HS-1371

CatalogusnummerS8775 Batch:S877501

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C₂₄H₂₄N₄O

Moleculair gewicht

384.47

CAS-nr.

2158197-70-5

Oplosbaarheid (25°C)*

In vitro

DMSO

13 mg/mL (33.81 mM)

Ethanol

4 mg/mL (10.4 mM)

Water

Insoluble

In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)

Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.	0.650mg/ml (1.69mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 13 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.	0.650mg/ml (1.69mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 13 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving

HS-1371 is een krachtige RIP3 kinase remmer met een IC50 van 20,8 nM. Het bindt aan de ATP-bindingsplaats van RIP3 en remt de ATP-binding om de enzymatische activiteit van RIP3 in vitro te voorkomen.

Doelen

RIP3 kinase

20.8 nM

In vitro

HS-1371 vertoont een remmend effect op S227-autofosforylering van RIP3 op basisniveau. Het vertoont een volledig remmend effect op TNF-geïnduceerde necroptose-signalering, waarbij geen fosforylering van RIP3 en MLKL in HT-29-cellen wordt waargenomen. Remming van RIP3 kinase-activiteit door deze verbinding blokkeert de vorming van het necrosome-complex, wat een verstoring van MLKL-rekrutering aantoont. Deze chemische stof redt cellen van TNF-geïnduceerde necroptose. Het redt cellen van RIP3-afhankelijke necroptotische celdood, maar niet van Apoptosis celdood.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:^{^[1]}	Enzymatische testen De remmende activiteiten van alle verbindingen ten opzichte van RIP3 werden gemeten door Reaction Biology Corp met behulp van radiometrische kinase-assays ([γ-32P]ATP). De enzymatische activiteit van RIP3 werd gemonitord met 20 μM myeline-basisproteïne (MBP) opgelost in vers bereide reactiebuffer (20 mM HEPES (pH 7.5), 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA, 0.02% BRIJ-35, 0.02 mg/mL BSA, 0.1 mM Na3VO4, 2 mM DTT, 1% DMSO). Elke vermeende RIP3-remmer werd opgelost in 100% DMSO in specifieke concentraties en serieel verdund met epMotion 5070 in DMSO. Humane RIP3 en 20 μM peptidenubstraat (MBP) werden aan de reactiebuffer toegevoegd. Na toevoeging van de kandidaat-remmer opgelost in DMSO aan het kinase-reactiemengsel met behulp van akoestische technologie (Echo550; nanoliterbereik), werd het reactiemengsel 20 minuten bij kamertemperatuur geïncubeerd. Om de enzymatische reactie te initiëren, werd 33P-ATP met een specifieke activiteit van 10 μCi/μL aan het reactiemengsel toegevoegd om een uiteindelijke ATP-concentratie van 10 μM te bereiken. Radioactiviteit werd vervolgens gemonitord met behulp van de filterbindingsmethode na incubatie van het reactiemengsel gedurende 2 uur bij kamertemperatuur. Bij gegeven remmerconcentraties werd de biochemische potentie gemeten aan de hand van het percentage resterende kinase-activiteit ten opzichte van de vehikel (dimethylsulfoxide) reactie. Curve-fits en IC50-waarden werden vervolgens verkregen met behulp van het PRISM-programma. De ATP-competitieve remmer staurosporine (STSP) werd in dit onderzoek als positieve controle gebruikt vanwege zijn hoge biochemische potentie tegen verschillende kinasen, waaronder RIP3.
Celassay:^{^[1]}	Cellijnen HT-29 cells Concentraties 5 μM Incubatietijd 2 h Methode HT-29 cells were pretreated with Nec-1 (40 μM), DAB (5 μM) or HS-1371 (5 μM) for 2 h and then treated with TSZ for 4 h. Cell lysates were immunoprecipitated with anti-RIP3 antibody.

Kinase-assay:^{^[1]}

Enzymatische testen
De remmende activiteiten van alle verbindingen ten opzichte van RIP3 werden gemeten door Reaction Biology Corp met behulp van radiometrische kinase-assays ([γ-32P]ATP). De enzymatische activiteit van RIP3 werd gemonitord met 20 μM myeline-basisproteïne (MBP) opgelost in vers bereide reactiebuffer (20 mM HEPES (pH 7.5), 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA, 0.02% BRIJ-35, 0.02 mg/mL BSA, 0.1 mM Na3VO4, 2 mM DTT, 1% DMSO). Elke vermeende RIP3-remmer werd opgelost in 100% DMSO in specifieke concentraties en serieel verdund met epMotion 5070 in DMSO. Humane RIP3 en 20 μM peptidenubstraat (MBP) werden aan de reactiebuffer toegevoegd. Na toevoeging van de kandidaat-remmer opgelost in DMSO aan het kinase-reactiemengsel met behulp van akoestische technologie (Echo550; nanoliterbereik), werd het reactiemengsel 20 minuten bij kamertemperatuur geïncubeerd. Om de enzymatische reactie te initiëren, werd 33P-ATP met een specifieke activiteit van 10 μCi/μL aan het reactiemengsel toegevoegd om een uiteindelijke ATP-concentratie van 10 μM te bereiken. Radioactiviteit werd vervolgens gemonitord met behulp van de filterbindingsmethode na incubatie van het reactiemengsel gedurende 2 uur bij kamertemperatuur. Bij gegeven remmerconcentraties werd de biochemische potentie gemeten aan de hand van het percentage resterende kinase-activiteit ten opzichte van de vehikel (dimethylsulfoxide) reactie. Curve-fits en IC50-waarden werden vervolgens verkregen met behulp van het PRISM-programma. De ATP-competitieve remmer staurosporine (STSP) werd in dit onderzoek als positieve controle gebruikt vanwege zijn hoge biochemische potentie tegen verschillende kinasen, waaronder RIP3.

Celassay:^{^[1]}

Cellijnen
HT-29 cells
Concentraties
5 μM
Incubatietijd
2 h
Methode
HT-29 cells were pretreated with Nec-1 (40 μM), DAB (5 μM) or HS-1371 (5 μM) for 2 h and then treated with TSZ for 4 h. Cell lysates were immunoprecipitated with anti-RIP3 antibody.

Referenties

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30237400/

Sellecks HS-1371 Is geciteerd door 3 Publicaties

MRE11 liberates cGAS from nucleosome sequestration during tumorigenesis [ Nature, 2024, 625(7995):585-592]	PubMed: 38200309
Necroptotic virotherapy of oncolytic alphavirus M1 cooperated with Doxorubicin displays promising therapeutic efficacy in TNBC [ Oncogene, 2021, 10.1038/s41388-021-01869-4]	PubMed: 34155344
Inhibition of Cardiac RIP3 Mitigates Early Reperfusion Injury and Calcium-Induced Mitochondrial Swelling without Altering Necroptotic Signalling [ Int J Mol Sci, 2021, 22(15)7983]	PubMed: 34360749

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.