AZD5991

AZD5991 is een potente en directe remmer van Mcl-1 met hoge selectiviteit ten opzichte van andere Bcl-2-familie-eiwitten. Deze verbinding bindt direct aan Mcl-1 en induceert snelle Apoptosis in kankercellen, met name myeloom en acute myeloïde leukemie (GI50 < 100nM), door activering van de Bak-afhankelijke mitochondriale apoptotische route. In een panel van van kanker afgeleide cellijnen van hematologische of solide tumor oorsprong, doodt deze chemische stof bij voorkeur hematologische cellen[1][3].

AZD5991 vertoont potente antitumoractiviteit in vivo met volledige tumorregressie in verschillende modellen van multipel myeloom en acute myeloïde leukemie na een enkele getolereerde dosis als monotherapie of in combinatie met venetoclax. In deze in vivo studies correleert de cytotoxische activiteit van deze verbinding nauw met de inductie van de mitochondriale apoptotische route, zoals blijkt uit de klieving van caspase-3 en PARP[1].

• Cellijnen

  MOLP-8 cells

• Concentraties

  0-500 nM

• Incubatietijd

  30 min

• Methode

  MOLP-8 cells are treated with AZD5991 or DMSO ontrol for 30 min. Then samples are centrifuged and pellet resuspended in ice-cold lysis buffer and incubated for 20 min on ice with vortexing every 5 min. Next, samples are centrifuged and protein concentration was assessed. Samples are pre-cleared for 30 min using rotation at 4 °C with 50% slurry of Protein A/G magnetic beads followed by incubation with anti-Mcl-1 antibody overnight at 4 °C with rotation. Protein A/G magnetic beads are then added for 1 h at 4 °C with rotation. Beads are washed four times with lysis buffer / PBS (1:1), then 10% sample reducing agent is added to each IP pellet followed by western blotting analysis.

• Dierlijke modellen

  Subcutaneous MOLP-8 tumors model (Female C.B.-17 SCID mice)

• Doseringen

  10-100 mg/kg

• Toediening

  IV