In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar. * Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties. * Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)
Voorbereiden van stamoplossingen
Biologische activiteit
Beschrijving
Decernotinib (VX-509) is een potente en selectieve JAK3-remmer met een Ki van 2,5 nM, wat een >4-voudige selectiviteit aantoont ten opzichte van respectievelijk JAK1, JAK2 en TYK2. Het bevindt zich momenteel in fase 2/3.
Doelen
JAK3
JAK1
JAK1
JAK2
TYK2
2.5 nM(Ki)
11 nM
11 nM(Ki)
13 nM(Ki)
13 nM(Ki)
In vitro
In HT-2-cellen remt Decernotinib (VX-509) IL-2-gestimuleerde HT-2 STAT-5-fosforylatie, humane T-celblastproliferatie en CD40L/IL-4-geïnduceerde B-celproliferatie.
In vivo
In een ratmodel van collageen-geïnduceerde artritis resulteert S7541 (50 mg/kg, p.o.) in een dosisafhankelijke vermindering van enkelzwelling en pootgewicht en verbeterde histopathologiescores van de poot. In een muismodel van oxazolon-geïnduceerde vertraagde overgevoeligheid onderdrukt S7541 (50 mg/kg, p.o.) significant oor oedeem. In een rat HvG-model resulteert S7541 (50 mg/kg, p.o.) in dosisafhankelijke remming van popliteale lymfeklier (PLN) hyperplasie.
Het effect van Decernotinib (VX-509) op de JAK3-activiteit wordt beoordeeld door de residuele kinase-activiteit van het recombinant tot expressie gebrachte JAK3-kinasedomein te meten met behulp van een radiometrische assay. De uiteindelijke concentraties van de componenten in de assay zijn als volgt: 100 mM HEPES (pH 7,5), 10 mM MgCl2, 1 mM dithiothreitol (DTT), 0,01% BSA, 0,25 nM JAK3, 0,25 mg/ml polyE4Y en 5 μM 33P-γ-ATP (200 µCi/µmol). Een 10 mM stockoplossing van deze verbinding wordt bereid in DMSO, waaruit verdere verdunningen worden bereid. Een substraatmengsel (100 mM HEPES, 10 mM MgCl2, 0,5 mg/ml polyE4Y en 10 μM 33P-γ-ATP) wordt toegevoegd en ermee gemengd. De reactie wordt geïnitieerd door de toevoeging van een enzymmengsel [100 mM HEPES (pH 7,5), 10 mM MgCl2, 2 mM DTT, 0,02% BSA, 0,5 nM JAK3]. Na 15 minuten werd de reactie geblust met 20% trichloorazijnzuur (TCA). De gebluste reactie werd overgebracht naar de GF/B-filterplaten en driemaal gewassen met 5% TCA. Na toevoeging van Ultimate Gold scintillant (50 μl) werden de monsters geteld in een Packard TopCount gammacounter (PerkinElmer). Bij deze procedure is de opgevangen radioactiviteit een maat voor de residuele JAK3-kinase-activiteit. Uit de activiteit versus concentratie van VX-509-titratiecurve werd de Ki-waarde bepaald door de gegevens aan te passen aan een vergelijking voor competitieve strakke bindingskinetiek met behulp van Prism-software.
Frozen purified human B cells are thawed, washed, and resuspended in complete medium. Cells are plated onto a 96-well plate at a density of 2 × 105 cells/well. Decernotinib (VX-509) is added, and plates are incubated for 30 minutes at 37°C, followed by stimulation with a combination of 10 ng/ml IL-4 and 1 μg/ml CD40L. DMSO alone is added to the top two rows, one of which is stimulated with IL-4 or CD40L (negative control) and the other of which served as a proliferation control. The plates are incubated at 37°C for 6 days. On day 6, cells are pulsed with [3H]thymidine for 7 hours and harvested onto filters for radioactive determination using a PerkinElmer-Wallace beta counter (1205 Betaplate Beta Liquid Scintillation Counter). Data are analyzed with Softmax pro software to generate an IC50 value.
RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.
VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.
NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.
