Atglistatin

Deze verbinding remt lipolyse in cel- en orgaanculturen door zich te richten op ATGL, zonder cytotoxiciteit tot een concentratie van 50 μM. [1]

In vivo resulteert Atglistatin (i.p.) in een dosis- en tijd-afhankelijke remming van lipolyse. Orale behandeling met deze verbinding veroorzaakt een dosis-afhankelijke afname van FA tot respectievelijk 50% en 62%, en veroorzaakt ook een sterke vermindering van de plasma TG-niveaus (43%). Bovendien vertoont deze chemische stof een duidelijke weefseldistributie en hoopt deze zich voornamelijk op in lever- en vetweefsel. [1]

• Bepaling van lipase-activiteit

  Voor de bepaling van lipase-activiteit worden lysaten geïncubeerd met een substraat dat radiogemerkte [9,10-3H(N)]-trioleïne bevat. Vervolgens worden FA geëxtraheerd en gekwantificeerd door vloeistofscintillatietelling. Gegevens worden gepresenteerd als gemiddelde ± S.D. van drievoudige bepalingen en zijn representatief voor ten minste drie onafhankelijke experimenten.

• Cellijnen

  AML-12 mouse hepatocytes

• Concentraties

  ~50 μM

• Incubatietijd

  2 hours

• Methode

  For MTT-based in vitro viability assays, cells are seeded in 96-well plates and cultured under standard conditions for 24 h. The next day, cells are pretreated with different concentrations of Atglistatin dissolved in DMSO or dissolved in DMF as positive control for 2 h. Medium is replaced by an identical fresh medium and incubated again for the indicated time points. Thereafter, cells are incubated for 3 h with 100 μL Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide (MTT). The resulting violet formazan crystals are dissolved by adding 100 μL of MTT solubilization solution (0.1% NP-40, 4 mM HCl and anhydrous isopropanol). After complete dissolution of the formazan product, absorbance is measured at 595 nm using 690 nm as reference wavelength.

• Dierlijke modellen

  Mice (C57Bl/6J)

• Doseringen

  1.4 mg/mouse (oral gavage); ~400 μmol/kg (i.p.)

• Toediening

  oral gavage or i.p.