In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar. * Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties. * Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)
Voorbereiden van stamoplossingen
Biologische activiteit
Beschrijving
Zorifertinib (AZD3759) is een potente, oraal actieve, CNS-penetrerende EGFR-remmer met IC50-waarden van respectievelijk 0,3 nM, 0,2 nM en 0,2 nM voor EGFR (WT), EGFR (L858R) en EGFR (exon 19Del). Deze verbinding bevindt zich in fase 1.
Doelen
EGFR (L858R) (Cell-free assay)
EGFR (exon 19Del) (Cell-free assay)
EGFR (WT) (Cell-free assay)
0.2 nM
0.2 nM
0.3 nM
In vitro
In H3255 (L858R) cellen remt Zorifertinib (AZD3759) de EGFR-fosforylering met een IC50 van 7,2 nM. Deze verbinding vertoonde een remmend effect op de pEGFR-route en de proliferatie van EGFR-mutatie-afgeleide cellen PC-9 en H3255 met IC50's van respectievelijk 7,7 nM en 7 nM, maar geen significante activiteit tegen de proliferatie van H838-cellen.
In vivo
Zorifertinib (AZD3759) vertoont een goede orale biologische beschikbaarheid bij honden en dringt uitgebreid door in de hersenen van apen. In een hersenmetastase PC-9 (Exon19Del) model veroorzaakt deze verbinding (15 mg/kg) een significante dosisafhankelijke antitumorale werkzaamheid.
De remmende potentie van Zorifertinib (AZD3759) tegen EGFR WT- en mutante enzymen wordt beoordeeld met behulp van de CisBio homogene, tijdsopgeloste fluorescentiebenadering (HTRF, Cat No. 62TK0PEJ) volgens de instructies van de fabrikant. De uiteindelijke enzymconcentraties die in deze test worden gebruikt, zijn 0,1 nM, 0,03 nM en 0,026 nM voor respectievelijk EGFR wild type, L858R en Exon19Del, en 0,8 μM, 4 μM en 25 μM ATP, overeenkomend met de Km-waarden van de EGFR-enzymen, worden dienovereenkomstig toegepast. Kortom, 3 μL ATP en 2 μM TK-biotine-peptide substraat worden geïncubeerd in aanwezigheid of afwezigheid van serieel verdunde verbinding bij kamertemperatuur in 384-wells Greiner witte polystyreen assayplaten. De reactie wordt geïnitieerd door toevoeging van 3 μL kinase die het substraatpeptide kan fosforyleren, en de assaybuffer bevat 1 mM DTT, 5 mM MgCl2, 1 mM MnCl2 en 0,01% CHAPS. Na 30 minuten incubatie wordt de reactie gestopt door toevoeging van 6 μl detectiereagensmix die 250 nM Strep-XL665 en TK Ab Europium Cryptate verdund in detectiebuffer bevat. De platen worden 1 uur geïncubeerd voordat de fluorescentie vervolgens wordt gemeten bij respectievelijk 615 nm en 665 nm met een excitatiegolflengte van 320 nm door de EnVision Multilabel Reader van Perkin Elmer met behulp van standaard HTRF-instellingen. De berekende signaalverhouding van 665 nm/615 nm is evenredig met de kinaseactiviteit. De concentratie van deze verbinding die 50% remming van de respectievelijke kinase (IC50) veroorzaakt, wordt berekend met behulp van een vier-parameter logistische fit.
PC-9 (exon 19Del), H3255 (L858R) and H838 (wt) cells
Concentraties
~30 mM
Incubatietijd
72 h
Methode
Zorifertinib (AZD3759) cell proliferation is determined by MTS methods. Briefly, cells are seeded in 96-well plates (at a density to allow for logarithmic growth during the 72-hour assay) and incubated overnight at 37 °C and 5% CO2. Cells are then exposed to concentrations of this compound ranging from 30 to 0.0003 mM for 72 hours. For the MTS endpoint, cell proliferation is measured by the CellTiter AQueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay reagent in accordance with the manufacturer’s protocol. Absorbance is measured with a Tecan Ultra instrument. Predose measurements are made, and concentration needed to reduce the growth of treated cells to half that of untreated cells (GI50) values are determined using absorbance readings.
Sellecks Zorifertinib (AZD3759) Is geciteerd door 6 Publicaties
A Novel Network Pharmacology Strategy Based on the Universal Effectiveness-Common Mechanism of Medical Herbs Uncovers Therapeutic Targets in Traumatic Brain Injury
[ Drug Des Devel Ther, 2024, 18:1175-1188]
Aurora kinase blockade drives de novo addiction of cervical squamous cell carcinoma to druggable EGFR signalling
[ Oncogene, 2022, 10.1038/s41388-022-02256-3]
YH25448, an Irreversible EGFR-TKI with Potent Intracranial Activity in EGFR Mutant Non-Small Cell Lung Cancer
[ Clin Cancer Res, 2019, 25(8):2575-2587]
Brain distribution of a panel of EGFR inhibitors using cassette-dosing in wild-type and Abcb1/Abcg2 deficient mice
[Kim M Drug Metab Dispos, 2019, 10.1124/dmd.118.084210]
RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.
VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.
NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.
