Xevinapant (AT406)

CatalogusnummerS2754 Batch:S275404

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C32H43N5O4
Moleculair gewicht 561.71 CAS-nr. 1071992-99-8
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 100 mg/mL (178.02 mM)
Ethanol 100 mg/mL (178.02 mM)
Water Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Xevinapant (AT406, ARRY-334543, Debio1143, SM-406) is een potente Smac-mimeticum en een antagonist van IAP (remmer van Apoptosis -eiwit via E3 Ligase ), bindt aan XIAP-BIR3, cIAP1-BIR3 en cIAP2-BIR3 met een Ki van 66,4 nM, 1,9 nM en 5,1 nM, 50- tot 100-voudig hogere affiniteiten dan het Smac AVPI-peptide. Fase 1.
Doelen
cIAP1-BIR3
(cell-free assay)		 cIAP2-BIR3
(cell-free assay)		 XIAP-BIR3
(cell-free assay)
1.9 nM(Ki) 5.1 nM(Ki) 66.4 nM(Ki)
In vitro AT-406 is een Smac-mimeticum en lijkt het AVPI-peptide nauwkeurig na te bootsen in zowel waterstofbruggen als hydrofobe interacties met XIAP, met aanvullende hydrofobe contacten met W323 van XIAP. AT-406 is gevoeliger voor deze IAPs dan Smac AVPI-peptide met 50-100 keer hogere bindingsaffiniteiten. AT-406 (bij 1 μM) herstelt de activiteit van caspase-9, die wordt onderdrukt door 500 nM XIAP BIR3 in een celvrij systeem, volledig. In MDA-MB-231-cellen induceert AT-406 snelle cellulaire cIAP1-degradatie en trekt het ook het cellulaire XIAP-eiwit neer. AT-406 remt effectief veel menselijke kankercellijnen en toont IC50 van 144 en 142 nM in MDA-MB-231-cellen en SK-OV-3 ovariële cellen, met lage toxiciteit tegen normaal-achtige menselijke borstepitheel MCF-12F-cellen en primaire menselijke normale prostaatepitheelcellen. AT-406 induceert Apoptosis in MDA-MB-231-cellen door activering van caspase-3 en klieving van PARP te induceren.
In vivo AT-406 heeft goede farmacokinetische (PK) eigenschappen en orale biologische beschikbaarheid bij muizen, ratten, niet-menselijke primaten en honden. In het MDA-MB-231-xenograft induceert AT-406 effectief cIAP1-degradatie en verwerking van procaspase-8, klieving van PARP in tumorweefsels bij 100 mg/kg met goede tolerantie, zelfs bij 200 mg/kg. AT-406 induceert een significante tumorgoei-inhibitie met een p van 0,0012 bij 100 mg/kg.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • Op fluorescentiepolarisatie gebaseerde assays voor XIAP, cIAP1 en cIAP2 BIR3-eiwitten

    FL-AT-406 (het fluorescent gelabelde AT-406) wordt gebruikt om een reeks nieuwe FP-assays te ontwikkelen voor het bepalen van de bindingsaffiniteiten van Smac-mimetica aan XIAP, cIAP-1 en cIAP-2 BIR3-eiwitten. De Kd-waarde van FL-AT-406 voor elk IAP-eiwit wordt bepaald door titratie-experimenten met een vaste concentratie FL-AT-406 en verschillende concentraties van het eiwit tot volledige verzadiging. Fluorescentiepolarisatiewaarden worden gemeten met een Infinite M-1000 plaatlezer in Microfluor 2 96-wells, zwarte, rondbodemplaten. Aan elk putje worden FL-AT-406 (respectievelijk 2, 1 en 1 nM voor experimenten met XIAP BIR3, cIAP-1 BIR3 en cIAP-2 BIR3) en verschillende concentraties van het eiwit toegevoegd tot een eindvolume van 125 μL in de assaybuffer (100 mM kaliumfosfaat, pH 7,5, 100 μg/mL bovine γ-globuline, 0,02% natriumazide, met 4% DMSO). Platen worden gemengd en 2-3 uur bij kamertemperatuur geïncubeerd met zacht schudden. De polarisatiewaarden in millipolarisatie-eenheden (mP) worden gemeten bij een excitatiegolflengte van 485 nm en een emissiegolflengte van 530 nm. Evenwichts dissociatieconstanten (Kd) worden vervolgens berekend door de sigmoïdale dosisafhankelijke FP-toenames te fitten als functie van eiwitconcentraties met behulp van Graphpad Prism 5.0-software. In competitieve bindingsexperimenten voor XIAP3 BIR3 wordt AT-406 geïncubeerd met 20 nM XIAP BIR3-eiwit en 2 nM FL-AT-406 in de assaybuffer (100 mM kaliumfosfaat, pH 7,5; 100 μg/mL bovine γ-globuline; 0,02% natriumazide). In competitieve bindingsexperimenten voor cIAP1 BIR3-eiwit worden 3 nM eiwit en 1 nM FL-AT-406 gebruikt. In competitieve bindingsexperimenten voor cIAP2 BIR3 worden 5 nM eiwit en 1 nM FL-AT-406 gebruikt. Voor elk competitief bindingsexperiment worden polarisatiewaarden gemeten na 2-3 uur incubatie met een Infinite M-1000 plaatlezer. De IC50-waarde, de inhibitorconcentratie waarbij 50% van de gebonden tracer wordt verdrongen, wordt bepaald uit de plot met behulp van niet-lineaire kleinste-kwadratenanalyse. Curvenpassing wordt uitgevoerd met de PRISM-software. Een Ki-waarde voor AT-406 wordt berekend.
Celassay:

[1]
  • Cellijnen

    MDA-MB-231 breast cancer and SK-OV-3 ovarian cancer cell lines

  • Concentraties

    ~ 1 μM

  • Incubatietijd

    4 days

  • Methode

    Cells are seeded in 96-well flat bottom cell culture plates at a density of (3-4) × 103 cells/well with AT-406 and incubated for 4 days. The rate of cell growth inhibition after treatment with different concentrations of AT-406 is determined by assaying with (2-(2-methoxy-4-nitrophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium monosodium salt (WST-8). WST-8 is added to each well to a final concentration of 10%, and then the plates are incubated at 37 °C for 2−3 hours. The absorbance of the samples is measured at 450 nm using a TECAN ULTRA reader. Concentration of AT-406 that inhibited cell growth by 50% (IC50) is calculated by comparing absorbance in the untreated cells and the cells treated with AT-406.
Dierstudie:

[1]
  • Dierlijke modellen

    MDA-MB-231 xenograft tumors in severe combined immune deficiency (SCID) mice

  • Doseringen

    10 mg/kg (i.v.), 10 mg/kg (p.o.), 30 mg/kg (p.o.) and 100 mg/kg (p.o.)

  • Toediening

    Administered via intravenously (i.v.) or oral gavage (p.o.)

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21443232/

Klantproductvalidatie

<p>G, cells treated with the SM406 (1 μmol/L) for 48 hours were subjected to Western blotting.</p>

, , Cancer Res, 2015, 75(8):1736-48.

<p>(C) The U2OS cells were treated with TRAIL for 5 h, and with or without pre-treatment of A(AT406) for 1 h, and transient transfection with c-FLIP-siRNA for 24 h as indicated in the graph.</p>

, , Int J Oncol, 2016, 49(1):153-63.

<p>AT406 is cytotoxic to human pancreatic cancer cells. Panc-1 cells (A-C), Mia-PaCa-2 cells (D), primary human pancreatic cancer cells (“Primary Pan Can”, D) or epithelial HPDE6c7 cells (D) were either left untreated (“Ctrl”, same for all figures) or stimulated with applied concentrations of AT406 (10-1000 nM) for indicated periods of time, cell survival was tested by CellTiter-Glo luminescent assay (A and D) and the clonogenic assay (B); Cell proliferation was tested by BrdU incorporation assay (C). All values were expressed as mean ± SD. For each assay, n = 5. Experiments in this figure were repeated three times, and similar results were obtained. *p < 0.05 vs. group of “Ctrl”.</p>

, , Biochem Biophys Res Commun, 2016, 478(1):293-9.

HepG2 cells were treated with AT406 (10 μM) or plus OSI-027 (“OSI”, 100 nM), cells were further cultured for indicated periods of time, expression of listed proteins was tested by Western blotting assay (A). HepG2 cells transfected with scramble non-sense control siRNA (“NS-siRNA”) or Mcl-1 siRNA (“-1/-2”, 200 nM each, 24 hours) were stimulated with AT406 (10 μM) for indicated periods of time, Mcl-1 expression (B, upper panel); Cell viability (B, lower panel) and cell apoptosis (C) were tested. *indicated statistically significant differences as compared to “Ctrl” group. ##indicated statistically significant differences as compared to “NS-siRNA” group.

Gegevens van [ , , Oncotarget, 2017, 8(6):9466-9475 ]

Sellecks Xevinapant (AT406) Is geciteerd door 39 Publicaties

Caspase 9-induced apoptosis enables efficient fetal cell ablation and disease modeling [ Nat Commun, 2025, 16(1):2572] PubMed: 40089478
The cancer-associated SF3B1K700E spliceosome mutation confers enhanced sensitivity to BV-6-induced cytotoxicity [ Cell Death Dis, 2025, 16(1):476] PubMed: 40595498
Potentiating CAR-T bystander killing by enhanced Fas/FasL signaling mitigates antigen escape in heterogeneous tumors [ bioRxiv, 2025, 2025.09.22.677496] PubMed: 41040218
Complex IIa formation and ABC transporters determine sensitivity of OSCC to Smac mimetics [ Cell Death Dis, 2024, 15(11):855] PubMed: 39578442
Combination Treatment of Resistant Acute Promyelocytic Leukemia Cells with Arsenic Trioxide and Anti-Apoptotic Gene Inhibitors [ Pharmaceuticals (Basel), 2024, 17(11)1529] PubMed: 39598439
The Effect of Xevinapant Combined with Ionizing Radiation on HNSCC and Normal Tissue Cells and the Impact of Xevinapant on Its Targeted Proteins cIAP1 and XIAP [ Cells, 2023, 12(12)1653] PubMed: 37371123
Mycoplasma hyorhinis infection promotes TNF-α signaling and SMAC mimetic-mediated apoptosis in human prostate cancer [ Heliyon, 2023, 9(10):e20655] PubMed: 37867861
CD137 (4-1BB) requires physically associated cIAPs for signal transduction and antitumor effects [ Sci Adv, 2023, 9(33):eadf6692] PubMed: 37595047
CD4+ T cell-mimicking nanoparticles encapsulating DIABLO/SMAC mimetics broadly neutralize HIV-1 and selectively kill HIV-1-infected cells [ Theranostics, 2021, 11(18):9009-9021] PubMed: 34522224
Targeting c-IAP1, c-IAP2, and Bcl-2 Eliminates Senescent Glioblastoma Cells Following Temozolomide Treatment [ Cancers (Basel), 2021, 13(14)3585] PubMed: 34298797

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.