NH125

CatalogusnummerS7436 Batch:S743601

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C27H45IN2
Moleculair gewicht 524.56 CAS-nr. 278603-08-0
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 100 mg/mL (190.63 mM)
Ethanol 100 mg/mL (190.63 mM)
Water Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving NH125 is een selectieve eEF-2 kinase remmer met een IC50 van 60 nM, >125-voudige selectiviteit ten opzichte van PKC, PKA en CaMKII, en tevens een potente histidine kinase remmer.
Doelen
eEF-2 kinase
60 nM
In vitro In C6 glioomcellen verlaagt NH125 het cellulaire gehalte aan fosfo-eEF-2 zonder het totale eEF-2 gehalte te beïnvloeden, en blokkeert het de celcyclusovergang bij de G1-S grens. Deze verbinding remt krachtig de cellevensvatbaarheid van 10 kankercellen met IC50 variërend van 0,7 tot 4,8 μM. Het remt effectief histidine proteïnekinasen, waaronder Envz, PhoQ, BvgS, EvgS, en produceert daardoor potente antibacteriële activiteiten tegen oxacilline-resistente Staphylococcus aureus (ORSA), vancomycine-resistente Enterococcus faecalis (VRE), penicilline-resistente Streptococcus pneumoniae (PRS), en andere Gram-positieve en Gram-negatieve bacteriën. EEF2K-remming door deze chemische stof maakt tumorcellen gevoeliger voor curcumine en velcade, die een ER-stress-inducerende werking hebben.
In vivo NH125 verlaagt de bloeddruk bij SHR en de ROS-productie, inductie van ontstekingsmoleculen en hypertrofie in de superieure mesenteriale slagader van SHR.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • eEF-2 Kinase Assay

    De eEF-2 kinase activiteit wordt gemeten met twee methoden: (a) een filter-gebaseerde assay; en (b) door immunoblotting met behulp van een anti-fosfo-eEF2 antilichaam. Voor beide worden reacties uitgevoerd in 20 μl totaal volume bevattende 50 mM HEPES (pH 7.5), 10 mM MgCl2, 1.5 mM CaCl2, 100 μg/ml calmoduline, 2 μM His-gelabeld eEF-2 en 400 nM GST-eEF-2 kinase, en ATP-mengsel [50 μM ATP met 1 μCi (γ-33P)ATP]. Het kinasemengsel zonder ATP wordt op ijs bereid en vervolgens 15 minuten bij kamertemperatuur voorgeïncubeerd. Kinase reacties worden gestart door ATP toe te voegen en gedurende 30 minuten bij 30°C te laten verlopen. Voor de filter-gebaseerde assay wordt de reactie beëindigd door 20 μl koude 1,5% fosforzuur toe te voegen, en 5 μl van de reactie wordt aangebracht op P81 Whatman fosfocellulose papier. Het papier wordt driemaal gewassen in 500 ml 0,5% fosforzuur en eenmaal met 200 ml aceton. Het papier wordt vervolgens aan de lucht gedroogd en ondergedompeld in 10 ml scintillatiemengsel. Radioactiviteit wordt geteld met behulp van een Beckton-Dickinson vloeistofscintillatieteller. Voor immunoblotting worden de reacties gestopt door toevoeging van 20 μl 3× Lamelli buffer [190 mM Tris (pH 6.8), 6% SDS, 30% glycerol, 15% 2-mercaptoethanol, en 0.003% broomfenolblauw kleurstof]. Monsters worden gedurende 5 minuten gekookt en gescheiden door 7% SDS-PAGE en verwerkt voor Western blotting zoals hieronder beschreven. Condities voor beide assays zijn gekozen om de lineariteit van de reactie met betrekking tot incubatietijd en enzymconcentratie te waarborgen.
Celassay:

[1]
  • Cellijnen

    C6, T98-G, U-138 MG, U-87 MG, A172, A2780, HeLa, PC3, OVCAR-3, MCF-7 cell lines.

  • Concentraties

    ~10 μM

  • Incubatietijd

    48-72 hours

  • Methode

    The viability of cells is measured using an MTT assay. Briefly, 5 × 104 cells are plated in 96-well plates and exposed to various concentrations of this compound for 48–72 h. The formazan product formed after 4 h incubation with MTT is dissolved in 100% DMSO and read at 550 nM using a Dynatech Microplate Reader MR5000.
Dierstudie:

[4]
  • Dierlijke modellen

    Spontaneously hypertensive rats (SHR)

  • Doseringen

    ~500 μg/kg/day

  • Toediening

    s.c.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14583488/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10830522/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23182879/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23812389/

Klantproductvalidatie

MDA-MB-231 or T47D cells were pretreated with 300 nM NH125 for 1 h, followed by treatment with 8 μM TBMS1 for 24 h. The protein levels were measured by Western blot.

Gegevens van [ , , Acta Pharmacol Sin, 2018, doi：10.1038/s41401-018-0165-9 ]

NH125 sensitizes NPC cells to lapatinib. NPC cells were treated with lapatinib or DMSO for 48 h in the presence or absence of 0.25 μM NH125. Cell viability was assessed by the CCK-8 assay. Results are expressed as means±standard deviation. *, P<0.05;**, P<0.01 and ***, P<0.001.

Gegevens van [ , , BMC Cancer, 2016, 16(1):813. ]

CNE-2 cultured in medium supplemented with 10% FBS was treated with a series of concentrations of MK-2206 for 72 hours in the presence or absence of 20 μM HCQ and 0.25 μM NH125. Cleaved caspase-3 was measured by Western blotting, and β-actin was used as a loading control.

Gegevens van [ , , Drug Des Devel Ther, 2018, 12:2655-2663 ]

Sellecks NH125 Is geciteerd door 3 Publicaties

Tubeimoside-1, a triterpenoid saponin, induces cytoprotective autophagy in human breast cancer cells in vitro via Akt-mediated pathway [Jiang SL Acta Pharmacol Sin, 2018, 10.1038/s41401-018-0165-9] PubMed: 30315250
Inhibiting eEF-2 kinase-mediated autophagy enhanced the cytocidal effect of AKT inhibitor on human nasopharyngeal carcinoma [Zhao YY Drug Des Devel Ther, 2018, Drug Des Devel Ther] PubMed: 30214154
Inhibition of eEF-2 kinase sensitizes human nasopharyngeal carcinoma cells to lapatinib-induced apoptosis through the Src and Erk pathways [Liu L, et al. BMC Cancer, 2016, 16(1):813] PubMed: 27756261

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.