In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar. * Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties. * Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)
Voorbereiden van stamoplossingen
Biologische activiteit
Beschrijving
Apremilast (CC-10004) is een potente en oraal actieve PDE4- en TNF-α-remmer met IC50 van respectievelijk 74 nM en 77 nM.
Doelen
PDE4
TNF-α
74 nM
77 nM
In vitro
Apremilast is potenter in de remming van PDE4 vergeleken met cAMP of cGMP hydrolyserende enzymen uit andere PDE-families. Deze verbinding vertoont een breed patroon van ontstekingsremmende activiteit in verschillende celtypen, remt de TNF-α, IL-12 en IL-23 productie, evenals NK- en keratinocytresponsen. Het blijkt de zymosan-geïnduceerde PMN-productie van IL-8 te remmen met een IC50 van 94 nM. Deze chemische stof remt de fMLF-geïnduceerde PMN CD18 en CD11b expressie met een IC50 van respectievelijk 390 nM en 74 nM, en remt de fMLF-geïnduceerde adhesie van PMN aan HUVEC's met een IC50 van 150 nM. Het remt de keratinocyt TNF-α productie, zonder effect op de vitaliteit van keratinocytcellen zoals gemeten door intracellulaire ATP-niveaus. .
In vivo
Apremilast is stabiel in aanwezigheid van menselijke microsomen (t1/2 > 60 min). Het is 90% eiwitgebonden in menselijk plasma. Orale en intraveneuze toediening van deze verbinding bij vrouwelijke ratten toonde aan dat het een goede farmacokinetiek heeft met een lage klaring, een matig verdelingsvolume en een orale biologische beschikbaarheid van 64%. In een LPS-geïnduceerd TNF-α remmingsmodel bij ratten werd het TNF-α remmende vermogen van deze verbinding in vivo onderzocht, en de ED50 werd bepaald op 0,03 mg/kg. In een ander LPS-geïnduceerd neutrofilie-model bij ratten vertoonde deze verbinding een ED50-bereik van 0,3 mg/kg tot 0,9 mg/kg.
Cellen (1×109) worden gewassen in PBS en gelyseerd in koude homogenisatiebuffer (20 mM Tris-HCl, pH 7,1, 3 mM 2-mercaptoethanol, 1 mM MgCl2, 0,1 mM EGTA, 1 μM PMSF, 1 μg/mL leupeptine). Na homogenisatie in een Dounce-homogenisator wordt het supernatant verzameld door centrifugatie en geladen op een Sephacryl S-200 kolom geëquilibreerd in homogenisatiebuffer. PDE wordt geëlueerd in homogenisatiebuffer en de rolipram-gevoelige fracties worden gepoold en in aliquots opgeslagen. Enzymactiviteit wordt bepaald in 50 mM Tris-HCl, pH 7,5, 5 mM MgCl2 en 1 μM cAMP (waarvan 1% 3H cAMP is) in aanwezigheid van variërende concentraties remmers. De gebruikte hoeveelheid extract wordt vooraf bepaald om ervoor te zorgen dat reacties binnen het lineaire bereik vallen en minder dan 15% van het totale substraat verbruiken. Reacties worden uitgevoerd bij 30 °C gedurende 30 min en beëindigd door 2 min koken. De monsters worden vervolgens gekoeld en behandeld met slangengif (1 mg/mL) bij 30 °C gedurende 15 min. Ongebruikt substraat wordt verwijderd door incubatie met 200 μL AG1-X8 hars gedurende 15 min. Monsters worden vervolgens gecentrifugeerd op 3000 tpm gedurende 5 min en 50 μL van de waterige fase wordt genomen voor telling. Elk datapunt wordt in duplo uitgevoerd waarbij de activiteit wordt uitgedrukt als percentage van de controle. IC50 wordt bepaald uit dosis-respons-curven afgeleid van drie onafhankelijke experimenten.
For proliferation studies, human neonatal foreskin epidermal keratinocytes (HEKn cells) are plated at 3000 cells per well in 96-well flat bottom tissue culture plates for 2 days. HEKn cells are treated with apremilast or 0.1% DMSO as the vehicle control for 1 h before ultraviolet B (UVB) irradiation with 50 mJ/cm2 in a UV Stratalinker 2400, calibrated with 312 nm UVB bulbs. Media and this compound are replaced, and cells are incubated for 18 h. Lysates are transferred to plates and shaken for 2 min before chemiluminescence is read on a TopCount NXT Luminescence Counter.
Sellecks Apremilast Is geciteerd door 9 Publicaties
Intestinal dysbiosis exacerbates the pathogenesis of psoriasis-like phenotype through changes in fatty acid metabolism
[ Signal Transduct Target Ther, 2023, 8(1):40]
Targeting PDE4 as a promising therapeutic strategy in chronic ulcerative colitis through modulating mucosal homeostasis
[ Acta Pharm Sin B, 2022, 12(1):228-245]
Phosphodiesterase-4 Inhibition Reduces Cutaneous Inflammation and IL-1β Expression in a Psoriasiform Mouse Model but Does Not Inhibit Inflammasome Activation
[ Int J Mol Sci, 2021, 22(23)12878]
Application of a newly-developed cynomolgus macaque BiTE-mediated cytotoxic T-lymphocyte activity assay to various immunomodulatory agents in vitro
[ J Immunotoxicol, 2021, 18(1):154-162]
RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.
VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.
NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.
