Spebrutinib (AVL-292)

CatalogusnummerS7173 Batch:S717301

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C₂₂H₂₂FN₅O₃

Moleculair gewicht

423.44

CAS-nr.

1202757-89-8

Oplosbaarheid (25°C)*

In vitro

DMSO

85 mg/mL (200.73 mM)

Water

Insoluble

Ethanol

Insoluble

In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)

Homogeneous suspension

CMC-NA

≥5mg/ml

Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving

Spebrutinib (AVL-292) is een covalente, oraal actieve en zeer selectieve BTK-remmer met een IC50 van <0,5 nM, en vertoont minstens 1400-voudige selectiviteit ten opzichte van de andere geteste kinasen. Het bevindt zich in fase 1.

Doelen

BTK
(Cell-free assay)

<0.5 nM

In vitro

Spebrutinib (AVL-292) vertoont dosisafhankelijke remming van Btk met een EC50 van 8 nM en van stroomafwaartse BCR-signaleringscomponenten in Ramos-cellen. Door BTK-activiteiten te remmen, remt het verder de B-celproliferatie met een EC50 van 3 nM.

In vivo

In een collageen-geïnduceerd artritis-muismodel remt Spebrutinib (AVL-292) (3-30 mg/kg, p.o.) dosisafhankelijk de klinische tekenen van inflammatoire ziekte, waaronder vermindering van gewrichts- en pootzwelling en zichtbare roodheid van de aangedane poten.

Kenmerken

Oraal biobeschikbare BTK-selectieve remmer die is getest in fase I klinische studies voor de behandeling van terugkerend of refractair B-NHL, CLL en WM.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:^{^[2]}	Procedures voor BTK OMNIA Assay De Omnia continue uitlees-assay wordt in essentie uitgevoerd zoals beschreven door de leverancier. De assaycondities zijn: 40 μM ATP (1X K_MATP), 10 μM Y5-Sox en 10 nM BTK-enzym. Kortom, een substraatmengsel dat 1,13X ATP en het Y5 Sox-substraat bevat, wordt eerst bereid in 1X Omnia Kinase Reaction Buffer (KRB) bestaande uit 20 mM Tris, pH 7,5, 5 mM MgCl₂, 1 mM EGTA, 5 mM β-glycerofosfaat, 5% glycerol en 0,2 mM DTT. Voor IC50-metingen van Spebrutinib (AVL-292) worden 5 μL enzym geïncubeerd met serieel verdunde (3-voudig) verbindingen, bereid in 50% DMSO, in een Corning (#3574) 384-wells, witte, niet-bindende oppervlaktemicrotiterplaat bij 25°C gedurende 30 min. Kinase-reacties worden gestart met de toevoeging van 45 μL van het ATP/Y5-substraatmengsel en gedurende 60 minuten gemonitord bij λex360/λem485 in een Synergy 4-plaatlezer. Voortgangscurves van elke put worden onderzocht op lineaire reactiekinetiek en fitstatistieken. De initiële snelheid van elke reactie wordt bepaald uit de helling van een plot van relatieve fluorescentie-eenheden versus tijd en vervolgens uitgezet tegen de inhibitorconcentratie om de IC50 te schatten met behulp van het Response, Variable Slope-model in GraphPad Prism van GraphPad Software.
Celassay:^{^[2]}	Cellijnen Human B cells Concentraties ~1000 nM Incubatietijd 72 hours Methode A suspension of resting purified naïve human B cells isolated by negative selection in RPMI is prepared at 0.4–0.5 × 10⁶ cells/ml. Cells are mixed together with α-human IgM (final concentration of 5 μg/ml in each well) and vehicle (dimethyl sulfoxide) or Spebrutinib (AVL-292) (final concentrations of 0.01, 0.1, 1.0, 10.0, 100.0, or 1000 nM per well) and seeded in a 96-well plate. This compound is used at the specified concentrations. Cells are incubated for 56 hours in a humidified incubator maintained at 37°C and 5% CO₂. ³H-Thymidine is added (final concentration of 1 μCi in each well) and cells are incubated overnight, harvested, and measured for ³H incorporation. Experiments are performed in triplicate.

Kinase-assay:^{^[2]}

Procedures voor BTK OMNIA Assay
De Omnia continue uitlees-assay wordt in essentie uitgevoerd zoals beschreven door de leverancier. De assaycondities zijn: 40 μM ATP (1X K_MATP), 10 μM Y5-Sox en 10 nM BTK-enzym. Kortom, een substraatmengsel dat 1,13X ATP en het Y5 Sox-substraat bevat, wordt eerst bereid in 1X Omnia Kinase Reaction Buffer (KRB) bestaande uit 20 mM Tris, pH 7,5, 5 mM MgCl₂, 1 mM EGTA, 5 mM β-glycerofosfaat, 5% glycerol en 0,2 mM DTT. Voor IC50-metingen van Spebrutinib (AVL-292) worden 5 μL enzym geïncubeerd met serieel verdunde (3-voudig) verbindingen, bereid in 50% DMSO, in een Corning (#3574) 384-wells, witte, niet-bindende oppervlaktemicrotiterplaat bij 25°C gedurende 30 min. Kinase-reacties worden gestart met de toevoeging van 45 μL van het ATP/Y5-substraatmengsel en gedurende 60 minuten gemonitord bij λex360/λem485 in een Synergy 4-plaatlezer. Voortgangscurves van elke put worden onderzocht op lineaire reactiekinetiek en fitstatistieken. De initiële snelheid van elke reactie wordt bepaald uit de helling van een plot van relatieve fluorescentie-eenheden versus tijd en vervolgens uitgezet tegen de inhibitorconcentratie om de IC50 te schatten met behulp van het Response, Variable Slope-model in GraphPad Prism van GraphPad Software.

Celassay:^{^[2]}

Cellijnen
Human B cells
Concentraties
~1000 nM
Incubatietijd
72 hours
Methode
A suspension of resting purified naïve human B cells isolated by negative selection in RPMI is prepared at 0.4–0.5 × 10⁶ cells/ml. Cells are mixed together with α-human IgM (final concentration of 5 μg/ml in each well) and vehicle (dimethyl sulfoxide) or Spebrutinib (AVL-292) (final concentrations of 0.01, 0.1, 1.0, 10.0, 100.0, or 1000 nM per well) and seeded in a 96-well plate. This compound is used at the specified concentrations. Cells are incubated for 56 hours in a humidified incubator maintained at 37°C and 5% CO₂. ³H-Thymidine is added (final concentration of 1 μCi in each well) and cells are incubated overnight, harvested, and measured for ³H incorporation. Experiments are performed in triplicate.

Referenties

http://www.celgene.com/pdfs/2011_ASH_AVL-292.pdf
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23709115/

Klantproductvalidatie

: , , Allergy, 2017, 72(11):1666-1676

: , , J Biomol Screen, 2015, 20(7):876-886.

Sellecks Spebrutinib (AVL-292) Is geciteerd door 12 Publicaties

Temporal mapping and pharmacological manipulation of signaling architecture of Tyrosine kinases in Traumatic Brain Injury (TBI) [ oparu, 2023, 10.18725/OPARU-47820]	PubMed: None
Surface-associated antigen induces permeabilization of primary mouse B-cells and lysosome exocytosis facilitating antigen uptake and presentation to T-cells [ Elife, 2021, 10e66984]	PubMed: 34704555
Assessment of the effects of Syk and BTK inhibitors on GPVI-mediated platelet signaling and function [ Am J Physiol Cell Physiol, 2021, 320(5):C902-C915]	PubMed: 33689480
Combining ibrutinib and checkpoint blockade improves CD8+ T-cell function and control of chronic lymphocytic leukemia in Em-TCL1 mice. [ Haematologica, 2020, 10.3324/haematol.2019.238154]	PubMed: 32139435
Differential impact of BTK active site inhibitors on the conformational state of full-length BTK [ Elife, 2020, 9e60470]	PubMed: 33226337
Effects of Inhibitors against Syk-BTK-PI3K Signaling on Platelet Function [ ScholarsArchive@OSU, 2020, 51]	PubMed: N/A
Effects of Inhibitors against Syk-BTK-PI3K Signaling on Platelet Function [ ScholarsArchive@OSU, 2020, None]	PubMed: None
Inhibition of Bruton's Tyrosine Kinase Modulates Microglial Phagocytosis: Therapeutic Implications for Alzheimer's Disease [ J Neuroimmune Pharmacol, 2019, 10.1007/s11481-019-09839-0]	PubMed: 30758770
Improving CLL Vγ9Vδ2-T-cell fitness for cellular therapy by ex vivo activation and ibrutinib [ Blood, 2018, 132(21):2260-2272]	PubMed: 30213872
BTK inhibition is a potent approach to block IgE-mediated histamine release in human basophils. [Smiljkovic D, et al. Allergy, 2017, 10.1111/all.13166]	PubMed: 28328081

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.