In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar. * Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties. * Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)
Voorbereiden van stamoplossingen
Biologische activiteit
Beschrijving
Beta-Lapachone (β-Lapachone, ARQ-501) is een selectieve DNA topoisomerase I-remmer, die geen remmende activiteiten vertoont tegen DNA topoisomerase II of ligase. Fase 2.
Doelen
Topo I
IDO1
0.44 μM
In vitro
Beta-Lapachone remt de DNA-relaxatie geïnduceerd door DNA topoisomerase I op een dosisafhankelijke manier. Behandeling met deze verbinding (100 nM of meer) resulteert in >95% remming van Topo I DNA-ontwindingsactiviteit vergeleken met de DMSO-controle. Deze chemische stof (1-5 μM) veroorzaakt een blokkade in G0/G1 van de celcyclus en induceert apoptose door Topo I op DNA te vergrendelen en de beweging van de replicatievork te blokkeren in HL-60 en drie humane prostaatkankercellen (DU-145, PC-3 en LNCaP). Het vergemakkelijkt de migratie van muizen 3T3-fibroblasten en humane endotheelcellen EAhy926 via verschillende MAPK-signaleringsroutes, en versnelt zo de genezing van schraapwonden in vitro. Bovendien remt deze verbinding gezuiverde recombinante IDO1-activiteit door middel van oncompetitieve remming met een IC50 van 0,44 μM, en vertoont het ook een superieure retentie van intracellulaire IDO1-remmende activiteit met een IC50 van 1,0 μM, gedeeltelijk afhankelijk van biotransformatie door NQO1. Deze chemische stof induceert geprogrammeerde necrose van NQO1+ kankercellen door NQO1-afhankelijke reactieve zuurstofspecies (ROS)-vorming en PARP1-hyperactivatie. [5]
In vivo
Beta-Lapachone-behandeling (50 mg/kg) leidt tot krachtige remming van de in vivo tumorgroei in een xenograft muismodel van humaan eierstokkanker, en de combinatie van deze verbinding en taxol produceert een synergistische inductie van apoptose. Bij normale en diabetische (db/db) muizen resulteert behandeling met deze chemische stof in een sneller genezingsproces dan alleen het vehikel.
Protocol (uit referentie)
Kinase-assay:
Topoisomerase I Katalytische Activiteitstest
Topoisomerase I Katalytische Activiteitstest: De enzymatische activiteit wordt geanalyseerd door de DNA-ontwindingsassay. DNA topoisomerase I, van TopoGEN (1 eenheid, gedefinieerd als de hoeveelheid enzym die 0,5 μg superhelicaal DNA omzet naar de ontspannen toestand in 30 minuten bij 37 °C), wordt geïncubeerd met 0,5 μg 6x174 RF DNA, in aanwezigheid of afwezigheid van Beta-Lapachone, in 20 μL relaxatiebuffer (50 mM Tris (pH 7,5), 50 mM KCI, 10 mM MgCl2, 0,5 mM dithiothreitol, 0,5 mM EDTA, 30 μg/mL bovine serum albumine) gedurende 30 minuten bij 37 °C. Reacties worden gestopt door toevoeging van 1% SDS en proteinase K (50 μg/mL). Na een extra incubatie van 1 uur bij 37 °C worden de producten gescheiden door elektroforese in 1% agarosegel in TAE-buffer (0,04 M trisacetaat, 0,001 M EDTA). De gel wordt na elektroforese gekleurd met ethidiumbromide. Het fotografische negatief wordt gescand met een NIH-beeldanalysesysteem.
IC50 calculations for each cell line are determined by DNA amount (IS) and anchorage-dependent colony formation (CF) assays. For the CF assay, cells are seeded at 500 viable cells/well in 6-well plates and incubated overnight, then treated with equal volumes of media containing beta-lapachone at final concentrations ranging from 0.005 to 50 μM in half-log increments (controls were treated with 0.25% DMSO, equivalent to the highest dose of this compound used) for 4 hour or for continuous 12-hour exposures. Plates (3 wells/condition) are stained with crystal violet, and colonies of >50 normal-appearing cells are enumerated. IC50 values for various cells are calculated using drug doses with numbers of colonies surrounding 50% of control. For DNA assays, plates are harvested for IC50 determinations 8 days after treatment using a CytoFluor 2350 fluorescence measurement system. Six-well samplings are included in the calculation of DNA fluor units for each dose. A graph of this chemical dose versus percentage control DNA in fluor units is used to calculate each IC50. All experiments are repeated at least twice, each in duplicate.
High‑throughput screening identification of a small‑molecule compound that induces ferroptosis and attenuates the invasion and migration of hepatocellular carcinoma cells by targeting the STAT3/GPX4 axis
[ Int J Oncol, 2023, 62(3)42]
Potential drug discovery for COVID-19 treatment targeting Cathepsin L using a deep learning-based strategy
[ Comput Struct Biotechnol J, 2022, 20:2442-2454]
Kinetics of γH2AX and phospho-histone H3 following pulse treatment of TK6 cells provides insights into clastogenic activity
[ Mutagenesis, 2021, geab014]
Nitazoxanide, an anti-parasitic drug, efficiently ameliorates learning and memory impairments in AD model mice.
[ Acta Pharmacol Sin, 2019, 10.1038/s41401-019-0220-1]
Predictions of genotoxic potential, mode of action, molecular targets, and potency via a tiered multiflow® assay data analysis strategy
[ Environ Mol Mutagen, 2019, 60(6):513-533]
RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.
VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.
NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.
