Chaetocin

In SL-2 Drosophila-weefselkweekcellen veroorzaakt Chaetocin de remming van SU(VAR)3-9 en het aantal H3-moleculen dat gedimethylateerd is op Lys9, en remt het ook de celgroei. [1]

In HepG2, Hep3B en Huh7 humane hepatomacellen remt deze verbinding HIF-1-gemedieerde hypoxische responsen. [2]

Het remt ook krachtig de proliferatie en kolonieformatie in een breed scala aan kankercellijnen met IC50 van 2-10 nM. [3]

Bij Hepa 1c1c-7 tumor-dragende muizen remt Chaetocin (0,25 mg/kg, i.p.) de tumorgroei door deregulatie van HIF-1[alpha]-gemedieerde angiogenese. [2]

Bij SKOV3 tumor-dragende naaktmuizen vertraagt de behandeling met deze verbinding (0,25 mg/kg, i.p.) de tumorgroei significant met minimale aanwijzingen van toxiciteit. [3]

• Methylatieassays

  Tenzij anders vermeld, worden reacties als volgt uitgevoerd: 1 g gezuiverd enzym (dSU(VAR)3-9 213; GST-hSUV39H1(82-412); GST-ncDIM5(19-318) en GSTmG9a(621-1000); dPRSET7(1-691); His-SET7/9(109-366) of enzymcomplex uitgedrukt in een baculoviraal expressiesysteem (dE(z), dSU(Z)12, dp55, dESC)) werden 30 minuten geïncubeerd met 1 g van een peptide dat de eerste 19 aminozuren van H3 plus een extra cysteïneresidu (ARTKQTARKSTGGKAPRKQC) bevatte in een totaal volume van 40 μl in BC25 (10 mM HEPES pH 7,6, 25 mM NaCl, 1 mM EDTA, 10% glycerol). Alle enzymen, behalve het E(z)-complex, hadden een vergelijkbare specifieke activiteit tussen 5-10 nmole/min/mg. Voor het E(z)-complex is de specifieke activiteit ongeveer 5-10 keer lager, wat waarschijnlijk te wijten is aan een onvolledige vorming van het volledige complex dat nodig is voor de hoogste activiteit. Als methyldonor is S-Adenosyl[methyl-3H]methionine (SAM) aanwezig in de reactie in een eindconcentratie van 40 M met een specifieke activiteit van 0,3 Ci/mmole. Reacties worden gestopt door 1/10 volume van 100% azijnzuur toe te voegen en de incorporatie van radioactiviteit wordt gemeten door 30 μl van de reactie op P81-filterpapier te spotten en vervolgens scintellatietelling uit te voeren. Voor de inhibitorscreening wordt 1 μl van deze verbinding met een concentratie van 10 g/l aan elke reactie toegevoegd. In de gevallen waarin PRSET7 of het E(z)-complex als enzym wordt gebruikt, vervingen recombinant nucleosomen (1 g) of recombinant H3 (1 g) respectievelijk het H3-peptide als substraat.

• Cellijnen

  HEK293T

• Concentraties

  125 nM

• Incubatietijd

  24 h

• Methode

  Cells were treated with chaetocin (125 nM) or DMSO for 24 h.

• Dierlijke modellen

  Hur7 tumor-bearing mice, Hepa 1c1c-7 tumor-bearing mice

• Doseringen

  0.25 mg/kg

• Toediening

  i.p.