|
Hoe te citeren 1. Voor in-tekst citatie (materialen en methoden): 2. Voor de tabel met belangrijke bronnen: |
||
|
Gratis nummer: (877) 796-6397 -- Alleen VS en Canada -- |
Fax: +1-832-582-8590 Bestellingen: +1-832-582-8158 |
Technische ondersteuning: +1-832-582-8158 Ext:3 Vermeld uw bestelnummer in de e-mail. Wij streven ernaar alle e-mailvragen binnen één werkdag te beantwoorden. |
Biologische Beschrijving
| Specificiteit | CD163L1 Antibody [C10D1] detecteert endogene niveaus van totaal CD163L1-eiwit. |
|---|---|
| Achtergrond | CD163L1, ook bekend als CD163 molecule-like 1 of M160, is een type I membraaneiwit van de groep B scavenger receptor cysteine-rijke (SRCR) superfamilie die meerdere SRCR-domeinen (typisch 9-12), een enkel transmembraansegment en een cytoplasmatische staart bevat die endocytose medieert via een clathrine-afhankelijk pad onafhankelijk van ligand-cross-linking. Voortkomend uit een late evolutionaire duplicatie van het CD163-gen, wordt CD163L1 sterk tot expressie gebracht op specifieke weefselmacrofaagsubsets (vaak colocaliserend met CD163), maar is minimaal aanwezig of afwezig in monocyten, alveolaire macrofagen, glia en Kupffer-cellen; twee cytoplasmatische splicevarianten beïnvloeden verder de subcellulaire lokalisatie. CD163L1 dient als een endocytische scavenger receptor die waarschijnlijk nog ongeïdentificeerde liganden bindt om klaring te mediëren en de resolutie van ontsteking te bevorderen door middel van ontstekingsremmende signalering en het handhaven van weefselhomeostase, waardoor het zich onderscheidt van CD163, dat specifiek hemoglobine-haptoglobinecomplexen opruimt. CD163L1 vertoont geen affiniteit voor hemoglobine-haptoglobine of geteste bacteriën, en vormt geen bekende eiwitcomplexen. De gereguleerde expressie tijdens monocyt-naar-macrofaagdifferentiatie ondersteunt aangeboren immuunmodulatie, met ziekterelevantie bij ontstekingsaandoeningen zoals atherosclerose, mogelijk door oxidantklaring vergelijkbaar met CD163, en in auto-immuuncontexten door overmatige immuunresponsen te dempen. |
Gebruiksinformatie
| Toepassing | IHC | Verdunning |
|
||
|---|---|---|---|---|---|
| Reactiviteit | Human | ||||
| Bron | Rabbit Monoclonal Antibody | MW | |||
| Opslagbuffer | PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3 | Opslag (Vanaf de datum van ontvangst) |
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years | ||
| IHC |
Experimental Protocol：
Deparaffinization/Rehydration
1. Deparaffinize/hydrate sections:
2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each.
3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each.
4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each.
5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each.
6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min.
Staining
1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each.
2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min.
3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.
4. Wash sections in wash buffer for 5 min.
5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature.
6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C.
7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each.
8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature.
9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each.
10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use.
11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity.
12. Immerse slides in dH2O.
13. If desired, counterstain sections with hematoxylin.
14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.
15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each.
16. Mount sections with coverslips and mounting medium.
|
Referenties
|