In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar. * Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties. * Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)
Voorbereiden van stamoplossingen
Biologische activiteit
Beschrijving
DEL-22379 is een wateroplosbare ERK-dimerisatieremmer met een IC50 van circa 0,5 μM.
Doelen
ERK (in HEK293 cells)
0.5 μM
In vitro
DEL-22379 remt de ERK-dimerisatie zonder de fosforylering ervan te beïnvloeden. In een panel van menselijke cellijnen met mutante BRAF (V600E) of RAS (Q61L of G12V), vertoont deze verbinding krachtige anti-proliferatieve effecten en induceert het apoptose.
In vivo
DEL-22379 (15 mg/kg, i.p.) voorkomt tumorgroei en metastase bij muizen met A375 (BRAF-mutant) en HCT116 (KRAS-mutant) tumoren, maar dit middel voorkomt de vorming van tumoren niet bij muizen die zijn geïnjecteerd met CHL-cellen (WT/WT).
Verbindingsscreening wordt uitgevoerd in HEK293T-cellen die gedurende 30 min vóór EGF-stimulatie zijn behandeld met de potentiële remmers (10 μM). Cellulaire lysaten worden getest op ERK-dimerisatie door middel van natieve PAGE en p-ERK-evaluatie van de potentiële positieven. In vitro ERK-dimerisatie wordt getest met behulp van GST-MEK1 ΔN EE gezuiverd uit bacteriën, gebonden aan glutathion-sepharose-parels en geïncubeerd met 25 μg/ml gezuiverd His-ERK2 plus toenemende concentraties van deze verbinding. Ook worden Western blotting, kinase-assays en luciferase-assays uitgevoerd. In silico docking van deze verbinding wordt uitgevoerd met de modelleringstools van het OpenEye-pakket (v. 2.1).
A panel of human cell lines harboring mutant BRAF (V600E) or RAS (Q61L or G12V)
Concentraties
~10 μM
Incubatietijd
48 h
Methode
Cellular proliferation is analyzed by Alamar blue assays. Briefly, Cells are plated in 96-well plates at a density of 1000-2000 cells per well. Cells are treated with drug concentrations prepared by serial dilution ranging from 0.1 nM to 10 μM. 48 hr after drug treatment cells are exposed to Alamar Blue and the colorimetric change is measured at 570 and 600 nm. GI50 is estimated by nonlinear regression using GraphPad5 Prism Software.
ERK phosphorylation disrupts the intramolecular interaction of capicua to promote cytoplasmic translocation of capicua and tumor growth
[ Front Mol Biosci, 2022, 9:1030725]
RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.
VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.
NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.
