Orantinib (SU6668)

CatalogusnummerS1470 Batch:S147001

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C18H18N2O3
Moleculair gewicht 310.35 CAS-nr. 252916-29-3
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 62 mg/mL (199.77 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Orantinib (SU6668) heeft de grootste potentie tegen PDGFR-autofosforylering met een Ki van 8 nM in een celvrije test, maar remt ook sterk Flk-1- en FGFR1-transfosforylering. Het toont weinig activiteit tegen IGF-1R, Met, Src, Lck, Zap70, Abl en CDK2, en remt EGFR niet. Deze verbinding bevindt zich in Fase 3.
Doelen
PDGFRβ
(Cell-free assay)
8 nM(Ki)
In vitro Orantinib (SU6668) is een competitieve remmer, met betrekking tot ATP, van Flk-1/KDR-transfosforylering, FGFR1-transfosforylering en PDGFRβ-kinases-autofosforylering. Het (0,03-10 μM) remt tyrosinefosforylering van KDR in VEGF-gestimuleerde HUVEC's. Deze verbinding remt ook PDGF-gestimuleerde PDGFRβ-tyrosinefosforylering in NIH-3T3-cellen die PDGFRβ overexpresseren bij een minimale concentratie van 0,03-0,1 μM. Het remt zuur-FGF-geïnduceerde fosforylering van het FGFR1-substraat 2 bij 10 μM en hoger. Echter, TSU-68 (tot 100 μM) heeft geen effect op EGF-gestimuleerde EGFR-tyrosinefosforylering in NIH-3T3-cellen die EGFR overexpresseren. Het remt VEGF-gedreven en FGF-gedreven mitogenese van HUVEC's met een gemiddelde IC50 van respectievelijk 0,34 μM en 9,6 μM. In humane myeloïde leukemie MO7E-cellen remt deze verbinding de tyrosine-autofosforylering van de stamcelfactor (SCF)-receptor, c-kit, met een IC50 van 0,1-1 μM, evenals ERK1/2-fosforylering, een signaleringsgebeurtenis stroomafwaarts van c-kit-activering. Het remt ook SCF-geïnduceerde proliferatie van MO7E-cellen met een IC50 van 0,29 μM, en induceert apoptose.
In vivo Orantinib (SU6668) induceert tumor-groeiremming tegen een breed scala aan tumor-typen in xenograft-modellen in athymische muizen, waaronder A375, Colo205, H460, Calu-6, C6, SF763T en SKOV3TP5-cellen bij doses van 75-200 mg/kg. Deze verbinding (75 mg/kg) onderdrukt ook tumor-angiogenese van C6-glioom-xenografts. In een tumormodel van HT29 humaan coloncarcinoom vermindert het (200 mg/kg) de gemiddelde vatpermeabiliteit en het gemiddelde fractionele plasmavolume in de tumorrand en -kern. TSU-68 bevordert abnormale stromale ontwikkeling aan de periferie van carcinomen. In een konijn VX2-levertumormodel versterkt het (200 mg/kg) het effect van chemotherapeutische infusie.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • Transfosforyleringsreacties

    Tyrosinekinase assays om de transfosforyleringsactiviteit van Flk-1 en FGFR1 te kwantificeren, worden uitgevoerd in 96-well microtiterplaten die vooraf gecoat zijn (20 μg/well in PBS; 's nachts geïncubeerd bij 4 °C) met het peptidesubstraat poly-Glu,Tyr (4:1). Overtollige eiwitbindingsplaatsen worden geblokkeerd met 1-5% (w/v) BSA in PBS. Gezuiverde GST-FGFR1 (kinase domein) of GST-Flk-1 (cytoplasmatisch domein) fusie-eiwitten worden vervolgens toegevoegd aan de microtiterwells in een 2 × concentratie kinase-verdunningsbuffer bestaande uit 100 mM HEPES, 50 mM NaCl, 40 μM NaVO4 en 0,02% (w/v) BSA. De uiteindelijke enzymconcentratie voor GST-Flk-1 en GST-FGFR1 is 50 ng/mL. Orantinib (SU6668) wordt opgelost in DMSO op 100× de uiteindelijk vereiste concentratie en 1:25 verdund in H2O. Vijfentwintig μL van deze verdunde verbinding worden vervolgens toegevoegd aan elk reactie-well. De kinasereactie wordt geïnitieerd door de toevoeging van verschillende concentraties ATP in een oplossing van MnCl2, zodat de uiteindelijke ATP-concentraties de Km voor het enzym overspannen, en de uiteindelijke concentratie van MnCl2 10 mM is. De platen worden 5-15 min bij kamertemperatuur geïncubeerd voordat de reactie wordt gestopt met de toevoeging van EDTA. De platen worden vervolgens driemaal gewassen met TBST. Konijnen-polyklonale anti-fosfotyrosine-antisera worden toegevoegd aan de wells in een 1:10000 verdunning in TBST dat 0,5% (w/v) BSA, 0,025% (w/v) magere melkpoeder en 100 μM NaVO4 bevat en 1 uur bij 37 °C geïncubeerd. De platen worden vervolgens driemaal gewassen met TBST, gevolgd door de toevoeging van geiten-anti-konijnen-antisera geconjugeerd met HRP. De platen worden 1 uur bij 37 °C geïncubeerd en daarna driemaal gewassen met TBST. De hoeveelheid fosfotyrosine in elk well wordt gekwantificeerd na de toevoeging van 2,2
Celassay:

[1]
  • Cellijnen

    HUVECs, and NIH-3T3 cells overexpressing PDGFRβ or EGFR

  • Concentraties

    0.03-10 μM , dissolved in DMSO as 10 mM stock solution

  • Incubatietijd

    1 hour (before ligand stimulation)

  • Methode

    Before treatment with Orantinib (SU6668), cells are seeded (3 × 105 cells/35-mm well) in DMEM containing 10% (v/v) FBS and grow to confluence and then quiesced in DMEM containing 0.1% serum for 2 hours. HUVECs (seeded at 2 × 106 cells/10-cm plate) are grown to confluence in endothelial cell growth media and then quiesced in endothelial cell basal media containing 0.5% FBS for 24 hours. All cell lines are incubated with this compound for 1 hour before ligand stimulation (100 ng/mL) for 10 min. Western blotting is perfor
Dierstudie:

[1]
  • Dierlijke modellen

    Mouse (Female, BALB/c, nu/nu) xenograft models of A375, Colo205, H460, Calu-6, C6, SF763T, and SKOV3TP5 tumor cells

  • Doseringen

    75-200 mg/kg

  • Toediening

    Via i.p. injection or oral gavage once daily.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10945623/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11222388/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14760097/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21184227/

Klantproductvalidatie

<p>Effect of kinase inhibitors on cell surface expression of DF508-CFTR analyzed by flow cytometry. Summary of increase in cell surface expression of DF508-CFTR (% change in fluorescence intensity) of the hits analyzed by flow cytometry (two independent experiments, 10,000 live cells per treatment per experiment).</p>

Gegevens van [ Mol Cell Proteomics , 2012 ]

<p>Effect of select kinase inhibitors on DF508-CFTR maturation analyzed by immunoblotting. 293MSR-GT cells stably expressing DF508-CFTR were treated with 15 uM kinase inhibitors or 0.3% DMSO (vehicle control), as indicated, grown at 37°C for 48 h, and the appearance of the mature protein, band C, monitored by immunoblotting with anti-CFTR antibodies. Band B represents the immature protein. DMSO represents vehicle- alone control, 27°C represents temperature rescue of F508-CFTR at 27°C, 37°C represents untreated DF508-CFTR control, and WT represents WT-CFTR. Top panels depict the anti-CFTR immunoblot and bottom panels depict actin (loading) control. ** represents cellular toxicity.</p>

Gegevens van [ Mol Cell Proteomics , 2012 ]

<p>Transverse and coronal PET images of s.c. HuH-7 tumor-bearing mice at 3 h after i.v. injection of <sup>64</sup>Cu-cyclam-RAFT-c(-RGDfK-)<sub>4</sub> (11.1 MBq) on the day after daily i.p. injections of (a) vehicle alone (50 μl of DMSO) or (b) TSU-68 (75 mg/kg/d in 50 μl of DMSO) for 14 days (n = 4 mice for each group). The arrows indicate the tumor location. Representative autoradiographic examination (c, e) and CD31 immunofluorescence staining (d, f) with the same whole-tumor sections from (c, d) vehicle- and (e, f) TSU-68-treated tumors excised after PET imaging. g MVD, ha` SUV<sub>mean</sub> , and hb`SUV<sub>max</sub> were compared between TSU-68- and vehicle-treated tumors. All data presented in a-h are from the same set of experimental groups.</p>

Gegevens van [ Angiogenesis , 2012 , 15, 569-80 ]

<p>(A) Tumor growth curve of s.c. HuH-7 tumor-bearing mice treated with daily i.p. injections of TSU-68 (75 mg/kg/d in 50 μl of DMSO) or the vehicle alone(50 μl of DMSO). Data are presented as the mean ±SD of tumor volumes. Day 0: the day before treatment; days 1-14: treatment days; day 15: 1 day after treatment. (B) Changes in the body weight of TSU-68- and vehicle-treated mice. (C) Image of TSU-68- and vehicle-treated tumors excised on day 15. (D) Representative immunofluorescence staining of tumor sections from TSU-68-and vehicle-treated tumors using anti-mouse CD31 antibody (green). Scale bar = 1,000 μm. (E) The tumor MVD presented as the percentage of the CD31-positive area was compared between tumors from TSU-68- and vehicle-treated mice. All data presented in (A-E) are from the same set of experimental groups (n = 6 for each group).</p>

Gegevens van [ Angiogenesis , 2012 , 15, 569-80 ]

Sellecks Orantinib (SU6668) Is geciteerd door 21 Publicaties

SMYD5 is a novel epigenetic gatekeeper of the mild hypothermia response [ bioRxiv, 2023, 2023.05.11.540170] PubMed: 37333301
Establishment and Characterization of NCC-PMP1-C1: A Novel Patient-Derived Cell Line of Metastatic Pseudomyxoma Peritonei [ J Pers Med, 2022, 12(2)258] PubMed: 35207746
Establishment and characterization of NCC-UPS4-C1: a novel cell line of undifferentiated pleomorphic sarcoma from a patient with Li-Fraumeni syndrome [ Hum Cell, 2022, 10.1007/s13577-022-00671-y] PubMed: 35118583
Establishment and characterization of NCC-MFS4-C1: a novel patient-derived cell line of myxofibrosarcoma [ Hum Cell, 2021, 34(6):1911-1918] PubMed: 34383271
Establishment and characterization of the NCC-GCTB4-C1 cell line: a novel patient-derived cell line from giant cell tumor of bone [ Hum Cell, 2021, 10.1007/s13577-021-00639-4] PubMed: 34731453
Establishment and characterization of novel patient-derived cell lines from giant cell tumor of bone [ Hum Cell, 2021, 10.1007/s13577-021-00579-z] PubMed: 34304386
The Meningioma Enhancer Landscape Delineates Novel Subgroups and Drives Druggable Dependencies [ Cancer Discov, 2020, CD-20-0160] PubMed: 32703768
Establishment and characterization of NCC-MFS2-C1: a novel patient-derived cancer cell line of myxofibrosarcoma [ Hum Cell, 2020, 10.1007/s13577-020-00420-z] PubMed: 32870449
Multi-omic Profiling Reveals Dynamics of the Phased Progression of Pluripotency. [ Cell Syst, 2019, 8(5):427-445] PubMed: 31078527
Intratumoural Heterogeneity Underlies Distinct Therapy Responses and Treatment Resistance in Glioblastoma. [ Cancers (Basel), 2019, 11(2)] PubMed: 30736342

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.