Bafilomycin A1 (Baf-A1)

CatalogusnummerS1413 Batch:S141309

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C35H58O9
Moleculair gewicht 622.83 CAS-nr. 88899-55-2
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 100 mg/mL (160.55 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO 40%PEG300 5%Tween80 50%ddH2O

Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.

 5.000mg/ml (8.03mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
Clear solution
5% DMSO 95% Corn oil

Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.

 1.650mg/ml (2.65mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 33 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Bafilomycin A1 (Baf-A1) is een vacuolaire H+-ATPase remmer met een IC50 van 0,44 nM, en het blijkt autophagy te remmen terwijl het apoptosis induceert.
Doelen
H+-ATPase
(Cell-free assay)
0.44 nM
In vitro Bafilomycin A1 (Baf-A1) is een toxisch macrolide antibioticum afgeleid van Streptomyces griseus, dat de kortsluitstroom remt die wordt geïnduceerd door het buitenste mantel epitheel (OME). De IC50 en maximale remmingsdosis van deze verbinding zijn respectievelijk 0,17 μM en 0,5 μM. Bovendien remt het de zuurinstroom met een IC50-waarde van 0,4 nM. Het remt ook de verzuring dosisafhankelijk, wat resulteert in een lagere quenching en dus een hogere fluorescentie. Deze verbinding voorkomt de vacuolisatie van Hela-cellen geïnduceerd door H. pylori, met een remmende concentratie die 50% van het maximale (ID50) van 4 nM geeft, en is zeer efficiënt in het herstellen van gevacuoliseerde cellen naar een normaal uiterlijk. Het beïnvloedt ook het transport van endocytosemateriaal van vroege naar late endocytische compartimenten, niet alleen door de lage endosomale pH te verdrijven, maar ook door het transport van vroege naar late endosomen in HeLa-cellen te blokkeren. Bij doses van 0,1-1 μM remt het de verzuring van lysosomen volledig, zoals onthuld door de incubatie met acridine-oranje in BNL CL.2- en A431-cellen. Wanneer toegevoegd aan Hanks' gebalanceerde zoutoplossing, wordt de afbraak van endogene eiwitten sterk geremd en hopen talrijke autofagosomen zich op in H-4-II-E-cellen. Het voorkomt ook het verschijnen van endocytose HRP in autofagische vacuolen.
In vivo Bafilomycin A1 (Baf-A1) (1 μM en 0,1 μM) remt de resorptieve activiteit van gekweekte osteoclasten volledig. Deze verbinding remt dosisafhankelijk de Na+-opnamesnelheid bij jonge tilapia met een Ki van 0,16 μM.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[2]
  • ATPase enzymactiviteitstesten

    Het ATPase enzymassaymedium bevat 6 mM MgSO4, 50 mM HEPES (pH 7.4), 200 mM Na2SO3 (V-ATPase activator), 0.5 mM natriumorthovanadaat (P-ATPase remmer), 0.5 mM natriumazide (F-ATPase remmer) en 3 mM Na2ATP. Dit medium (1.0 mL), met of zonder toevoeging van de V-type ATPase remmer Bafilomycin A1 (Baf-A1), wordt gedurende 60 minuten bij 23–25 °C geïncubeerd met het gefilterde homogenaat (0.1 mL). De reactie wordt gestopt door toevoeging van 1 mL 3% TCA. Spectrometrische blanco's worden bereid zoals voor de enzymassay, met uitzondering dat het weefselmonster na het zuur wordt toegevoegd. Fosfaatanalyse wordt uitgevoerd door 2 mL 1-butanol en 0.2 mL molybdaatoplossing (5 g ammoniummolybdaat, 22 mL H2SO4 tot 100 mL) toe te voegen. Na 15 seconden vortexen wordt de oplossing geneutraliseerd met 0.5 mL citraatoplossing (100 g/500 mL, pH 7.0) en opnieuw 15 seconden gevortext. De oplossing wordt vervolgens gecentrifugeerd (2000 × g; 3 minuten) om de butanolfase te scheiden en de absorptie van deze fase wordt afgelezen bij 400 nm. Orthofosfaatstandaarden worden bereid (0.1 μM–2.0 μM) en op dezelfde manier behandeld als de enzymactiviteitstesten. Enzymactiviteit wordt uitgedrukt in μmol orthofosfaat dat per uur en per milligram eiwit wordt vrijgemaakt. V-ATPase activiteit wordt beschouwd als het verschil tussen de totale ATPase activiteit gemeten in aanwezigheid van Na2SO3, natriumorthovanadaat en natriumazide en de ATPase activiteit gemeten in aanwezigheid van deze reagentia en van deze verbinding.
Celassay:

[4]
  • Cellijnen

    HeLa cells

  • Concentraties

    ~20 nM

  • Incubatietijd

    20 hours

  • Methode

    H. pylori bacteria extract is treated with inhibitors, before addition to HeLa cells, as follows: DCCD 10 mM for 1 hour at 30 ºC; NBD-CI 100 μM for 1 hour at 30 ºC and the reaction is blocked with glycine 10 mM final concentration; NEM 275 μM for 1 hour at 30 ºC and the reaction is blocked by addition of β-mercaptoethanol 275 mM; Mg-ATP 14 μM for 1 hour at 0 ºC; 100 μM KNO3 and 14 μM Mg-ATP for 1 hour at 30 μM; NaCO3 100 μM, pH 11 for 1 hour at 0 ºC. The bacterial extract is then added to cell with a 40-fold dilution at a final concentration of 0.65 mg/mL. Controls are HeLa cells incubated with untreated bacterial extracts and cells treated with Bafilomycin A1 (Baf-A1) under the same conditions as bacterial extracts, at the same concentrations or after a 40-fold dilution. The vacuotating activity of the bacterial extracts is assayed.
Dierstudie:

[9]
  • Dierlijke modellen

    Young (approximately 9 days old) Mozambique tilapia, Oreochromis mossambicus

  • Doseringen

    10 μM

  • Toediening

    --

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9684329/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15596387/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17576165/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8446034/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9811698/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1832676/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9639028/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7817803/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10574743/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14713959/

Klantproductvalidatie

Mitochondrial depolarization mediated relocation of mitochondrial RC-TPP into lysosomes and the ensuing lysosomal acidity triggered rhodamine fluorescence. RC-TPP-loaded Tom20-GFP+ HeLa cells were treated without or with CCCP (20 μM) in the presence or absence of BFA (200 nM). Colocalization of Tom20-GFP (in green) and mitochondrial RC-TPP (in blue) is shown in cyan. Scale bar: 10 μm.

Gegevens van [ , , Chem Sci, 2017, 8(3):1915-1921 ]

A549 cells and SK-1 cells co-treated with Baf A1 (100 nM) and SFN-NAC (30 μM) for 24 h, the expression of LC3 I and LC3 II was determined by Western blot.

Gegevens van [ , , Cancer Lett, 2018, 431:85-95 ]

HOS cells were pretreated with Baf-A1 (100 nM) for 2 h prior to treatment with CAP (100 μM) and DDP (16.7 μM) alone or in combination for 24 h. The expression levels of autophagy-related and apoptosis-related proteins were measured by Western blotting (a).

Gegevens van [ , , J Exp Clin Cancer Res, 2018, 37(1):251 ]

Representative immunofluorescence images of TGF-β3-induced MUC5AC in 16HBE cells treated with 3-MA or Baf A1.

Gegevens van [ , , EBioMedicine, 2018, 33:242-252 ]

Sellecks Bafilomycin A1 (Baf-A1) Is geciteerd door 572 Publicaties

Cytosolic acetyl-coenzyme A is a signalling metabolite to control mitophagy [ Nature, 2025, 10.1038/s41586-025-09745-x] PubMed: 41225001
Oncogenic RAS induces a distinctive form of non-canonical autophagy mediated by the P38-ULK1-PI4KB axis [ Cell Res, 2025, 10.1038/s41422-025-01085-9] PubMed: 40055523
Host FSTL1 defines the impact of stem cell therapy on liver fibrosis by potentiating the early recruitment of inflammatory macrophages [ Signal Transduct Target Ther, 2025, 10(1):81] PubMed: 40050288
LZTR1 regulates epithelial MHC-I expression via NF-κB1 to modulate CD8+ T cells activation [ Cell Discov, 2025, 11(1):84] PubMed: 41162356
Alterations in PD-L1 succinylation shape anti-tumor immune responses in melanoma [ Nat Genet, 2025, 57(3):680-693] PubMed: 40069506
ACSS2 drives senescence-associated secretory phenotype by limiting purine biosynthesis through PAICS acetylation [ Nat Commun, 2025, 16(1):2071] PubMed: 40021646
BiDAC-dependent degradation of plasma membrane proteins by the endolysosomal system [ Nat Commun, 2025, 16(1):4345] PubMed: 40346034
Rab27a regulates the transport of influenza virus membrane proteins to the plasma membrane [ Nat Commun, 2025, 16(1):6271] PubMed: 40623997
The O-glycosyltransferase C1GALT1 promotes EWSR1::FLI1 expression and is a therapeutic target for Ewing sarcoma [ Nat Commun, 2025, 16(1):1267] PubMed: 39894896
S100P is a ferroptosis suppressor to facilitate hepatocellular carcinoma development by rewiring lipid metabolism [ Nat Commun, 2025, 16(1):509] PubMed: 39779666

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.