Omipalisib (GSK2126458)

CatalogusnummerS2658 Batch:S265807

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C25H17F2N5O3S
Moleculair gewicht 505.5 CAS-nr. 1086062-66-9
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 100 mg/mL (197.82 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Omipalisib (GSK2126458, GSK458) is een zeer selectieve en potente remmer van p110α/β/δ/γ, mTORC1/2 met een Ki van respectievelijk 0,019 nM/0,13 nM/0,024 nM/0,06 nM en 0,18 nM/0,3 nM in celvrije assays. Deze verbinding induceert Autophagy. Fase 1.
Doelen
p110α
(Cell-free assay)		 p110δ
(Cell-free assay)		 p110γ
(Cell-free assay)		 p110β
(Cell-free assay)		 mTORC1
(Cell-free assay)		 Meer bekijken
0.019 nM(Ki) 0.024 nM(Ki) 0.06 nM(Ki) 0.13 nM(Ki) 0.18 nM(Ki)
In vitro Omipalisib (GSK2126458) remt potent de activiteit van veelvoorkomende activerende mutanten van p110α (E542K, E545K en H1047R) die in menselijke kanker voorkomen, met een Ki van respectievelijk 8 pM, 8 pM en 9 pM. Deze verbinding veroorzaakt een significante reductie van de pAkt-S473-niveaus met opmerkelijke potentie in T47D- en BT474-cellen met een IC50 van respectievelijk 0,41 nM en 0,18 nM. Bovendien leidt het tot een G1-celcyclusarrest en produceert het een remmend effect op celproliferatie in een groot panel van cellijnen, waaronder de T47D- en BT474-borstkankerlijnen met een IC50 van respectievelijk 3 nM en 2,4 nM.
In vivo In een BT474 humaan tumoxenograftmodel resulteert Omipalisib (GSK2126458) behandeling in een dosisafhankelijke reductie van pAkt-S473-niveaus, en vertoonde dosisafhankelijke tumorgroeiremming bij een lage dosis van 300 μg/kg. Bovendien vertoont het een lage bloedklaring en een goede orale biologische beschikbaarheid in vier preklinische soorten (muis, rat, hond en aap).

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[1]
  • HTRF In vitro Profileringsassays voor PI3K-remming

    Verbindingen worden serieel verdund (3-voudig in 100% DMSO) over een 384-wells polypropyleen moederplaat van kolom 1 tot kolom 12 en kolom 13 tot kolom 24, om 11 concentraties voor Omipalisib (GSK2126458) te verkrijgen. Kolommen 6 en 18 bevatten alleen DMSO. Zodra de titraties zijn gemaakt, wordt 0,05 μL overgebracht naar een 384-wells low-volume assayplaat. Deze assayplaat bevat drie farmacologische controles (bekende PI3K-remmers) en 3 assaycontroles: (1) Enzym zonder remmer; (2) Buffer minus enzym, en (3) Buffer minus enzym plus natief PIP3. DMSO wordt gestempeld in alle putjes van kolommen 6 en 18. PIP3 wordt toegevoegd bij 40 μM in 1X reactiebuffer (1μL van 200 μM PIP3) aan afwisselende rijen van kolom 18 (putjes 18 B, D, F, H, J, L, N, P). De geen-enzym-controle-reacties worden uitgevoerd in putjes 18 A, C, E, G, I, K, M, O (0,1μL van 100% DMSO). De PI3-Kinase-profileringsassay is geoptimaliseerd met behulp van de HTRF-kit. De assaykit bevat zeven reagentia: 1) 4X Reactiebuffer; 2) natief PIP2 (substraat); 3) Stop A (EDTA); 4) Stop B (Biotine-PIP3); 5) Detectiemix A (Streptavidine-APC); 6) Detectiemix B (Eu-gelabeld Anti-GST plus GST-getagd PHdomein); 7) Detectiemix C (KF). PI3Kinase Reactiebuffer wordt bereid door de stock 1:4 te verdunnen met gedeïoniseerd water. Vers bereid DTT wordt op de dag van gebruik toegevoegd in een eindconcentratie van 5 mM. Enzymadditie en compound pre-incubatie worden geïnitieerd door de toevoeging van 2,5μL PI3K (met tweemaal zijn eindconcentratie) in 1X reactiebuffer aan alle putjes met behulp van een Multidrop Combi. Platen worden gedurende 15 minuten bij kamertemperatuur geïncubeerd. Reacties worden geïnitieerd door toevoeging van 2,5μL 2X substraatoplossing (PIP2 en ATP in 1X reactiebuffer) met behulp van een Multidrop Combi. Platen worden gedurende één uur bij kamertemperatuur geïncubeerd. Reacties worden gestopt door toevoeging van 2,5μL stopoplossing (Stop A en Stop B voorgemengd in een verhouding van respectievelijk 5:1) aan alle putjes met behulp van de Multidrop Combi. De gestopte reacties worden vervolgens verwerkt om productvorming te detecteren door 2,5μL detectieoplossing toe te voegen aan alle putjes met behulp van de Multidrop Combi (Detectiemix C, Detectiemix A en Detectiemix B samen gecombineerd in een 18:1:1-verhouding, d.w.z.: voor een totaal volume van 6000 μL, meng 5400 μL Detectiemix C, 300μL Detectiemix A en 300 μL Detectiemix B. Opmerking: deze oplossing moet 2 uur voor gebruik worden bereid). Na een incubatie van één uur in het donker wordt het HTRF-signaal gemeten op de Envision plaatlezer ingesteld voor 330nm excitatie en dubbele emissiedetectie bij 620nm (Eu) en 665nm (APC).
Celassay:[1]
  • Cellijnen

    BT474, HCC1954 and T-47D cells

  • Concentraties

    0-1 μM

  • Incubatietijd

    72 hours

  • Methode

    BT474, HCC1954 and T-47D (human breast) are cultured in RPMI-1640 containing 10% fetal bovine serum at 37 °C in 5% CO2 incubator. Cells are split into T75 flask two to three days prior to assay set up at density which yields approximately 70-80% confluence at time of harvest for assay. Cells are harvested using 0.25% trypsin-EDTA. Cell counts are performed on cell suspension using Trypan Blue exclusion staining. Cells are then plated in 384 well black flat bottom polystyrene in 48 μL of culture media per well at 1,000 cells/well. All plates are placed at 5% CO2, 37 °C overnight and Omipalisib (GSK2126458) is added the following day. One plate is treated with CellTiter-Glo for a day 0 (t=0) measurement and read as described below. This compound is prepared in clear bottom polypropylene 384 well plates with consecutive two fold dilutions. 4 μL of these dilutions are added to 105 μL culture media, after mixing the solution, 2 μL of these dilutions are added into each well of the cell plates. The final concentration of DMSO in all wells is 0.15%. Cells are incubated at 37 °C, 5% CO2 for 72 hours. Following 72 hours of incubation with it each plate is developed and read. CellTiter-Glo reagent is added to assay plates using a volume equivalent to the cell culture volume in the wells. Plates are shaken for approximately two minutes and incubated at room temperature for approximately 30 minutes and chemiluminescent signal is read on the Analyst GT reader. Results are expressed as a percent of the t=0 and plotted against the compound concentration. Cell growth inhibition is determined for this compound by fitting the dose response with a 4 or 6 parameter curve fit using XLfit software and determining the concentration that inhibits 50% of the cell growth (gIC50) with the Y min as the t=0 and Y max as the DMSO control. Value from wells with no cells is subtracted from all samples for background correction.
Dierstudie:[1]
  • Dierlijke modellen

    Human BT474 tumors implanted in mice.

  • Doseringen

    ≤300 μg /kg

  • Toediening

    Administered via p.o.

Referenties

  • http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/ml900028r
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22389471/

Klantproductvalidatie

Dr.Wang Wei from NanFang Hospital,

<p>Dose response curve of compound on melanoma cell lines.  Compound was dissolved in DMSO, added in a 5-fold dilution series, starting with 10 μM, and incubated for 72 hours.  Fluorescence was measured after 8 hours incubation in resazurin.  Data was normalized to DMSO (maximal viability) and Doxorubicin (minimum viability).</p>

, , One customer

<p>After starved in serum-free medium for 24 h, A549 cells incubated with the indicated concentrations of GSK2126458 for 3 h,followed by 20-minute stimolation of 100ng/ml EGF.</p>

, , Dr. Zhang of Tianjin Medical University

A, Effects of AUY922 and GSK458 alone on pathways downstream of KRAS. Western blotting of EGFR, pEGFR, pMEK, MEK, pAKT, AKT, pERK, ERK, HSP70, cleaved (c)PARP, and pRSK levels in two PI3K inhibitor-resistant NSCLC cell lines following treatment with each drug. β-Actin was included as a loading control.

Gegevens van [ , , Cancer Lett, 2017, 406:47-53 ]

Sellecks Omipalisib (GSK2126458) Is geciteerd door 61 Publicaties

Depleting the action of EZH2 through PI3K-mTOR inhibition to overcome metastasis and immunotherapy resistance in triple-negative breast cancer [ Mol Cancer Ther, 2025, 10.1158/1535-7163.MCT-24-0693] PubMed: 40497697
Changes in Melanoma Cell Morphology Following Inhibition of Cell Invasion by Third-Generation mTOR Kinase Inhibitors [ Int J Mol Sci, 2025, 26(16)7770] PubMed: 40869090
Combined Omipalisib and MAPK Inhibition Suppress PDAC Growth [ Cancers (Basel), 2025, 17(7)1152] PubMed: 40227649
Trametinib sensitizes KRAS-mutant lung adenocarcinoma tumors to PD-1/PD-L1 axis blockade via Id1 downregulation [ Mol Cancer, 2024, 23(1):78] PubMed: 38643157
NKX2-5 regulates vessel remodeling in scleroderma-associated pulmonary arterial hypertension [ JCI Insight, 2024, 9(10)e164191] PubMed: 38652537
Characterizing heterogeneous single-cell dose responses computationally and experimentally using threshold inhibition surfaces and dose-titration assays [ NPJ Syst Biol Appl, 2024, 10(1):42] PubMed: 38637530
Analysis of hsa_circ_0136256 as a biomarker for fibrosis in systemic sclerosis [ BMC Biotechnol, 2024, 24(1):91] PubMed: 39538329
"Proteotranscriptomic analysis of advanced colorectal cancer patient derived organoids for drug sensitivity prediction" [ J Exp Clin Cancer Res, 2023, 42(1):8] PubMed: 36604765
PI3K/mTOR inhibitors promote G6PD autophagic degradation and exacerbate oxidative stress damage to radiosensitize small cell lung cancer [ Cell Death Dis, 2023, 14(10):652] PubMed: 37802999
Integrin-mediated electric axon guidance underlying optic nerve formation in the embryonic chick retina [ Commun Biol, 2023, 6(1):680] PubMed: 37391492

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.