Nutlin-3a

CatalogusnummerS8059 Batch:S805902

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C30H30Cl2N4O4
Moleculair gewicht 581.49 CAS-nr. 675576-98-4
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 100 mg/mL (171.97 mM)
Ethanol 100 mg/mL (171.97 mM)
Water Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Nutlin-3a ((-)-Nutlin-3), het actieve enantiomeer van Nutlin-3, remt de p53/MDM2-interactie met een IC50 van 90 nM in een celvrije assay. Nutlin-3a induceert autophagy en apoptosis op een p53-afhankelijke manier.
Doelen
p53-MDM2 interaction
(Cell-free assay)
90 nM
In vitro Nutlin-3a verdringt p53 uit de bindingspocket van MDM2 en bevrijdt daardoor p53 van remming en proteasomale afbraak, wat leidt tot inductie van zijn stroomafwaartse doelen, celcyclusarrest en Apoptosis. Zeven dagen incubatie met 10 μM van deze verbinding leidde tot >90% remming van de groei van NIH3T3-cellen. Deze verbinding stabiliseert en activeert p53, en induceert p21-expressie op een dosisafhankelijke manier. Het put de S-fasecompartimenten effectief uit tot 0,2-2% en verhoogt de G1- en G2/M-fasecompartimenten. Deze chemische stof induceert Apoptosis in ~60% van de SJSA-1 en MHM cellen na 40 uur, wat verder toenam na 60 uur (respectievelijk 85% en 65%) .
In vivo Nutlin-3a onderdrukt xenograftgroei op een dosisafhankelijke manier, waarbij de hoogste dosis (200 mg/kg) een aanzienlijke tumorvermindering liet zien . Deze verbinding is een selectieve activator van de p53-route in vivo en zeer werkzaam tegen SJSA-1 osteosarcoomtumoren. Tumoren met wildtype p53 en MDM2-genamplificatie zullen het best reageren op therapie met deze chemische stof.
Kenmerken Zeer selectieve MDM2-remmer met een veel lager effect op MDMX. Meest effectief bij tumoren met wildtype p53.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[3]
  • Biacore-studies

    Competitie-assays worden uitgevoerd op een Biacore S51. Een Series S Sensorchip CM5 wordt gedervatiseerd voor immobilisatie van een PentaHis-antilichaam voor de opname van het His-getagde p53. Het opnameniveau is ~ 200 respons-eenheden (1 respons-eenheid komt overeen met 1 pg eiwit per mm2). De concentratie van MDM2-eiwit wordt constant gehouden op 300 nM. Testverbindingen worden opgelost in DMSO bij 10 mM en verder verdund om een concentratieserie van de remmer in elk MDM2-testmonster te maken. De assays worden uitgevoerd bij 25 °C in loopbuffer (10 mM Hepes, 0,15 M NaCl, 2% DMSO). MDM2-p53-binding in aanwezigheid van deze verbinding wordt berekend als een percentage van de binding in afwezigheid van deze verbinding en de IC50 wordt berekend met Microsoft Excel.
Celassay:[2]
  • Cellijnen

    OSA, T778, RMS13, U2OS, SaOS-2

  • Concentraties

    ~5 μM

  • Incubatietijd

    120 h

  • Methode

    SRB
Dierstudie:[1]
  • Dierlijke modellen

    SJSA-1 xenograft

  • Doseringen

    50, 100, 200 mg/kg twice daily

  • Toediening

    oral

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16443686/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21624110/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14704432/

Klantproductvalidatie

<p>Nutlin-3a preserved p53 expression without influencing high glucose (HG)-induced podocyte impairment. A-D: cultured podocytes were pre-treated by nutlin-3a for 2 hrs before subjected to HG treatment. Western blotting gel documents (A) and summarized data (B) showing the expression of p53 and MDM2 in podocytes under HG exposure for 24 hrs. n = 4. Western blotting gel documents (C) and summarized data (D) showing the expression of Desmin in podocytes under HG exposure for 24 hrs. n = 3. *P < 0.05 vs. Ctrl, #P < 0.05 vs. Vehl + HG. Ctrl: control; Vehl: vehicle; nutlin-3a: nutlin-3a treatment.</p>

, , J Cell Mol Med, 2017, 21(12):3435-3444

Twenty-four hours after plating 1×105 Shh-EGFP cells, media was changed to serum-free media containing vehicle, 8µM Nutlin-3a, and/or Shh (3µg/mL). Cells were also transduced with lentivirus containing pLKO.1 empty vector or LentiORF-YFP-WIP1. 48 hours later, cells were fixed in 4% paraformaldehyde, permeabilized, incubated with α-WIP1 or α-Ki-67 antibody, and mounted using media containing DAPI. Scale bar, 100µm.

Gegevens van [ , , Oncogene, 2016, 35(42):5552-5564 ]

(a) Westernblot analysis of the whole cell lysate from WT-MTEC, KO-MTEC and 1601 treated with or without Nutlin-3a (15 μM for MTEC) with antibodies as indicated.

Gegevens van [ , , Int J Cancer. 2019, 144(4):777-787 ]

Protein expression of p53, TAZ and CYP24A1 were detected by western blot after treatment with Nutlin 3a in CCLP-1.

Gegevens van [ , , Cancer Lett, 2016, 381(2):370-9 ]

Sellecks Nutlin-3a Is geciteerd door 116 Publicaties

A cancer persistent DNA repair circuit driven by MDM2, MDM4 (MDMX), and mutant p53 for recruitment of MDC1 and 53BP1 on chromatin [ Nucleic Acids Res, 2025, 53(13)gkaf627] PubMed: 40626562
Combined MEK and PARP inhibition enhances radiation response in rectal cancer [ Cell Rep Med, 2025, 6(8):102284] PubMed: 40782795
Chaperone-mediated autophagy directs a dual mechanism to balance premature senescence and senolysis to prevent intervertebral disc degeneration [ Bone Res, 2025, 13(1):62] PubMed: 40506462
WIP1 mutations suppress DNA damage triggered bypass of the mitotic timer [ EMBO J, 2025, 10.1038/s44318-025-00495-0] PubMed: 40551011
Advanced organoid models for targeting Kras-driven lung adenocarcinoma in drug discovery and combination therapy [ J Exp Clin Cancer Res, 2025, 44(1):128] PubMed: 40275403
The Prolonged Half-Life of the p53 Missense Variant R248Q Promotes Accumulation and Heterotetramer Formation with Wildtype p53 to Exert the Dominant-Negative Effect [ Cancer Res, 2025, 10.1158/0008-5472.CAN-24-1136] PubMed: 40163352
HOXC10 Protects from Skin Aging by Targeting the FZD6/Wnt/β-Catenin Signaling Pathway [ Research (Wash D C), 2025, 8:0976] PubMed: 41268215
Identification of CNOT1-CCR4-NOT as a suppressor of 53BP1-p53-p21 signaling [ Cell Rep, 2025, 44(8):116090] PubMed: 40742806
The puzzling regulation of the interferon signaling system by the p53 tumor suppressor protein [ Cell Mol Life Sci, 2025, 82(1):233] PubMed: 40512405
Reduction of lymphotoxin beta receptor induces cellular senescence via the MDMX-p53 pathway [ Cell Death Discov, 2025, 11(1):416] PubMed: 40883295

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.