Imatinib (STI571)

In vitro assays voor de remming van een panel van tyrosine- en serine/threonine-proteïnekinasen laten zien dat Imatinib de v-Abl-tyrosinekinase en PDGFR krachtig remt met een IC50 van respectievelijk 0,6 en 0,1 μM. [1]

Deze verbinding remt de SLF-afhankelijke activering van wild-type c-Kit kinase-activiteit met een IC50 voor deze effecten van ongeveer 0,1 μM, wat vergelijkbaar is met de concentratie die nodig is voor de remming van PDGFR. [2]

Het vertoont groeiremmende activiteit op de humane bronchiale carcinoïde cellijn NCI-H727 en de humane pancreascarcinoïde cellijn BON-1 met een IC50 van respectievelijk 32,4 en 32,8 μM. [3]

Een recente studie toont aan dat deze chemische stof het potentieel heeft om zijn antileukemische effecten bij chronische myeloïde leukemie uit te oefenen door hERG1 K(+) kanalen te down-reguleren, die sterk tot expressie komen in leukemiecellen en van uitzonderlijk belang lijken te zijn bij het bevorderen van leukemogenese. [4]

Imatinib produceert een verschillend antitumor effect op drie xenograft tumoren afkomstig van chirurgische monsters van verse humane kleincellige longkankers, met respectievelijk 80%, 40% en 78% groeiremming van SCLC6, SCLC61 en SCLC108 tumoren, en geen significante remming van SCLC74 groei. [5]

Bij ApoE(-/-) muizen gevoed met een vetrijk dieet, vermindert deze verbinding het door vetrijk dieet geïnduceerde lipide kleuringsoppervlak significant met 30%, 27% en 35% vergeleken met onbehandelde controles met een vetrijk dieet wanneer toegediend via gavage bij respectievelijk 10, 20 en 40 mg/kg, en onderdrukt de lipideaccumulatie in de halsslagader. [6]

• PDGF-receptorkinaseactiviteit

  PDGF-receptor wordt geïmmunoprecipiteerd uit BALB/c 3T3 cellysaten met konijnenantiserum tegen de murine PDGF-receptor gedurende 2 uur op ijs. Proteïne A-Sepharose-kralen worden gebruikt om de antigeen-antilichaamcomplexen te verzamelen. De immunoprecipitaten worden tweemaal gewassen met TNET (50 mM Tris, pH 7,5, 140 mM NaCl, 5 mM EDTA, 1% Triton X-100), eenmaal met TNE (50 mM Tris, pH 7,5, 140 mM EDTA), en eenmaal met kinasebuffer (20 mM Tris, pH 7,5, 10 mM MgCl₂). Na stimulatie met PDGF (50 ng/mL) gedurende 10 minuten bij 4 °C, worden verschillende concentraties van deze verbinding aan het reactiemengsel toegevoegd. PDGF-receptorkinaseactiviteit wordt bepaald door incubatie met 10 μCi [7-³³P]-ATP en 1 μM ATP gedurende 10 minuten bij 4 °C. Immuuncomplexen worden gescheiden door SDS-PAGE op 7,5% gels.

• Cellijnen

  BON-1 cells and NCI-H727 cells

• Concentraties

  ~100 μM

• Incubatietijd

  48 hours

• Methode

  BON-1 cells and NCI-H727 cells are seeded into flat-bottomed 96-well plates in triplicate and allowed to adhere overnight in 10% fetal bovine serum-supplemented DMEM or RPMI 1640 complete medium, respectively; the medium is then exchanged for serum-free medium (negative control) or serum-free medium containing serial dilutions of this compound. After 48 hours (control cultures do not reach confluence), the number of metabolically active cells is determined by the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay, and absorbance is measured in a Packard Spectra microplate reader at 540 nm. Growth inhibition is calculated using the following formula: inhibition rate = (1 − a / b) × 100%, where a and b are the absorbance values of the treated and control groups, respectively.