AZD6482

CatalogusnummerS1462 Batch:S146202

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C₂₂H₂₄N₄O₄

Moleculair gewicht

408.45

CAS-nr.

1173900-33-8

Oplosbaarheid (25°C)*

In vitro

DMSO

82 mg/mL (200.75 mM)

Ethanol

10 mg/mL (24.48 mM)

Water

Insoluble

In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)

Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	30%PEG400 1 0.5%Tween80 2 5%propylene glycol Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.	30.000mg/ml (73.45mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 300 μL of 100 mg/ml clarified PEG400 stock solution to 5 μL of Tween80, mix evenly to clarify it; add 50 μL Propylene glycol to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 645 μL ddH2O to adjust the volume. to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving

AZD6482 (KIN-193) is een PI3Kβ-remmer met een IC50 van 10 nM, 8-, 87- en 109-voudig selectiever voor PI3Kβ dan voor PI3Kδ, PI3Kα en PI3Kγ in celvrije assays. Fase 1.

Doelen

PI3Kβ (Cell-free assay)	PI3Kδ (Cell-free assay)	DNA-PK (Cell-free assay)	PI3Kα (Cell-free assay)
10 nM	80 nM	420 nM	870 nM

In vitro

AZD6482 remt ook PI3Kα, γ en δ, met een IC50 van 80 nM tot 1,09 μM, welke significant lager zijn dan die van zijn (+)-enantiomeer (S-vorm). Deze verbinding is een antiplaatjesmiddel; het blokkeert plaatjesactivering, adhesie/aggregatie en bevordert plaatjesdisaggregatie in een assay van gewassen plaatjesaggregatie (WPA), met een IC50-waarde van 6 nM. Bovendien remt deze chemische stof, door zich te richten op PI3Kβ, specifiek trombose zonder de normale hemostase te verstoren. Daarom wordt het gebruikt als een antitrombotisch geneesmiddel voor de profylaxe van trombotische aandoeningen.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:^{^[1]}	Assay voor PI3K-enzymremming De remming van PI3Kβ, PI3Kα, PI3Kγ en PI3Kδ wordt geëvalueerd in een AlphaScreen-gebaseerde enzymactiviteitsassay met behulp van humane recombinante enzymen. De assay meet de PI3K-gemedieerde omzetting van PIP2 naar PIP3. Gebiotinyleerd PIP3, een GST-gelabeld pleckstrinehomologie (PH)-domein en de twee AlphaScreen-kralen vormen een complex dat een signaal afgeeft bij laserstimulatie op 680 nm. Het PIP3 dat in de enzymreactie wordt gevormd, concurreert met het gebiotinyleerde PIP3 om binding aan het PH-domein, waardoor het signaal afneemt met toenemende enzymproductie. Deze verbinding wordt opgelost in DMSO en toegevoegd aan 384-wells platen. PBKβ, PBKα, PBKγ of PBKδ wordt toegevoegd in een Tris-buffer (50 mM Tris pH 7,6, 0,05% CHAPS, 5 mM DTT en 24 mM MgCl₂) en 20 minuten voorafgaand aan de toevoeging van substraatoplossing die PIP2 en ATP bevat, met deze chemische stof geïncubeerd. De enzymreactie wordt na 20 minuten gestopt door toevoeging van een stopoplossing die EDTA en biotine-PIP3 bevat, gevolgd door toevoeging van een detectieoplossing die GST-grpl PH en AlphaScreen-kralen bevat. Platen worden minimaal 5 uur in het donker gelaten voorafgaand aan analyse. De uiteindelijke concentraties van DMSO, ATP en PIP2 in de assay zijn respectievelijk 0,8%, 4 μM en 40 μM. IC50-waarden worden berekend volgens de vergelijking, y = {a+[(b-a)/(l+(x/IC50)^s)]}, waarbij y = % remming; a = 0%; b = 100%; s = de helling van de concentratie-responscurve; x = de concentratie van deze verbinding.
Celassay:^{^[1]}	Cellijnen Human platelet pellet Concentraties 0–60 nM, dissolved in DMSO Incubatietijd 5 min Methode For assay of washed platelet aggregation (WPA), the platelet pellets are isolated from human blood and re-suspended to 2 × 10¹⁵/L in Tyrodes buffer (TB) containing 1 μM hirudin and 0.02 U/mL apyrase. Then, the platelet suspension is left to rest at room temperature for 30 min. Just prior to time for assay, CaCl₂ is added to a final concentration of 2 mM. AZD6482, dissolved in DMSO, is added to a 96-well plate prior to the addition of the washed platelet suspension. The platelet suspension is preincubated with this compound for 5 min. Light absorption at 650 nm is recorded before and after a 5 min plate shake and referred to as recording 0 (R0) and Rl. A mouse anti-human CD9 antibody is added (at a donor specific concentration) to each well prior to next 10 min plate shake and light absorption recording; R2. For data analysis, light absorbance in wells with TB are subtracted from all readings before percent aggregation is calculated according the formula: [(R1-R2)/R1] × 100 = % aggregation. Spontaneous aggregation or pro-aggregatory effect of the inhibitor is evaluated by the same formula, [(R0-Rl)/R0] × 100 = % aggregation. IC50 values are calculated according to the equation, y = {a+[(b-a)/(l+(x/IC50)^s)]}, where y = % inhibition; a = 0%; b = 100%; s = the slope of the concentration-response curve; x = this chemical concentration.

Kinase-assay:^{^[1]}

Assay voor PI3K-enzymremming
De remming van PI3Kβ, PI3Kα, PI3Kγ en PI3Kδ wordt geëvalueerd in een AlphaScreen-gebaseerde enzymactiviteitsassay met behulp van humane recombinante enzymen. De assay meet de PI3K-gemedieerde omzetting van PIP2 naar PIP3. Gebiotinyleerd PIP3, een GST-gelabeld pleckstrinehomologie (PH)-domein en de twee AlphaScreen-kralen vormen een complex dat een signaal afgeeft bij laserstimulatie op 680 nm. Het PIP3 dat in de enzymreactie wordt gevormd, concurreert met het gebiotinyleerde PIP3 om binding aan het PH-domein, waardoor het signaal afneemt met toenemende enzymproductie. Deze verbinding wordt opgelost in DMSO en toegevoegd aan 384-wells platen. PBKβ, PBKα, PBKγ of PBKδ wordt toegevoegd in een Tris-buffer (50 mM Tris pH 7,6, 0,05% CHAPS, 5 mM DTT en 24 mM MgCl₂) en 20 minuten voorafgaand aan de toevoeging van substraatoplossing die PIP2 en ATP bevat, met deze chemische stof geïncubeerd. De enzymreactie wordt na 20 minuten gestopt door toevoeging van een stopoplossing die EDTA en biotine-PIP3 bevat, gevolgd door toevoeging van een detectieoplossing die GST-grpl PH en AlphaScreen-kralen bevat. Platen worden minimaal 5 uur in het donker gelaten voorafgaand aan analyse. De uiteindelijke concentraties van DMSO, ATP en PIP2 in de assay zijn respectievelijk 0,8%, 4 μM en 40 μM. IC50-waarden worden berekend volgens de vergelijking, y = {a+[(b-a)/(l+(x/IC50)^s)]}, waarbij y = % remming; a = 0%; b = 100%; s = de helling van de concentratie-responscurve; x = de concentratie van deze verbinding.

Celassay:^{^[1]}

Cellijnen
Human platelet pellet
Concentraties
0–60 nM, dissolved in DMSO
Incubatietijd
5 min
Methode
For assay of washed platelet aggregation (WPA), the platelet pellets are isolated from human blood and re-suspended to 2 × 10¹⁵/L in Tyrodes buffer (TB) containing 1 μM hirudin and 0.02 U/mL apyrase. Then, the platelet suspension is left to rest at room temperature for 30 min. Just prior to time for assay, CaCl₂ is added to a final concentration of 2 mM. AZD6482, dissolved in DMSO, is added to a 96-well plate prior to the addition of the washed platelet suspension. The platelet suspension is preincubated with this compound for 5 min. Light absorption at 650 nm is recorded before and after a 5 min plate shake and referred to as recording 0 (R0) and Rl. A mouse anti-human CD9 antibody is added (at a donor specific concentration) to each well prior to next 10 min plate shake and light absorption recording; R2. For data analysis, light absorbance in wells with TB are subtracted from all readings before percent aggregation is calculated according the formula: [(R1-R2)/R1] × 100 = % aggregation. Spontaneous aggregation or pro-aggregatory effect of the inhibitor is evaluated by the same formula, [(R0-Rl)/R0] × 100 = % aggregation. IC50 values are calculated according to the equation, y = {a+[(b-a)/(l+(x/IC50)^s)]}, where y = % inhibition; a = 0%; b = 100%; s = the slope of the concentration-response curve; x = this chemical concentration.

Referenties

http://www.wipo.int/patentscope/search/en/WO2009093972

Klantproductvalidatie

: , , Mol Cancer Res, 2017, 15(6):765-775

: , , One customer

: , , Dr. Zhang of Tianjin Medical University

: Gegevens van [ , , Oncotarget, 2016, 7(34):54897-54912 ]

Sellecks AZD6482 Is geciteerd door 27 Publicaties

Human colonic organoids for understanding early events of familial adenomatous polyposis pathogenesis [ J Pathol, 2025, 265(1):26-40]	PubMed: 39641466
Longitudinal phosphoproteomics reveals the PI3K-PAK1 axis as a potential target for recurrent colorectal liver metastases [ Cell Rep, 2024, 43(12):115061]	PubMed: 39689713
Molecular mechanisms of PI3K isoform dependence in embryonic growth [ J Turk Ger Gynecol Assoc, 2024, 25(3):159-166]	PubMed: 39219229
A Gene Co-Expression Network-Based Drug Repositioning Approach Identifies Candidates for Treatment of Hepatocellular Carcinoma [ Cancers (Basel), 2022, 14(6)1573]	PubMed: 35326724
ZAP70 Activation Compensates for Loss of Class IA PI3K Isoforms Through Activation of the JAK-STAT3 Pathway [ Cancer Diagn Progn, 2022, 2(3):391-404]	PubMed: 35530641
Synergism between the phosphatidylinositol 3-kinase p110β isoform inhibitor AZD6482 and the mixed lineage kinase 3 inhibitor URMC-099 on the blockade of glioblastoma cell motility and focal adhesion formation [ Cancer Cell Int, 2021, 21(1):24]	PubMed: 33407478
Metabolic Imaging Detects Resistance to PI3Kα Inhibition Mediated by Persistent FOXM1 Expression in ER+ Breast Cancer [ Cancer Cell, 2020, S1535-6108(20)30427-X]	PubMed: 32976773
PIK3CA C-terminal frameshift mutations are novel oncogenic events that sensitize tumors to PI3K-α inhibition [ Proc Natl Acad Sci U S A, 2020, 117(39):24427-24433]	PubMed: 32929011
Targeting phosphatidylinositol 3 kinase-β and -δ for Bruton tyrosine kinase resistance in diffuse large B-cell lymphoma [ Blood Adv, 2020, 4(18):4382-4392]	PubMed: 32926124
Application of a Biphasic Mathematical Model of Cancer Cell Drug Response for Formulating Potent and Synergistic Targeted Drug Combinations to Triple Negative Breast Cancer Cells. [ Cancers (Basel), 2020, 27;12(5)pii: E1087]	PubMed: 32349331

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.