(R)-(-)-Gossypol (AT-101) acetic acid

CatalogusnummerS2812 Batch:S281201

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C30H30O8.C2H4O2
Moleculair gewicht 578.61 CAS-nr. 866541-93-7
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 116 mg/mL (200.48 mM)
Ethanol 89 mg/mL (153.81 mM)
Water Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving (R)-(-)-Gossypol (AT-101) azijnzuur, het R-(-) enantiomeer van Gossypol azijnzuur, bindt aan Bcl-2, Bcl-xL en Mcl-1 met Ki van 0,32 μM, 0,48 μM en 0,18 μM in celvrije assays; remt het BIR3-domein en BID niet. AT-101 triggert gelijktijdig apoptosis en een cytoprotectief type autophagy. Fase 2.
Doelen
Mcl-1
(Cell-free assay)		 Bcl-2
(Cell-free assay)		 Bcl-xL
(Cell-free assay)
0.18 μM(Ki) 0.32 μM(Ki) 0.48 μM(Ki)
In vitro AT-101 remt een panel van verschillende lymfoproliferatieve maligniteiten met IC50 variërend van 1,2 μM tot 7,4 μM. AT-101 (10 μM) verstoort de Δψm op een concentratie- en tijdsafhankelijke manier in diffuse grootcellige B-cel- en mantelcellymfoomlijnen. AT-101 (1 μM of 2 μM) gecombineerd met carfilzomib (6 nM of 10 nM) induceert apoptose in HBL-2- en Granta-cellijnen. AT-101 (20 μM gedurende 24 uur) resulteert in een mediane apoptose van 72% en down-regulatie van Mcl-1 in CLL-lymfocyten zowel in suspensiekweek als in stromale cocultuur. Stromale cellen expresseren ondetecteerbare niveaus van antiapoptotische maar hoge niveaus van geactiveerde ERK- en AKT-eiwitten en hebben weinig of geen apoptose met AT-101. AT-101 induceert apoptose op een tijd- en dosisafhankelijke manier, met ED50-waarden van respectievelijk 1,9 mM en 2,4 mM in Jurkat T- en U937-cellen. AT-101 (10 μM) gecombineerd met straling (32 Gy) induceert meer apoptose dan straling alleen en overschrijdt de som van de effecten veroorzaakt door de enkelvoudige middelen. AT-101 activeert SAPK/JNK op een dosis- en tijdsafhankelijke manier. AT-101 (10 µM) induceert apoptose door activering van caspase-9, -3 en -7 in VCaP-cellen. AT-101 (10 µM) vermindert Bcl-2- en Mcl-1-expressie in VCaP-cellen. AT-101 (< 20 μM) is in staat de groei van multipel myeloomcellen te remmen ondanks de stimulerende groeieffecten die worden geleverd door stromale cellen in het beenmergmilieu. AT-101 (10 μM) induceert apoptose in multipel myeloomcellen via de activering van caspasen 3, caspasen 9 en PARP. AT-101 (10 μM) bevordert apoptose in multipel myeloomcellen door de Bax/Bcl-2-verhouding en de mitochondriale membraanpotentiaal te verstoren.
In vivo AT-101 is nog steeds detecteerbaar in plasma met gemiddelde concentraties van 0,49 μM voor de 35 mg/kg-groep en 0,39 μM voor de 200 mg/kg-groep in SCID beige muizen met RL-DLBCL-xenograft. AT-101 piekplasmaconcentratie wordt waargenomen na 30 minuten toediening van het medicijn in beide dosisniveaus, waarbij de 200 mg/kg-groep een gemiddelde plasmaconcentratie vertoont die bijna 4 keer groter is dan de 35 mg/kg-groep (respectievelijk 7,88 μM en 27,78 μM) in SCID beige muizen. AT-101 (25 mg/kg tot 100 mg/kg, oraal) resulteert onbeperkt in een eerdere aanvang van gewichtsverlies gelijk aan meer dan 10% van het voorbehandelingsgewicht en de dood bij SCID beige muizen. AT-101 (35 mg/kg, oraal per dag gedurende 10 dagen) plus intraperitoneaal cyclofosfamide (Cy) en intraperitoneaal rituximab (R) tonen significante tumorvolumeregeling vergeleken met elke andere behandelingsgroep. AT-101 (15 mg/kg, p.o., 5 dagen/week) als enkelvoudig middel in intacte muizen vermindert de ontwikkeling van VCaP-tumorgroei significant vergeleken met onbehandelde tumoren in weken 2 tot 6. AT-101 in combinatie met chirurgische castratie vertraagt het begin van androgeen-onafhankelijke VCaP-tumorgroei vergeleken met alleen castratie- of alleen AT-101-groepen bij muizen.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[1]
  • Fluorescentiepolarisatie-gebaseerde bindingsassay

    Voor competitieve bindings experimenten worden Bcl-2-eiwit (40 nM) en FAM-Bid-peptide (2,5 nM) voor-geïncubeerd in de assaybuffer (100 mM kaliumfosfaat, pH 7,5; 100 μg/mL bovien gammaglobuline; 0,02% natriumazide). 5 μL van een oplossing in DMSO van AT101 wordt toegevoegd aan de Bcl-2/FAM-Bid-oplossing in Dynex 96-well, zwarte, rondbodemplaten om een eindvolume van 125 μL te produceren. Voor elk experiment worden een controle met Bcl-2 en Flu-Bid-peptide (gelijk aan 0% remming) en een andere controle met alleen FAM-Bid opgenomen op elke assayplaat. Na 4 uur incubatie werden de polarisatiewaarden in milipolarisatie-eenheden (mP) gemeten bij een excitatiegolflengte van 485 nm en een emissiegolflengte van 530 nm met behulp van de Ultra plaatlezer. IC50, de remmerconcentratie waarbij 50% van het gebonden peptide wordt verdrongen, wordt bepaald uit de plot met behulp van niet-lineaire kleinste-kwadratenanalyse en curve-fitting uitgevoerd met GraphPad Prizm 4 software. Het ongelabelde Bid BH3-peptide wordt gebruikt als positieve controle. PF voor Bcl-xL-eiwit, Bak BH3-peptide gelabeld met 6-carboxyfluoresceïne succinimidyl ester (FAM-Bak) in plaats van de FAM-Bim om het signaal te maximaliseren. Er wordt vastgesteld dat FAM-Bak een Kd heeft van 6 nM tot Bcl-xL-eiwit. De competitieve bindingsassay voor Bcl-xL is hetzelfde als die voor Bcl-2 met de volgende uitzonderingen. 30 nM Bcl-xL-eiwit en 2,5 nM FAM-Bak-peptide in de volgende assaybuffer: 50 mM Tris-Bis, pH 7,4 en 0,01% bovien gammaglobuline. PF voor Mcl-1-eiwit, FAM-Bid-peptide en humaan Mcl-1-eiwit worden gebruikt. Er wordt vastgesteld dat FAM-Bid-peptide bindt aan humaan Mcl-1-eiwit met een Kd van 1,71 nM. De competitieve bindingsassays voor Mcl-1 worden op dezelfde manier uitgevoerd als die voor Bcl-2 met de volgende uitzonderingen. 5 nM Mcl-1 en 1 nM Flu-Bid-peptide in de volgende assaybuffer: 25 mM Tris, pH 8,0; 150 mM NaCl en 0,05% Pluronic acid.
Celassay:[2]
  • Cellijnen

    RL, H9, SKI, HBL-2, Granta and JJN-3 cell lines

  • Concentraties

    ~10 μM

  • Incubatietijd

    72 hours

  • Methode

    Cells are counted and resuspended at an approximate concentration of 3×105 cells/well in a 24-well plate. AT-101 is diluted in DMSO that is maintained at a final concentration of less than 0.5%. Concentrations of AT-101 from 1 nM to 10 μM are used in most experiments. Following incubation at 37 ℃ in a 5% CO2 humidified incubator, 100 μL from each well is transferred to a 96-well opaque-walled plate; cell-Titer-Glo Reagent is added in a 1:1 ratio. Contents are mixed for 2 minutes on an orbital shaker to induce cell lysis. The plates are allowed to incubate at room temperature for 10 minutes before recording luminescence with a Synergy HT Multi-Detection Microplate Reader. In the schedule dependency experiments, serial dilutions of each drug are prepared in ratios relative to their IC50. Cells are preincubated with AT-101 for up to 72 hours, while 4-HC is added for a 24-hour period, being added at time 0, 24 hours, and 48 hours from the start of incubation. Each experiment is performed in triplicate and repeated at least twice.
Dierstudie:[2]
  • Dierlijke modellen

    SCID beige mice bearing RL-DLBCL xenograft

  • Doseringen

    100 mg/kg

  • Toediening

    Oral gavage

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17034116/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18292288/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18836097/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19852810/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18084610/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18346839/

Klantproductvalidatie

<p>(B and C) assessment of antimigration capacity in each group by transwell migration assay. Abbreviations: CDDP, cisplatin; DMSO, dimethyl sulfoxide.</p>

, , Drug Des Devel Ther, 2014, 8:2517-29.

The cellular autophagy induced by the concentration of AT101 (5 μM) and APE1 siRNA was examined by confocal microscopy with the application of Cyto-IDr autophagy detection kit.

Gegevens van [ , , Oncotarget, 2016, 7(23):34430-41 ]

Effect of AT-101 (AT) on MM cell lines survival. The survival of human (MM-B1, H-Meso-1, and MM-F1) and mouse (#40a) MM cell lines were assessed by the SRB assay after 24, 48, and 72 h of treatment with DMSO or AT-101. The percentage of surviving cells treated with the compound was calculated by normalizing the OD value to that of the control cultures (DMSO). The results are expressed as the means ± SD of three independent experiments performed in triplicate (xp ≤ 0.05, ∗p ≤ 0.01, #p ≤ 0.001 compared with the cultures treated with DMSO).

Gegevens van [ , , Front Pharmacol, 2018, 9:1269 ]

AT-101 enhances the antimigration ability of CDDP in A549 cells exposed to A549 cell-conditioned medium. Notes: (A) The cell migration assay was conducted using Transwell® plates. A549 cells were treated with the control vehicle, 5 μM CDDP, 5 μM AT-101, or 5 μM AT-101 plus 5 μM CDDP and the supernatants were collected as the tumor conditioned medium. A549 cells were suspended in serum-free Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium. A549 cells were seeded to the upper chambers, and the lower chambers were filled with RPMI 1640 medium containing 10% fetal bovine serum or tumor conditioned medium. After incubation for 18 hours at 37°C, cells were fixed, stained, and analyzed under inverted light microscopy (40× magnification). The number of migrated cells was counted using an inverted microscope. (B) Bar graph showing the migrating cell numbers of different treatment groups. Data are presented as the mean ± standard deviation of at least three independent experiments. **P<0.01 by one-way analysis of variance. Abbreviation: CDDP, cisplatin.

Gegevens van [ , , Drug Des Devel Ther, 2015, 9:2887-910 ]

Sellecks (R)-(-)-Gossypol (AT-101) acetic acid Is geciteerd door 20 Publicaties

Follicle stimulating hormone controls granulosa cell glutamine synthesis to regulate ovulation [ Protein Cell, 2024, pwad065] PubMed: 38167949
Pharmacological Targeting of Bcl-2 Induces Caspase 3-Mediated Cleavage of HDAC6 and Regulates the Autophagy Process in Colorectal Cancer [ Int J Mol Sci, 2023, 24(7)6662] PubMed: 37047634
Exploiting ulnerabilities induced b recurrent mutations in chondrosarcoma and giant cell tumour of bone: therapeutic targeting of the altered epigenome and be [ Leiden University The Netherlands, 2023, ] PubMed: None
Integrative analysis of drug response and clinical outcome in acute myeloid leukemia [ Cancer Cell, 2022, S1535-6108(22)00312-9] PubMed: 35868306
Lactate Dehydrogenase B Is Required for Pancreatic Cancer Cell Immortalization Through Activation of Telomerase Activity [ Front Oncol, 2022, 12:821620] PubMed: 35669414
Gossypol Acetic Acid Attenuates Cardiac Ischemia/Reperfusion Injury in Rats via an Antiferroptotic Mechanism [ Biomolecules, 2021, 11(11)1667] PubMed: 34827665
AT101 [(-)-Gossypol] Selectively Inhibits MCL1 and Sensitizes Carcinoma to BH3 Mimetics by Inducing and Stabilizing NOXA [ Cancers (Basel), 2020, 12(8):E2298] PubMed: 32824203
Using CETSA assay and a mathematical model to reveal dual Bcl-2/Mcl-1 inhibition and on-target mechanism for ABT-199 and S1. [ Eur J Pharm Sci, 2020, 142:105105] PubMed: 31669390
Comparison of putative BH3 mimetics AT-101, HA14-1, sabutoclax and TW-37 with ABT-737 in platelets. [ Platelets, 2020, 10.1080/09537104.2020.1724276] PubMed: 32079453
Effect of Exosomal APE1 on Sensitivity of NSCLC A549 Cells to Cisplatin [ Cancer Research on Prevention and Treatment, 2020, (7): 492-497] PubMed: None

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.