GW5074

CatalogusnummerS2872 Batch:S287201

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C15H8Br2INO2
Moleculair gewicht 520.94 CAS-nr. 220904-83-6
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 104 mg/mL (199.63 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
30%propylene glycol 5%Tween80 65%D5W

Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.

 30.000mg/ml (57.59mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 300 μL of 100 mg/ml clarified propylene glycol stock solution to 50 μL of Tween 80, mix evenly to clarify it; then continue to add 650 μL of D5W to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving GW5074 is een potente en selectieve c-Raf-remmer met een IC50 van 9 nM, er wordt geen effect op de activiteiten van JNK1/2/3, MEK1, MKK6/7, CDK1/2, c-Src, p38 MAP, VEGFR2 of c-Fms waargenomen. Deze verbinding remt LK-geïnduceerde apoptose.
Doelen
C-Raf
(Cell-free assay)
9 nM
In vitro

GW5074 is een potente en specifieke remmer van c-Raf met een IC50 van 9 nM en heeft in vitro geen effect op MKK6, MKK7, p38 MAP kinase en cdks. Behandeling van neuronale culturen met deze verbinding maakt echter accumulatie van activerende modificaties op c-Raf en ook B-Raf mogelijk. De remming van LK-geïnduceerde apoptose door deze remmer in cerebellaire korrelneuronen is niet MEK-ERK-afhankelijk. Deze chemische stof vertraagt de neerwaartse regulatie van Akt-activiteit, maar remt apoptose via een Akt-onafhankelijk mechanisme. Het beïnvloedt Ras, nucleaire factor-kappa B en c-jun. Deze verbinding remt celdood veroorzaakt door neurotoxines in korrelcellen en andere neuronale typen.

In vivo

GW5074 is beschermend in een in vivo experimenteel model van de ziekte van Huntington. Deze verbinding (5 mg/Kg) voorkwam volledig uitgebreide bilaterale striatale laesies geïnduceerd door 3-NP bij muizen.  Het onderdrukt door zijstroomrook geïnduceerde luchtweghyperresponsiviteit bij muizen.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • Affiniteitsbepaling

    In het algemeen worden in vitro kinaseassays uitgevoerd met gezuiverde kinase en synthetische substraten onder standaardcondities met behulp van de Kinase Profiling-service van Upstate Biotechnology. Kort gezegd wordt voor elke assay 5–10 mU gezuiverde kinase gebruikt. Voor GSK3β, cdk1, cdk2, cdk3, cdk5 wordt de kinase 40 min bij kamertemperatuur geïncubeerd met 1 μM GW5074 in een buffer die 8 mM MOPS, pH 7,2, 0,2 mM EDTA, 10 mM magnesiumacetaat en [c- 33P-ATP] bevat. Kinaseactiviteit wordt gekwantificeerd door 33P-incorporatie te meten door een aliquot op P30-filters te spuiten, te wassen in 50 mM fosforzuur en scintillatietelling uit te voeren. De buffercompositie voor c-Raf, JNK1, JNK2, JNK3, MEK1, MKK6, MKK7 is 50 mM Tris pH 7,5, 0,1 mM EGTA, 10 mM magnesiumacetaat en [c- 33P-ATP]. De gebruikte peptidesubstraten zijn als volgt: Voor c-Raf, 0,66 mg/mL MBP; voor cdks, 0,1 mg/mL histone H1; voor JNKs, 3 μM ATF2; voor MEK1, 1 μM MAPK2; voor MKK6, 1 μM SAPK2a en voor MKK7, 2 μM JNK1α.
Celassay:

[1]
  • Cellijnen

    Cortical neurons

  • Concentraties

    ~5 μM

  • Incubatietijd

    24 hours

  • Methode

    HCA is diluted from 100-fold concentrated solutions that are adjusted to pH 7.5. To evaluate the effects of GW5074 on HCA-induced cytotoxicity, this compound is added at the time cortical neurons are exposed to HCA. Viability is assessed 24 h later.
Dierstudie:

[1]
  • Dierlijke modellen

    Eight-week-old C57BL/6 male mice administered with 50–55 mg/kg 3-NP

  • Doseringen

    0.5–10 mg/kg

  • Toediening

    i.p.

Referenties

  • http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=15255937
  • http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=16750187
  • http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2599896/

Klantproductvalidatie

<p> </p><div>Effect of select kinase inhibitors on DF508-CFTR maturation analyzed by immunoblotting. 293MSR-GT cells stably expressing DF508-CFTR were treated with 15 uM kinase inhibitors or 0.3% DMSO (vehicle control), as indicated, grown at 37 °C for 48 h, and the appearance of the mature protein, band C, monitored by immunoblotting with anti-CFTR antibodies. Band B represents the immature protein. DMSO represents vehicle-alone control, 27 °C represents  temperature rescue of F508-CFTR at 27 °C, 37 °C represents untreated DF508-CFTR control, and WT represents WT-CFTR. Top panels depict the anti-CFTR immunoblot and bottom panels depict actin (loading) control. ** represents cellular toxicity.</div><p> </p>

Gegevens van [ Mol Cell Proteomics , 2012 , 11, 745-57 ]

<p>Effect of kinase inhibitors on cell surface expression of DF508-CFTR analyzed by flow cytometry. Summary of increase in cell surface expression of DF508-CFTR (% change in fluorescence intensity) of the hits analyzed by flow cytometry (two independent experiments, 10,000 live cells per treatment per experiment).</p>

Gegevens van [ Mol Cell Proteomics , 2012 , 11, 745-57 ]

F. Cell viability of VemR A375 melanoma cells treated with linsitinib, GW5074 individually or in different combination with 2 uM vemurafenib for 72 hrs. G. The expression levels of p-ERK and p-AKT proteins of VemR A375 melanoma cells treated with linsitinib, GW5074 individually or in different combination with 2 uM vemurafenib for 72 hrs. These experiments were carried out in triplicate and results are shown as the mean ± SD. *p < 0.05, **p < 0.01.

, , Oncotarget, 2016, 7(33):53558-53570

(I,J) Pretreatment with the C-Raf inhibitor GW5074 (5 μmol/L) abolished the protective efficacy of nesfatin-1 (10−9 mol/L) on the MPP+-induced collapse of the ΔΨm. (K,L) Pretreatment with GW5074 (5 μmol/L) abolished the protective effect of nesfatin-1 (10−9 mol/L) on caspase-3 activation induced by MPP+. *P < 0.05 compared with the control group. #P < 0.05 compared with the MPP+-treated group.

Gegevens van [ , , Sci Rep, 2017, 7:40961 ]

Sellecks GW5074 Is geciteerd door 28 Publicaties

Evaluation of a Novel Pan-RAS Inhibitor in 3D Bioprinted Tumor Models [ Cancers (Basel), 2025, 17(18)2958] PubMed: 41008802
Single-cell RNA sequencing reveals the CRTAC1+ population actively contributes to the pathogenesis of spinal ligament degeneration by SPP1+ macrophage [ Aging Cell, 2024, e14320.] PubMed: 39158018
Evaluating Novel Combinations of Polyamine Targeting Therapeutics in Pancreatic Ductal Adenocarcinoma [ University of Central Florida, 2022, ] PubMed: none
Degradation of lipid droplets by chimeric autophagy-tethering compounds [ Cell Res, 2021, 10.1038/s41422-021-00532-7] PubMed: 34239073
DFMO Improves Survival and Increases Immune Cell Infiltration in Association with MYC Downregulation in the Pancreatic Tumor Microenvironment [ Int J Mol Sci, 2021, 22(24)13175] PubMed: 34947972
Kinase Inhibitor Library Screening Identifies the Cancer Therapeutic Sorafenib and Structurally Similar Compounds as Strong Inhibitors of the Fungal Pathogen Histoplasma capsulatum [ Antibiotics (Basel), 2021, 10(10)1223] PubMed: 34680804
Stiffness-mediated mesenchymal stem cell fate decision in 3D-bioprinted hydrogels [ Burns Trauma, 2020, 8:tkaa029] PubMed: 32733974
Depolarization-Dependent C-Raf Signaling Promotes Hyperexcitability and Reduces Opioid Sensitivity of Isolated Nociceptors after Spinal Cord Injury [ J Neurosci, 2020, 40(34):6522-6535] PubMed: 32690613
Cigarette smoke induction of S100A9 contributes to chronic obstructive pulmonary disease [ Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol, 2020, 10.1152/ajplung.00207.2020] PubMed: 32964723
Reversal of Infected Host Gene Expression Identifies Repurposed Drug Candidates for COVID-19 [ bioRxiv, 2020, 2020/9/20.4.7.30734] PubMed: 32511305

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.