GSK1070916

CatalogusnummerS2740 Batch:S274002

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C30H33N7O
Moleculair gewicht 507.63 CAS-nr. 942918-07-2
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 102 mg/mL (200.93 mM)
Ethanol 102 mg/mL (200.93 mM)
Water Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving GSK1070916 is een omkeerbare en ATP-competitieve remmer van Aurora B/C met IC50 van 3,5 nM/6,5 nM. Het vertoont een >100-voudige selectiviteit tegen het nauw verwante Aurora A-TPX2-complex. Fase 1.
Doelen
Aurora B-INCENP
(Cell-free assay)		 Aurora C-INCENP
(Cell-free assay)		 FLT1
(Cell-free assay)		 Tie-2
(Cell-free assay)		 SIK
(Cell-free assay)		 Meer bekijken
3.5 nM 6.5 nM 42 nM 59 nM 70 nM
In vitro GSK1070916 remt selectief Aurora B en Aurora C met Ki van 0,38 nM en 1,5 nM ten opzichte van Aurora A met Ki van 490 nM. De remming van Aurora B en Aurora C door deze verbinding is tijdsafhankelijk, met een dissociatiehalfwaardetijd van enzym-remmer van respectievelijk >480 min en 270 min. Bovendien is het ook een competitieve remmer ten opzichte van ATP. Menselijke tumorcellen behandeld met deze remmer vertonen dosisafhankelijke remming van fosforylering op serine 10 van Histon H3, een substraat specifiek voor Aurora B. Bovendien remt het de proliferatie van tumorcellen met EC50-waarden van <10 nM in meer dan 100 cellijnen die een breed scala aan tumortypen bestrijken, met een mediane EC50 van 8 nM. Hoewel deze verbinding een potente activiteit heeft tegen prolifererende cellen, wordt een dramatische verschuiving in potentie waargenomen in primaire, niet-delende, normale humane aderendotheelcellen. Verder arresteren cellen behandeld met dit middel niet in mitose, maar falen ze in plaats daarvan om te delen en worden polyploïde, wat uiteindelijk leidt tot apoptose. In een andere studie wordt ook gerapporteerd dat een hoog chromosoomgetal geassocieerd met resistentie tegen de remming van Aurora B en C suggereert dat cellen met een mechanisme om de checkpoint voor hoge ploïdie te omzeilen resistent zijn tegen deze chemische stof.
In vivo GSK1070916 (25, 50 of 100 mg/kg) toont dosisafhankelijke remming van de fosforylering van een Aurora B-specifiek substraat bij muizen en, consistent met zijn brede cellulaire activiteit, heeft deze verbinding antitumorale effecten in 10 humane tumor-xenograftmodellen, waaronder modellen voor borst-, darm-, longkanker en twee leukemiemodellen.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[1]
  • Kinase Assay

    Het vermogen van GSK1070916 om de Aurora-enzymen te remmen, wordt gemeten met behulp van in vivo kinase assays. De assays meten het vermogen van Aurora A, Aurora B en Aurora C om een synthetisch peptidesubstraat te fosforyleren. Biotin-Ahx-RARRRLSFFFFAKKK-NH2 wordt gebruikt voor de Aurora A–TPX2 LEADseekerTM assay en 5FAM-PKAtide wordt gebruikt voor de IMAPTM assay voor alle drie Aurora kinases. Om rekening te houden met tijdsafhankelijke remming van Aurora-enzymen, worden Aurora A–TPX2, Aurora B–INCENP en Aurora C–INCENP geïncubeerd met deze verbinding in verschillende concentraties gedurende 30 min voordat de reacties worden geïnitieerd met de toevoeging van substraten. Voor de Aurora A LEADseekerTM assay zijn de uiteindelijke assaycondities 0,5 nM Aurora A–TPX2, 1 μM peptidesubstraat, 6 mM MgCl2, 1,5 μM ATP, 0,003 μCi/μL [γ-33P] ATP in 50 mM Hepes, pH 7,2, 0,15 mg/mL BSA, 0,01% Tween-20, 5 mM DTT en 25 mM KCl. De reacties worden geïncubeerd bij kamertemperatuur (25 °C) gedurende 120 min en beëindigd door de toevoeging van LEADseekerTM-parels in PBS met EDTA (uiteindelijke concentratie 2 mg/mL parels en 25 mM EDTA). De platen worden vervolgens verzegeld en de parels mogen 's nachts bezinken. Productvorming wordt gekwantificeerd met behulp van een Viewlux Imager. Voor de IMAPTM assays worden Aurora A–TPX2 (uiteindelijke concentratie 1 nM), Aurora B–INCENP (uiteindelijke concentratie 2 nM) of Aurora C–INCENP (uiteindelijke concentratie 2,5 nM) toegevoegd aan de verbinding-bevattende platen in 5 μL buffer (25 mM Hepes, pH 7,2, voor Aurora A, 25 mM Hepes, pH 7,5, voor Aurora B en 20 mM Hepes, pH 7,2, voor Aurora C) met 0,15 mg/mL BSA, 0,01% Tween 20 en 25 mM NaCl. Dit mengsel wordt bij kamertemperatuur geïncubeerd gedurende 30 min. Om de reactie te starten, wordt 5 μL van een substraatoplossing toegevoegd die dezelfde Hepes-buffer bevat als gebruikt voor de pre-incubatie, 25 mM NaCl, MgCl2 (respectievelijk 2, 4 en 4 mM voor Aurora A, B en C), DTT (respectievelijk 4, 4 en 2 mM voor Aurora A, B en C), ATP (respectievelijk 4, 4 en 10 μM voor Aurora A, B en C), 200 nM 5FAM-PKAtide, 0,01% Tween 20 en 0,15 mg/mL BSA. De reacties worden bij kamertemperatuur geïncubeerd gedurende 120 min voor Aurora A en B en 60 min voor Aurora C. Deze reacties worden vervolgens beëindigd door de toevoeging van 10 μL van 1:500 (1:600 voor Aurora C) Progressive Binding Reagent in 95% Progressive Binding Buffer A en 5% Progressive Binding Buffer B. Platen worden bij kamertemperatuur geïncubeerd gedurende ca. 90-120 min (tijd die nodig is om evenwicht te bereiken). Platen worden afgelezen in een Molecular Devices Analyst platenlezer in fluorescentiepolarisatiemodus.
Celassay:[2]
  • Cellijnen

    SW48, Colo 201, SW480, WiDr, Colo205, RKO E6, RKO, LoVo, HCT-116, SW620, HT29, W1417, DLD-1, HCT-8, Colo 320HSR, Hep-3B, OVCAR-3, MEC-1 cells

  • Concentraties

    0-15 mM

  • Incubatietijd

    6-7 days

  • Methode

    Cells are plated in 96-well plates in the recommended growth media and incubated at 37 °C in 5% CO2 overnight. The following day, the cells are treated with serial dilutions of GSK1070916. At this time, one set of cells is treated with CellTiter-Glo for a time equal to 0 (T = 0) measurement. Following a 6- to 7-d incubation with this compound, cell proliferation is measured using the CellTiter-Glo reagent according to the manufacture's recommended protocol. As inhibition of Aurora B induces endomitosis, the degree of which differs depending on the cell type, an extended compound treatment time is required to accurately reflect the effects on cell viability across a large panel of cell lines. For analysis of cell viability, values from wells with no cells are subtracted for background correction and the data plotted as a percent of the DMSO-treated control samples using Microsoft Excel XLfit4 software. The EC50 values represent the concentration of this compound where 50% maximal effect is observed
Dierstudie:[2]
  • Dierlijke modellen

    Mice tumor xenograft models (A549, SW620, HCT116, H460, MCF-7, HL60, K562, Colo205)

  • Doseringen

    25, 50, or 100 mg/kg

  • Toediening

    Administered via i.p. once daily

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19284385/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19567821/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21762492/

Klantproductvalidatie

, , Antonino Maria Spart from University of Bologn

, , Antonino Maria Spart from University of Bologn

, , Antonino Maria Spart from University of Bologn

(C) T-ALL cell lines were treated with BI6727, GSK1070916, and MK-5108 at their respective IC50s for 48 h, then they were collected, lysed, and analyzed by western blot. Molecular weights are indicated on the left. CTRL, untreated cells.

Gegevens van [ , , Cell Cycle, 2014, 13(14):2237-47 ]

Sellecks GSK1070916 Is geciteerd door 12 Publicaties

Identification of chemical inhibitors targeting long noncoding RNA through gene signature-based high throughput screening [ Int J Biol Macromol, 2025, 292:139119] PubMed: 39722392
Integrated drug response prediction models pinpoint repurposed drugs with effectiveness against rhabdomyosarcoma [ PLoS One, 2024, 19(1):e0295629] PubMed: 38277404
DELs enable the development of BRET probes for target engagement studies in cells [ Cell Chem Biol, 2023, 30(8):987-998.e24] PubMed: 37490918
Targeting Aurora B kinase prevents and overcomes resistance to EGFR inhibitors in lung cancer by enhancing BIM- and PUMA-mediated apoptosis [ Cancer Cell, 2021, S1535-6108(21)00383-4] PubMed: 34388376
Loss of Aurora kinase signaling allows lung cancer cells to adopt endoreplication and form polyploid giant cancer cells that resist antimitotic drugs [ Cancer Res, 2020, canres.1693.2020] PubMed: 33172929
Tie2-FGFR1 Interaction Induces Adaptive PI3K Inhibitor Resistance by Upregulating Aurora A/PLK1/CDK1 Signaling in Glioblastoma. [ Cancer Res, 2019, 79(19):5088-5101] PubMed: 31416846
Network pharmacology modeling identifies synergistic Aurora B and ZAK interaction in triple-negative breast cancer [ NPJ Syst Biol Appl, 2019, 5:20] PubMed: 31312514
High-Throughput Screening Identifies Kinase Inhibitors That Increase Dual Adeno-Associated Viral Vector Transduction In Vitro and in Mouse Retina. [ Hum Gene Ther, 2018, 29(8):886-901] PubMed: 29641320
A small-molecule inhibitor targeting the AURKC-IκBα interaction decreases transformed growth of MDA-MB-231 breast cancer cells [ Oncotarget, 2017, 8(41):69691-69708] PubMed: 29050234
Leishmania donovani Aurora kinase: A promising therapeutic target against visceral leishmaniasis. [Chhajer R, et al. Biochim Biophys Acta, 2016, 1860(9):1973-88] PubMed: 27288586

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.