CC-5013 (Lenalidomide)

Lenalidomide induceert sterk de productie van IL-2 en sIL-2R. Deze door de verbinding geïnduceerde tyrosinefosforylering van CD28 op T-cellen wordt gevolgd door een stroomafwaartse activering van NF-κB. [2]

Deze verbinding en pomalidomide remmen de autoubiquitinatie van CRBN in HEK293 T-cellen die thalidomide-bindend competent wildtype CRBN tot expressie brengen, maar niet thalidomide-bindend defect CRBN(YW/AA). Overexpressie van wildtype CRBN-eiwit, maar niet CRBN(YW/AA) mutant eiwit, in KMS12 myeloomcellen, versterkt de pomalidomide-gemedieerde reducties in c-myc en IRF4 expressie en verhogingen in p21(WAF-1) expressie. Langdurige selectie voor resistentie tegen deze verbinding in H929 myeloomcellijnen gaat gepaard met een reductie in CRBN, terwijl in DF15R myeloomcellen die resistent zijn tegen zowel pomalidomide als deze chemische stof, CRBN-eiwit niet detecteerbaar is. [3]

Deze chemische stof voorkomt de inductie van defecten door de expressie van remmende moleculen van tumorcellen te downreguleren. Het voorkomt de inductie van tumor-geïnduceerde T-cel lytische synapsdysfunctie. Deze verbindingbehandeling blokkeert CLL-cel-geïnduceerde T-cel actine synapsdysfunctie, bootst antilichaamblokkade na en downreguleert de expressie van CLL-remmende liganden en hun receptoren op T-cellen. Deze behandeling voorkomt tumor-geïnduceerde immuunsuppressie in FL, DLBCL, HL, MM, SCC en OC en downreguleert de expressie van immunosuppressieve liganden op alle onderzochte tumorcellen. CTL-dodende functie neemt significant toe na antilichaamblokkade van CLL-remmende liganden of deze chemische behandeling vergeleken met controlebehandelingen. Behandeling van autologe CLL-T-cel co-culturen met dit middel keert de verminderde CD8⁺ T-cel lytische synapsvorming en granzyme B-trafficking om. [4]

De inductie van angiogenese door bFGF wordt significant geremd door orale behandeling met Lenalidomide op een dosisafhankelijke manier. Deze verbinding vermindert significant het percentage gevasculariseerd gebied van 5,16% (controlegroep) tot 2,58% (50 mg/kg). Het vermindert significant de berekende totale MVL van 21,07 (controle) tot 8,11 (50 mg/kg). Deze chemische stof remt significant de HUVEC-migratie door de fibronectine-gecoate membranen naar 0,1 ng/mL bFGF bij 100 μM, 1 ng/mL VEGF bij concentraties van 10 μM en 100 μM. [5]

• Analyse voor remming van TNF-synthese door humane PBMC's

  Humane PBMC's van normale donoren worden verkregen door Ficoll-Hypaque dichtheidsgradiëntcentrifugatie. Cellen (10⁶ cellen/mL) worden gekweekt in RPMI aangevuld met 10 AB+ serum, 2 mM l-glutamine, 100 U/mL penicilline en 100 μg/mL streptomycine. Lenalidomide wordt opgelost in DMSO bij 20 mg/mL; verdere verdunning wordt gedaan met kweekmedium. De uiteindelijke DMSO-concentratie in alle assays, inclusief de controles, is 0,25%. Dit compound wordt 1 uur voorafgaand aan de toevoeging van LPS aan de cellen toegevoegd. PBMC's (10⁶ cellen/mL) worden gestimuleerd met 1 μg/mL LPS van Salmonella minnesota R595. Cellen worden, in drievoud, geïncubeerd met LPS gedurende 18-20 uur bij 37 °C in 5% CO₂. Supernatanten worden vervolgens geoogst en geanalyseerd op cytokineniveaus. In sommige experimenten worden supernatanten ingevroren bewaard bij -70 °C tot gebruik. Celviabiliteit wordt bepaald door de Trypanblau-uitsluitingskleurstofmethode. De concentratie van TNFα in de kweeksupernatanten wordt bepaald door ELISA. Dit chemische middel wordt in minimaal drie afzonderlijke experimenten getest. Percentage remming wordt bepaald als 100 × [1 - (cytokine(experimenteel)/cytokine(controle))].

• Dierlijke modellen

  Adult male Sprague-Dawley rats bearing HUVECs cells

• Doseringen

  50 mg/kg and 250 mg/kg

• Toediening

  Administered via i.p.