LCL161

LCL161 bindt met hoge affiniteit aan remmers van apoptose-eiwitten (IAP's) en initieert de vernietiging van cIAP1 en cIAP2, wat de apoptose verder induceert via caspase-activering. Deze verbinding remt de groei van FLT3-ITD-expresserende cellen bescheiden wanneer het alleen wordt toegediend, met een IC50 variërend van ~0,5 μM (Ba/F3-FLT3-ITD-cellen) tot ~4 μM (MOLM13-luc+-cellen). De potentie van dit middel tegen de D835Y-mutant blijkt aanzienlijk hoger te zijn, met een IC50 van ~50 nM wanneer getest tegen Ba/F3-D835Y-cellen. Behandeling van MOLM13-luc+-cellen met een combinatie van deze verbinding en PKC412 leidt tot significant meer celdoding dan elk middel afzonderlijk, waarbij Calcusyn-combinatie-indices synergie suggereren. PKC412 en deze chemische stof induceren apoptose van MOLM13-luc+-cellen. De combinatie van PKC412 en dit middel leidt tot een hogere inductie van apoptose dan elk middel afzonderlijk. Het is in staat om stroma-gemedieerde redding van mutante FLT3-expresserende cellen te omzeilen door een positieve combinatie met PKC412. Deze verbinding remt de groei van Ba/F3.p210-cellen met een IC50 van ~100 nM. Het heeft ook activiteit aangetoond tegen medicijnresistente cellen die puntmutaties in de doelwiteiwitten tot expressie brengen. Dit middel bij 1000 nM is in staat om Ba/F3-afgeleide cellijnen die resistentie tegen PKC412 verlenen, die FLT3-ITD met puntmutaties in de ATP-bindende pocket van FLT3 tot expressie brengen, grotendeels of volledig te doden. Het toont ook activiteit bij concentraties variërend van 100 tot 1000 nM tegen Ba/F3-cellen die diverse tot expressie brengen. [1]

Deze verbinding wordt geëvalueerd tegen de 23 cellijnen in het in vitro panel van het Pediatric Preclinical Testing Program (PPTP) met behulp van 96 uur. Het bereikt 50% groeiremming tegen slechts 3 van de 23 geteste PPTP-cellijnen bij een concentratie van 10 μM. De drie cellijnen omvatten twee T-cel-ALL-cellijnen (COG-LL-317 en CCRF-CEM) en een anaplastisch grootcellig lymfoomcellijn (Karpas-299), waarbij CCRF-CEM en Karpas-299 de laagste relatieve IC50-waarden lieten zien (respectievelijk 0,25 en 1,6 μM). [2]

Het vertoont immunomodulerende eigenschappen op humane immuunsubsets. T-lymfocyten behandeld met deze verbinding vertonen significant verbeterde cytokinesecretie bij activering, met weinig effect op de overleving of proliferatie van CD4- en CD8 T-cellen. Behandeling van perifere bloedmononucleaire cellen met dit middel verbetert significant de priming van naïeve T-cellen met synthetische peptiden in vitro. Myeloïde dendritische cellen ondergaan fenotypische rijping onder invloed van dit chemische middel en vertonen een verminderd vermogen om een tumorantigeen-gebaseerd vaccin kruispresenteren. Deze effecten worden potentieel gemedieerd door een waargenomen activering van de canonieke en niet-canonieke NF-κB-routes, volgend op deze verbinding met een resulterende opregulatie van anti-apoptotische moleculen. [3]

LCL161 versterkt significant het vermogen van PKC412 om de groei van Ba/F3-FLT3-ITD-luc+-cellen in vivo te remmen. Van deze verbinding is ook aangetoond dat het positief combineert met de standaard chemotherapeutische middelen, Ara-c en doxorubicine, tegen FLT3-ITD-expresserende cellen en tegen D835Y-expresserende cellen. Er wordt een additief effect bereikt door beide chemische middelen te combineren bij het onderdrukken van leukemie groei. Dit middel (100 mg/kg) versterkt de in vivo effecten van hoge tot matige doses op de leukemiebelasting bij muizen. [1]

Deze verbinding wordt getest tegen de in vivo panels van het Pediatric Preclinical Testing Program (PPTP) (30 of 75 mg/kg [solide tumoren] of 100 mg/kg [ALL]) tweemaal per week oraal toegediend. Het induceert significante verschillen in EFS-distributie bij ongeveer een derde van de solide tumor xenografts (osteosarcoom en glioblastoom), maar niet bij ALL-xenografts. Er worden geen objectieve tumorresponsen waargenomen. In vivo demonstreert dit chemische middel beperkte enkelvoudige activiteit tegen de bestudeerde pediatrische preklinische modellen. [2]

• Cellijnen

  Human T-cell ALL cell lines COG-LL-317

• Concentraties

  ~10 μM

• Incubatietijd

  96 hours

• Methode

  In vitro testing is performed using DIMSCAN

• Dierlijke modellen

  CB17SC scid−/− female mice

• Doseringen

  30 mg/kg

• Toediening

  o.g.