Flavopiridol (Alvocidib) HCl

CatalogusnummerS2679 Batch:S267904

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C21H20ClNO5.HCl
Moleculair gewicht 438.3 CAS-nr. 131740-09-5
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 88 mg/mL (200.77 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Flavopiridol (Alvocidib) HCl concurreert met ATP om CDK's te remmen, waaronder CDK1, CDK2, CDK4 en CDK6 met een IC50 van ~ 40 nM in celvrije assays. Het is 7,5-voudig selectiever voor CDK1/2/4/6 dan voor CDK7. Flavopiridol blijkt aanvankelijk EGFR en PKA te remmen. Flavopiridol HCl induceert Autophagy en ER-stress. Flavopiridol HCl blokkeert de HIV-1-replicatie. Fase 1/2.
Doelen
CDK1
(Cell-free assay)		 CDK2
(Cell-free assay)		 CDK4
(Cell-free assay)		 CDK6
(Cell-free assay)		 CDK7
(Cell-free assay)
40 nM 40 nM 40 nM 40 nM 300 nM
In vitro Flavopiridol blijkt aanvankelijk de epidermale groeifactorreceptor en proteïnekinase A te remmen (IC50 = 21 en 122 μM). Later blijkt Flavopiridol de Cell Cycle-proliferatie te remmen, bij fysiologisch relevantere concentraties (IC50 = 66 nM) wanneer Flavopiridol wordt getest in het panel van 60 menselijke tumor Cell Cycle-lijnen van het National Cancer Institute Development Therapeutics Program. Flavopiridol induceert G1-arrest met remming van CDK2 en CDK4 in menselijke borstcarcinoom Cell Cycle op een tijd- en concentratieafhankelijke manier. Kortdurende behandeling met Flavopiridol (ongeveer 12 uur) induceert apoptose in hematopoëtische Cell Cycle-lijnen, waaronder SUDHL4, SUDHL6 (B-Cell Cycle-lijnen), Jurkat en MOLT4 (T-Cell Cycle-lijnen), en HL60 (myeloïd). In de clonogene assay functioneert Flavopiridol als een zeer krachtig cytotoxisch middel met een gemiddelde IC70 van 8 ng/mL in 23 menselijke tumormodellen. Een recente studie toont aan dat Flavopiridol-behandeling een aanzienlijke AKT-Ser473-fosforylatie induceert in de menselijke glioblastoom T98G Cell Cycle-lijn.
In vivo Bij de maximaal getolereerde dosis van 10 mg/kg/dag oraal toegediend op dag 1-4 en 7-11, bewerkstelligt Flavopiridol tumorregressie bij PRXF1337 en tumorstase gedurende 4 weken bij PRXF1369. Na behandeling met 7,5 mg/kg Flavopiridol bolus intraveneus (IV) of intraperitoneaal gedurende elk van 5 opeenvolgende dagen, ondergaan 11 van de 12 geavanceerde subcutane (s.c.) menselijke HL-60 xenograften complete regressie, en de dieren blijven ziektevrij enkele maanden na één kuur met Flavopiridol-behandeling. SUDHL-4 s.c. lymfomen behandeld met flavopiridol met 7,5 mg/kg bolus IV gedurende 5 dagen ondergaan ofwel een majeure (twee van de acht muizen) of complete (vier van de acht muizen) regressie, waarbij twee dieren meer dan 60 dagen ziektevrij blijven. De algehele groeivertraging is 73,2%. Dagelijkse IV- of IP-toediening van flavopiridol resulteert in piekplasmaspiegels van ongeveer 7 µM, gevolgd door een geleidelijke daling tot ongeveer 100 nM binnen 8 uur.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[1]
  • Recombinant CDKs Kinase Reacties

    CDKs-activiteiten worden als volgt in microtiterplaten bepaald. Veertig μg Gst-Rb worden gemengd met verschillende hoeveelheden Flavopiridol en ongelabeld ATP. Reacties worden vervolgens gestart door toevoeging van een ammoniumsulfaatfractie van de S100-fractie verkregen uit insecten Cell Cycle die recombinante menselijke CDKs tot expressie brengen. De uiteindelijke reactiecondities zijn 10 mM MgCl2, 50 mM Tris-HCl (pH 7,5) en 1 mM DTT. De uiteindelijke ATP-concentratie wordt dienovereenkomstig aangepast. Gemarkeerd ATP wordt gebruikt als fosforyldonor. De reactie wordt gedurende 2,5 minuten bij 30 °C uitgevoerd na toevoeging van enzym en vervolgens beëindigd met de toevoeging van EDTA. Het Gst-Rb wordt vervolgens afgevangen met glutathion-Sepharose en de geïncorporeerde radioactiviteit wordt bepaald door vloeistofscintillatietelling.
Celassay:[2]
  • Cellijnen

    SUDHL4, SUDHL6, Jurkat, MOLT4, and HL60

  • Concentraties

    0, 100 500, 5000 nM

  • Incubatietijd

    14 hours

  • Methode

    Cells grown at a density of 1 × 106 cells/mL are exposed to Flavopiridol for different concentrations and time periods. DNA is extracted. Briefly, cells are washed once with cold phosphate-buffered saline (PBS) and lysed with 3 mL lysis buffer (5 mM Tris-HCL [pH 7.5]; 20 mM EDTA; 0.5% Triton X-100) for 15 minutes at 4 °C. The chromatin of the cell lysates is isolated by centrifugation (20 minutes at 26,000g, 4 °C). The supernatants containing small DNA fragments are extracted sequentially with phenol, phenol:chloroform (1:1), and chloroform. Nucleic acids are precipitated in 0.5 M NaCl, 90% ethanol at -20 °C overnight. RNA is then digested by bovine RNAaseA (60 μg/mL). After sequential reextraction and reprecipitation, DNA is dissolved in 10 mM Tris-HCL (pH 7.5), 1 mM EDTA, 0.5% sodium dodecyl sulfate (SDS) before electrophoresis on 1.6% agarose gel.

Dierstudie:[4] [6]
  • Dierlijke modellen

    Human prostate cancer xenografts, PRXFI337 and PRXFI369, grown s.c. in nude mice [4] Human promyelocytic leukemia HL-60, human B-cell follicular lymphoma SUDHL-4, and acquired immunodeficiency syndrome (AIDS)-r

  • Doseringen

    10 mg/kg/d [4]; 7.5 mg/kg/d [6]

  • Toediening

    p.o.[4]; i.p. or i.v. [6]

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12165651/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8674031/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9427698/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9815683/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22391209/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9516149/

Klantproductvalidatie

<p>Comparative efficacy of anticancer therapies (Flavopiridol, vincristine, daunorubicin, et al.) in NMC vs non-NMC cell lines. Mean IC50 (± s.e.m.) of the indicated agents in three NMC (PER-403, PER-624, and PER-704) and two non-NMC cell lines (PER-535 and SAOS2), ***P<0.001, unpaired t-test, corrected for multiple testing.</p>

Gegevens van [ Br J Cancer , 2014 , 110(5), 1189-98 ]

RPMI-8226 cells were treated with the indicated CDK inhibitors for 8 hours. Western blots are shown. The following drug concentrations were used: SLM6 at 250 nM, flavopiridol at 250 nM, roscovitine at 5 uM, purvalanol A at 10 uM, and alsterpaullone at 5 uM.

Gegevens van [ Mol Cancer Ther , 2012 , 11(11), 2321-2330 ]

<p>(C) In vivo treatment of Tg:Pomc-Pttg;Pomc-eGFP embryos with small-molecule CDK inhibitors (50μM) or 0.2% DMSO as control from 18 to 40 hpf. One hundred to one hundred fifty embryos were treated with each compound. Representative images of live embryos are shown with gross morphology (Right) and pituitary Pomc-GFP–positive cells at higher magnification (Left) at 40 hpf. Embryos exposed to flavopiridol developed early developmental defect before pituitary POMC cell ontogeny occurs. (D) Relative expression of pituitary Pomc-eGFP fluorescence analyzed using Volocity 5.2 software (Improvision; mean ± SE of relative expression, n = 7). (E) R-roscovitine specifically suppresses expansion of pituitary POMC cells overexpressing zPttg from 18 to 48 hpf. Double transgenic Tg:Pomc-Pttg;Prl-RFP embryos were generated by breeding Tg:Pomc-Pttg fish with a previously generated PRL-RFP transgenic line, in which RFP was targeted to pituitary lactotrophs by a zebrafish Prolactin promoter (34). Representative fluorescent microscopy of pituitary POMC-eGFP (a and b) and PRL-RFP (c and d) expression in live Tg:Pomc-Pttg; Pomc-eGFP and Tg:Pomc-Pttg;Prl-RFP embryos treated with 0.2% DMSO (a and c) or 50 μM R-roscovitine (b and d). (F) Relative expression of pituitary POMC-eGFP or PRL-RFP fluorescence were analyzed (mean ± SE of relative expression; n = 10). Results represent one of three similar experiments;*P < 0.02 and **P < 0.000005. (Scale bar, 50 μm.)</p><div><div> </div></div><p> </p>

Gegevens van [ PNAS , 2011 , 108, 8417 ]

Sellecks Flavopiridol (Alvocidib) HCl Is geciteerd door 61 Publicaties

Monoallelically expressed noncoding RNAs form nucleolar territories on NOR-containing chromosomes and regulate rRNA expression [ Elife, 2024, 13e80684] PubMed: 38240312
From co-delivery to synergistic anti-inflammatory effect: Studies on chitosan-stabilized Janus emulsions having chloroquine phosphate and flavopiridol in Complete Freund's Adjuvant induced arthritis rat model [ Int J Biol Macromol, 2023, 258(Pt 1):128776] PubMed: 38114014
Claspin is Required for Growth Recovery from Serum Starvation through Regulating the PI3K-PDK1-mTOR Pathway in Mammalian Cells [ Mol Cell Biol, 2023, 43(1):1-21] PubMed: 36720467
Lamin A/C phosphorylation at serine 22 is a conserved heat shock response to regulate nuclear adaptation during stress [ J Cell Sci, 2023, 136(4)jcs259788] PubMed: 36695453
Brd4-dependent CDK9 expression induction upon sustained pharmacological inhibition of P-TEFb kinase activity [ Biochem Biophys Res Commun, 2023, 671:75-79] PubMed: 37295357
The super elongation complex drives transcriptional addiction in MYCN-amplified neuroblastoma [ Sci Adv, 2023, 9(13):eadf0005] PubMed: 36989355
Single-cell T cell receptor sequencing of paired human atherosclerotic plaques and blood reveals autoimmune-like features of expanded effector T cells [ Nat Cardiovasc Res, 2023, 2(2):112-125] PubMed: 38665903
Nuclear oligo hashing improves differential analysis of single-cell RNA-seq [ Nat Commun, 2022, 13(1):2666] PubMed: 35562344
p300/CBP sustains Polycomb silencing by non-enzymatic functions [ Mol Cell, 2022, 82(19):3580-3597.e9] PubMed: 36206738
Discovery of a large-scale, cell-state-responsive allosteric switch in the 7SK RNA using DANCE-MaP [ Mol Cell, 2022, S1097-2765(22)00114-9] PubMed: 35320755

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.