Capsazepine

Capsazepine (CPZ) in een concentratie van 94,2 µg/ml (IC50-concentratie van deze verbinding) vertoont een statistisch significante remming van osteoclastengroei en -proliferatie[2]. Deze verbinding zet de NKA om in Na-ATPase. Het remt K+-afhankelijke activiteit, maar laat Na-ATPase geassocieerd met Na+-transport toe. CPZ heeft geen effect op Na-ATPase gemeten in afwezigheid van K+. Deze chemische stof remt ook para-nitrofenylfosfatase-activiteit, zij het met een lagere affiniteit. Het vermindert sterk het steady-state EP-niveau en de Na+-affiniteit voor fosforylering nam 3-voudig af na CPZ-behandeling. Samenvattend blokkeert deze verbinding een Na+/K+-cyclus in de NKA, maar laat een Na+-cyclus intact, waardoor de transportstoichiometrie van de pomp wordt verminderd[3]. Deze chemische stof remt osteoclastvorming en botresorptie op een dosisafhankelijke manier in beenmerg-osteoblast co-culturen en RANKL-gegenereerde osteoclastculturen. Het onderdrukt ook RANKL-geïnduceerde IκB- en ERK1/2-fosforylering en veroorzaakt apoptose van volwassen osteoclasten en remt ook alkalische fosfatase-activiteit en botnodulevorming in calvariële osteoblastculturen[4].

Voorbehandeling met Capsazepine voorkomt de toename van de weerstand van het ademhalingssysteem en vermindert de toename van weefseldemping tijdens endotoxemie. Deze verbinding vermindert ook longschade door een vermindering van het samengevallen gebied van het longparenchym, geïnduceerd door lipopolysaccharide (LPS).

• Cellijnen

  Murine macrophage cell line RAW 264.7

• Concentraties

  94.2 µg/ml

• Incubatietijd

  72 h

• Methode

  The cells are plated and treated with different concentrations of the test compounds and allowed to proliferate for 72 h. After 72 h of proliferation the cells are fixed in 10% formalin saline (50 μl/well) for 30 min. Then the cells are stained with crystal violet (0.05% w/v) for 30 min. The wells are then washed thoroughly with distilled water to remove any unbound dye and destained with Sorenson's buffer (0.1 M sodium citrate in 50% ethanol, pH 4.2). The absorbance of the extracted stain is measured at 540 nm.