GSK126

CatalogusnummerS7061 Batch:S706108

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C31H38N6O2
Moleculair gewicht 526.67 CAS-nr. 1346574-57-9
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 10 mg/mL (18.98 mM)
Ethanol 10 mg/mL (18.98 mM)
Water Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving GSK126 (GSK2816126A, GSK2816126) is een krachtige, zeer selectieve EZH2 methyltransferase remmer met een IC50 van 9,9 nM, >1000-voudig selectief voor EZH2 boven 20 andere menselijke methyltransferasen.
Doelen
EZH2
(Cell-free assay)
9.9 nM
In vitro In vitro remt GSK126 het meest potent H3K27me3, gevolgd door H3K27me2 in zowel EZH2 wild-type als mutante DLBCL-cellijnen. Deze verbinding remt ook effectief de proliferatie van EZH2-mutante DLBCL-cellijnen, en induceert transcriptionele activering van EZH2-doelgenen in gevoelige cellijnen. In A687V EZH2-mutante cellen resulteert deze behandeling in een globale afname van H3K27me3, robuuste genactivatie, caspase-activering en verminderde proliferatie. In parenterale H2087-cellen remt het de expressie van VEGF-A en gefosforyleerde Ser(473)-AKT, en veroorzaakt zo de remming van celproliferatie, migratie en metastase.
In vivo Bij muizen met KARPAS-422 en Pfeiffer xenografts, vermindert GSK126 (150 mg/kg/d, i.p.) de globale H3K27me3, verhoogt de genexpressie en veroorzaakt zo een duidelijke tumorregressie.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • EZH2-analyse

    Het vijfdelige PRC2-complex (Flag–EZH2, EED, SUZ12, AEBP2, RbAp48) dat wild-type of mutant EZH2 bevat, wordt bereid. GSK126 wordt opgelost in DMSO en getest bij concentraties van 0,6 nM tot 300 nM met een uiteindelijke DMSO-concentratie van 2,5%. In tegenstelling tot wild-type EZH2, dat in vitro H3K27me0 als substraat prefereert, prefereren EZH2 Y641-mutanten H3K27me2 en hebben ze weinig activiteit met H3K27me0 of H3K27me1. De A677G-mutant onderscheidt zich van zowel de wild-type als de Y641-mutante vormen van EZH2 doordat het H3K27me0, H3K27me1 en H3K27me2 efficiënt methylatieert; daarom worden histone H3-peptiden (residuen 21–44; 10 μM finaal) met K27me0 (wild type, A677G EZH2), K27me1 (A677G EZH2) of K27me2 (A677G, Y641N, Y641C, Y641H, Y641S en Y641F EZH2) gebruikt als methyltransferase-substraten. Deze verbinding wordt aan platen toegevoegd, gevolgd door toevoeging van 6 nM EZH2-complex en peptide. Aangezien de potentie van deze chemische stof op of nabij de strakke bindingsgrens ligt van een assay die wordt uitgevoerd bij [SAM] = Km, worden IC50-waarden gemeten bij een hoge concentratie van het competitieve substraat SAM ten opzichte van zijn Km (7,5 μM SAM waarbij de SAM Km 0,3 μM is). Onder deze omstandigheden wordt de bijdrage van de enzymconcentratie relatief klein en kunnen nauwkeurige schattingen van Ki worden berekend. Reacties worden geïnitieerd met [3H]-SAM, geïncubeerd gedurende 30 min, afgevlakt met de toevoeging van 500-voudig overschot ongelabelde SAM, en het gemethyleerde productpeptide wordt opgevangen op fosfocellulosefilters volgens het door de leverancier geleverde protocol voor MSPH Multiscreen-platen. Platen worden afgelezen op een TopCount na toevoeging van 20 μL Microscint-20 cocktail. Apparente Ki-waarden worden berekend met behulp van de Cheng–Prusoff-relatie voor een competitieve remmer. IC50=Ki (1+[S]/Km)+[E]/2, waarbij E het enzym en S het substraat is.
Celassay:

[1]
  • Cellijnen

    46 lymphoma cell lines

  • Concentraties

    0~10 μM

  • Incubatietijd

    6 days

  • Methode

    The optimal cell seeding is determined empirically for all cell lines by examining the growth of a wide range of seeding densities in a 384-well format to identify conditions that permitted proliferation for 6 days. Cells are then plated at the optimal seeding density 24 h before treatment (in duplicate) with a 20-point two fold dilution series of GSK126 or 0.15% DMSO. Plates are incubated for 6 days at 37°C in 5% CO2. Cells are then lysed with CellTiter-Glo (CTG) and chemiluminescent signal is detected with a TECAN Safire2 microplate reader. In addition, an untreated plate of cells is harvested at the time of compound addition (T0) to quantify the starting number of cells. CTG values obtained after the 6 day treatment are expressed as a percent of the T0 value and plotted against this compound concentration. Data are fit with a four-parameter equation to generate a concentration response curve and the concentration of this chemical required to inhibit 50% of growth (growth IC50) is determined.
Dierstudie:

[1]
  • Dierlijke modellen

    Female beige SCID mice bearing Pfeiffer or KARPAS-422 tumors

  • Doseringen

    150 mg/kg/day

  • Toediening

    i.p.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23051747/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25253781/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25477340/

Klantproductvalidatie

<p>(C) Four GCBDLBCL cells lines [1 wild-type (wt), 3 mutated (mut) EZH2] were treated with 500 nmol/l BAY 1238097 or with an EZH2 inhibitor (DZNep and GSK126, both used at the concentration of 500 nmol/l) as single agents and in combination for 72 h. The arrow indicates the EZH2 correct band. Dimethyl sulphoxide (DMSO) alone was added as negative control cells. Membranes were hybridized with antibodies against EZH2, H3K27me3, histone H3 and GAPDH.</p>

, , Br J Haematol, 2017, 178(6):936-948

HeLa cells were transfected with NS (nonspecific) or EZH2-specific siRNA for 48 h with protease inhibitors (10 μM E64 and 10 μM pepstatin-A). Cells were stained with LC3B antibody (green) and DAPI, and observed under confocal microscopy for LC3B puncta. Scale bars: 10 μm

Gegevens van [ , , Autophagy, 2015, 11(12):2309-22. ]

Concentration-dependent cytotoxic effect of candidate therapeutics. a. KMBC (blue circles) and HuCCT1 (purple squares) cells and b: haploid BAP1 knockout (HAP1 BAP1 KO) (green circles) or parental haploid HAP1 cells (WT) (orange squares) were plated in 384-well plates (1,000 cells/well), and incubated with varying concentrations of the indicated drug. Cell viability was assessed after 72 h using Cell Titer GloR 2.0 assay. Data represents the average percent cell viability plotted against concentration of drug in nM from 4 replicates for each condition. The table indicates the inhibitory concentration at 50% effect (IC50) values for each drug for each of the cell lines

Gegevens van [ , , Mol Cancer, 2017, 16(1):22 ]

immunostaining (D) show reduced levels of H3K27me3 with increasing levels of GSK126.

Gegevens van [ , , Mol Cancer Res, 2018, 16(3):417-427 ]

Sellecks GSK126 Is geciteerd door 181 Publicaties

FAK signaling suppression by OCT4-ITGA6 mediates the effectively removal of residual pluripotent stem cells and enhances application safety [ Theranostics, 2025, 15(14):7127-7153] PubMed: 40585989
Crosstalk between chromatin state and ATM signalling in DNA damage-induced transcription stress [ EMBO J, 2025, 10.1038/s44318-025-00537-7] PubMed: 40859031
Differential regulation of FADS2 by EZH2 reveals a metabolic vulnerability in ovarian cancer treatment [ EBioMedicine, 2025, 119:105879] PubMed: 40818202
Chromatin modification abnormalities by CHD7 and KMT2C loss promote medulloblastoma progression [ Cell Rep, 2025, 44(5):115673] PubMed: 40393452
EZH2 inhibition sensitizes MYC-high medulloblastoma cancers to PARP inhibition by regulating NUPR1-mediated DNA repair [ Oncogene, 2025, 44(6):391-405] PubMed: 39562655
Epigenetic reprogramming via EZH2 inhibition rescues fibroadipose pathogenesis in secondary lymphedema through activating PPARγ signaling [ J Orthop Translat, 2025, 55:309-322] PubMed: 41079990
BRAFV600E maintains the CpG island methylator phenotype, and DNA methylation of PRC2 targets genes in colon cancer [ iScience, 2025, 28(7):112905] PubMed: 40678543
Inhibiting EZH2 complements steroid effects in Duchenne muscular dystrophy [ Sci Adv, 2025, 11(11):eadr4443] PubMed: 40085707
Suppressed macrophage response to quorum-sensing-active Streptococcus pyogenes occurs at the level of the nucleus [ bioRxiv, 2025, 2025.02.07.637189] PubMed: 39975246
Protocol for differentiating cardiomyocytes and generating engineered heart tissues from human feeder-free extended pluripotent stem cells [ STAR Protoc, 2025, 6(1):103576] PubMed: 39893639

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.