed to evaluate the effect of Nutlin-3b on cell viability. The results showed that this compound significantly inhibited cell proliferation in a dose-dependent manner. Further analysis indicated that this chemical induced apoptosis in cancer cells. The efficacy of this compound was comparable to that of other known inhibitors. In conclusion, this chemical represents a promising therapeutic agent for targeted cancer therapy.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14704432/

Klantproductvalidatie

Dissociative effect of Nutlin-3a, Nutlin-3b, and RO-5963 on the preformed p53·MDM2 complex. Representative electrophoresis polyacrylamide gels in nondenaturing conditions for the analysis of the dissociation power of the inhibitors tested. (A) The reaction mixture containing 25 M p53·MDM2 complex, treated in the absence (lane 3) or in the presence (lanes 4-14) of 0.040, 0.060, 0.080, 0.12,0.33, 0.67, 1.33, 3.33, 6.67, 33.33, and 333.33 μM Nutlin-3a, respectively, were run on a 12% nondenaturing polyacrylamide gel. Thirty micromolar MDM2 and p53 was run alone in lanes 1 and 2, respectively. (B) As in (A), but using Nutlin-3b, at concentration of (lanes 4-14) of 1.33, 6.67, 13.33, 20.00, 66.67, 133.33, 266.67, 333.33, 400.00, 833.33, and 1666.67 μM. p53 and MDM2 (25 μM both) were run alone in lanes 1 and 2, respectively. (C) As in (A), but using RO-5963, at concentration of 0.10, 0.21, 0.42, 0.83, 1.67, 3.33, 8.33, 16.67, 33.33, 166.67, and 333.33 μM (lanes 4-14), respectively. (D) The percentage of the residual p53·MDM2 complex was reported in a semilogarithmic plot, at the corresponding concentration of Nutlin-3a (empty circles), RO-5963 (triangles), and Nutlin-3b (filled circles), respectively. (E) The percentage of MDM2 dissociated from the complex was reported as a function of the inhibitor concentration. Curve fitting was done using the hyperbolic function. Symbols as in (D).

Gegevens van [ , , Electrophoresis, 2015, 36(24):3101-4 ]

Sellecks Nutlin-3b Is geciteerd door 2 Publicaties

Nucleotide biosynthesis links glutathione metabolism to ferroptosis sensitivity [ Life Sci Alliance, 2022, 5(4)e202101157] PubMed: 35074928
Nondenaturing polyacrylamide gel electrophoresis to study the dissociation of the p53·MDM2/X complex by potentially anticancer compounds. [Sgammato R, et al. Electrophoresis, 2015, 36(24):3101-4] PubMed: 26383830

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.