Tozasertib (VX-680)

CatalogusnummerS1048 Batch:S104804

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C23H28N8OS
Moleculair gewicht 464.59 CAS-nr. 639089-54-6
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 93 mg/mL (200.17 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Tozasertib (VX-680) is een pan-Aurora-remmer, voornamelijk gericht tegen Aurora A met een Kiapp van 0,6 nM in een celvrije test, minder krachtig tegen Aurora B/Aurora C en 100-voudig selectiever voor Aurora A dan 55 andere kinasen. De enige uitzonderingen zijn Fms-related tyrosine kinase-3 (FLT-3) en BCR-ABL tyrosine kinase, die beide door deze verbinding worden geremd met een Ki van 30 nM. Het induceert apoptosis en autophagy en bevindt zich in Fase 2.
Doelen
Aurora A
(Cell-free assay)		 Aurora C
(Cell-free assay)		 Aurora B
(Cell-free assay)		 FLT3
(Cell-free assay)		 Bcr-Abl
(Cell-free assay)
0.6 nM(Ki app) 4.6 nM(Ki app) 18 nM(Ki app) 30 nM(Ki) 30 nM(Ki)
In vitro Hoewel het een multi-kinaseprofiel heeft, induceert Tozasertib (VX-680) vergelijkbare cytotoxiciteit met een IC50 van ongeveer 300 nM en vertoont het een AUR B-achtig remmend fenotype van G2/M-arrest, endoreduplicatie en apoptose in BaF3-cellen getransfecteerd met ABL- of FLT-3 (mutant en wildtype) kinasen. Deze verbinding voorkomt de CAL-62-proliferatie op een tijd-afhankelijke manier. Behandeling gedurende 14 dagen vermindert het aantal en de grootte van kolonies significant met ongeveer 70% in de 8305C en 90% in de CAL-62, 8505C en BHT-101. Behandeling van de verschillende ATC-cellen ermee remt de proliferatie met een IC50 tussen 25 en 150 nM. Het vermindert significant het vermogen van de verschillende cellijnen om kolonies te vormen in zachte agar. Analyse van caspase-3-activiteit geeft aan dat VX-680 apoptose induceert in de verschillende cellijnen. CAL-62-cellen die gedurende 12 uur aan de verbinding werden blootgesteld, vertoonden een accumulatie van cellen met ≥4N DNA-gehalte. Tijd-lapse-analyse toont aan dat behandelde CAL-62-cellen de metafase verlaten zonder te delen. Bovendien wordt histon H3-fosforylatie na behandeling opgeheven. Het heeft een significante remmende activiteit tegen BCR-Abl met de T315I-mutatie in patiëntafgeleide monsters.
In vivo Tozasertib (VX-680) veroorzaakt een duidelijke afname van de tumoromvang in een humaan AML (HL-60) xenograftmodel. Bij naakte muizen die gedurende 13 dagen tweemaal daags intraperitoneaal (b.i.d. i.p.) werden behandeld met 75 mg/kg, namen de gemiddelde tumorvolumes met 98% af. De afname van de tumorgroei is dosisafhankelijk en significant bij een dosis van 12,5 mg/kg b.i.d. Deze verbinding wordt goed verdragen, met een kleine afname van het lichaamsgewicht die alleen bij de hoogste dosis wordt waargenomen. Het veroorzaakt ook tumorregressie in pancreas- en colonxenograftmodellen. Tozasertib vertoont ook krachtige antitumoractiviteit wanneer het intraveneus wordt geïnfuseerd bij naakte ratten met gevestigde HCT116-tumoren. Een hogere dosis (2 mg/kg/u) verbetert de werkzaamheid met een afname van 56% in het gemiddelde tumorvolume.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[3]
  • Kinase-inhibitieassays

    Het verbruik van ATP wordt via het pyruvaatkinase/lactaatdehydrogenase enzympaar gekoppeld aan de oxidatie van NADH, wat kan worden gevolgd door de afname in absorptie bij 340 nm. Reacties bevatten 100 mM Tris (pH 8), 10 mM MgCl2, 2,2 mM ATP, 1 mM fosfoenolpyruvaat, 0,6 mg/mL NADH, 75 eenheden/mL pyruvaatkinase, 105 eenheden/mL lactaatdehydrogenase, en 0,5 mM substraatpeptide (sequentie: EAIYAAPFAKKK). Reacties (75 μL) worden gestart door voldoende kinase toe te voegen om de reacties tot 30 nM kinaseconcentratie te brengen en de afname in absorptie wordt gedurende 30 minuten bij 30°C in een microtiterplaat-spectrofotometer gevolgd. Remmende constanten worden verkregen door toevoeging van 3,75 μL Tozasertib (VX-680) in 100% DMSO of alleen DMSO. Ki-waarden worden als volgt berekend: K i = IC50 / (1 + [S]/Kd), waarbij [S] = [ATP] = 2,2 mM, en Kd (van ATP naar Abl) = 70 μM. Deze waarden worden berekend uitgaande van een Kd (ATP) van 70 μM voor het wildtype en H396P Abl kinase domein.
Celassay:

[2]
  • Cellijnen

    CAL-62 cells

  • Concentraties

    5-500 nM

  • Incubatietijd

    4 days

  • Methode

    The CAL-62 cells are cultured in the absence (dimethyl sulfoxide, DMSO) or the presence of 500  nM Tozasertib (VX-680) for different periods of time (1-5 days). The dose-dependent effects of this compound on cell proliferation are evaluated by treating the different ATC cells for 4 days with different concentrations of the Aurora inhibitor (5–500  nM). The cells are pulse labeled with 30  mM BrdU for 2  hours before the end of the incubation time. The BrdU incorporation is analyzed by means of a colorimetric immunoassay using the cell proliferation ELISA kit. The results from VX-680-treated cells are compared with those observed in control cells and expressed as a fold of variation versus control.
Dierstudie:

[1]
  • Dierlijke modellen

    Female athymic NCr-nu mice bearing HL-60 leukemia cells

  • Doseringen

    50 mg/kg, 75 mg/kg

  • Toediening

    Administered via i.p.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14981513/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18430894/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16424036/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17240048/

Klantproductvalidatie

<p>Senescence induction upon PKCι depletion combined with aurora kinase inhibition. ( a) MCF7 cells were transfected as above to deplete PKCι . Two days after transfection, cells were treated for the indicated time period with 400 n M VX-680. Medium with VX-680 was then removed and fresh medium was added. Cells were stained for SA-b -gal activity 5 days after the start of transfection.* indicates a P value <0.05. ( b) MCF7 cells were treated as above. Five days after transfection, cells were fixed and assessed for the presence of gH2AX foci by immunofluorescence microscopy. (c, d) MCF7 cells were treated with dimethyl sulfoxide (DMSO) control or 400 n M VX-680 for the indicated time periods. Total cell lysates were then analyzed by western blotting for levels of p21 and GAPDH (as loading control). A representative blot is shown in panel c. Quantitation of changes in p21 levels (normalized to vehicle-treated controls) is shown in panel d. The data shown are the means ±s.e. of three independent experiments.</p>

Gegevens van [ Oncogene , 2012 , 31, 3584-96 ]

<p>Senescence induction upon PKCι depletion combined with aurora kinase inhibition in glioblastoma cells. (a, b) U87MG cells were transfected as above to deplete PKCι. Two days after transfection, cells were treated for 72 ( a)or24h (b) with 400 nM VX-680. Medium with VX-680 was then removed and fresh medium was added. Cells were stained for SA-b-gal activity 5 days after the start of transfection. * indicates a P value <0.05. (c) U87MG cells were treated as described in panel a above. Five days after transfection, cells were fixed and assessed for the presence of gH2AX foci by immunofluorescence microscopy. (d) U87MG cells were treated with the dimethyl sulfoxide (DMSO) control or 400 n M VX-680 for the indicated time periods. Total cell lysates were then analyzed by western blotting for levels of p21. The bar graph shows quantitation of p21 levels (normalized to vehicle-treated controls) from three independent experiments. A representative blot is also shown, with lanes aligned to correspond to the labels on the graph.</p>

Gegevens van [ Oncogene , 2012 , 31, 3584-96 ]

<p>MTT assay reveals a dose-dependent decrease in cell viability in mouse derived brainstem glioma cells treated with VX-680 ( P < 0.001) after 72 h of treatment. The error bars represent the standard deviation. Propidium iodide based cell sorting of mouse derived brainstem glioma cells after 72 h treatment with 5 μM reversine or 100 nM VX-680 respectively reveals increased cell populations with 4N and 8N DNA content as compared to vehicle control.</p>

Gegevens van [ Brain Pathol , 2012 , 23, 244-53 ]

<p>Treatment of mouse derived brainstem glioma cells for 72 h with 5 μM reversine or 100 nM VX-680 increases cell size compared with vehicle-treated control and leads to irregular-shaped nuclei and micronuclei (F–H). Images F–H represent immunofluorescent staining for GFAP (green) with DAPI counter-stain (blue) and were taken at 400 ×magnification.</p>

Gegevens van [ Brain Pathol , 2012 , 23, 244-53 ]

Sellecks Tozasertib (VX-680) Is geciteerd door 139 Publicaties

A patient-derived T cell lymphoma biorepository uncovers pathogenetic mechanisms and host-related therapeutic vulnerabilities [ Cell Rep Med, 2025, S2666-3791(25)00102-8] PubMed: 40147445
Overcoming MET-targeted drug resistance in MET-amplified lung cancer by aurora kinase B inhibition [ Biochim Biophys Acta Mol Cell Res, 2025, 1872(7):120001] PubMed: 40499687
Hedgehog signalling is involved in acquired resistance to KRASG12C inhibitors in lung cancer cells [ Cell Death Dis, 2024, 15(1):56] PubMed: 38225225
Dynamic phosphorylation of FOXA1 by Aurora B guides post-mitotic gene reactivation [ Cell Rep, 2024, 43(9):114739] PubMed: 39276350
The molecular basis of Abelson kinase regulation by its αI-helix [ Elife, 2024, 12RP92324] PubMed: 38588001
Tozasertib activates anti-tumor immunity through decreasing regulatory T cells in melanoma [ Neoplasia, 2024, 48:100966] PubMed: 38237304
Machine learning based androgen receptor regulatory gene-related random forest survival model for precise treatment decision in prostate cancer [ Heliyon, 2024, 10(17):e37256] PubMed: 39296076
Visualization strategies to aid interpretation of high-dimensional genotoxicity data [ Environ Mol Mutagen, 2024, 10.1002/em.22604] PubMed: 38757760
Molecular landscape and functional characterization of centrosome amplification in ovarian cancer [ Nat Commun, 2023, 14(1):6505] PubMed: 37845213
Mitotic Dysregulation at Tumor Initiation Creates a Therapeutic Vulnerability to Combination Anti-Mitotic and Pro-Apoptotic Agents for MYCN-Driven Neuroblastoma [ Int J Mol Sci, 2023, 10.3390/ijms242115571] PubMed: 37958555

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.