Pracinostat (SB939)

Pracinostat (SB939) heeft een 100-voudig hogere selectiviteit voor HDAC's dan voor Zn-bindende niet-HDAC-enzymen, receptoren en ionkanalen. Deze verbinding is een krachtige remmer van HDAC klasse I-iso-enzymen, HDAC1, HDAC2, HDAC3 en HDAC8 met IC50-waarden variërend van 43 nM tot 140 nM. Het remt HDAC klasse II-iso-enzymen, HDAC4, HDAC5, HDAC7, HDAC9 en HDAC10 significant met IC50-waarden variërend van 40 nM tot 137 nM, met uitzondering van HDAC6 die een IC50 van 1008 nM vertoont. Het remt HDAC11 van de HDAC klasse IV-enzymen aanzienlijk met een IC50 van 93 nM, maar vertoont geen remmende activiteit tegen SIRT 1 van de klasse III-HDAC's. Deze chemische stof vertoont significante antiproliferatieve activiteit tegen een breed scala aan tumorcellijnen, met name leukemiecellen en cutane T-cellymfoomcellen met IC50-waarden variërend van 50 nM (H9-cellen) tot 170 nM (HEL92.1.7-cellen). [1]

Toediening van deze verbinding (25 mg/kg tot 100 mg/kg) vertoont een dosisafhankelijke antitumorale werkzaamheid in een xenograftmuismodel van menselijk colorectaal carcinoom (HCT-116). Dit is ongeveer twee keer zo effectief als SAHA: deze chemische stof veroorzaakt een tumorgroei-inhibitie van 94% versus 48% door SAHA, beide bij de maximaal getolereerde dosis. Orale toediening van dit middel in een dosis van 50 mg/kg of 75 mg/kg in het APC^min genetische muismodel van vroeg stadium darmkanker vermindert het aantal tumoren aanzienlijk, verlaagt de cumulatieve hemoccult-scores en verhoogt de hematocrietwaarden effectiever. [1]

• HDAC enzymtest

  Alle recombinante HDAC-enzymen, met uitzondering van SIRT1, worden gekloneerd en tot expressie gebracht in S*BIO. Het reactiemengsel dat 2,5 of 5 μL van het HDAC-iso-enzym, assaybuffer (25 mM Tris-HCl, pH 7,5; 137 mM NaCl; 2,7 mM KCl, 1 mM MgCl₂ en 1 mg/mL BSA), verschillende concentraties van deze verbinding en het fluorogene deacetylasesubstraat Flour de LysTM bevat in een totaal reactievolume van 33 μL, wordt 2 uur lang bij kamertemperatuur geïncubeerd. 16 μL Flour de LysTM-ontwikkelaar wordt toegevoegd en nog eens 10 minuten geïncubeerd. Het uitgezonden licht wordt gemeten bij 460 nm in een microplaatlezer. IC50-waarden worden gegenereerd met behulp van de XLfit-software.

• Cellijnen

  HCT116, A2780, ACHN, MCF7, HL-60, et al.

• Concentraties

  Dissolved in DMSO (stock concentration, 10 mM), final concentrations 1.5 nM to 100 μM

• Incubatietijd

  96 hours

• Methode

  Cells are seeded in 96-well plates in the log growth phase at a predetermined optimal density, and rested for 24 hours (adherent cells) or 2 hours (suspension cells), respectively. They are exposed to different concentrations of this compound for 96 hours. Cell proliferation assays are done using either the CyQUANT cell proliferation assay kit for adherent cells or the CellTiter96 Aqueous One solution cell proliferation kit for suspension cells.

• Dierlijke modellen

  BALB/c nude mice bearing HCT-116 human colon cancer xenografts, Male and APC^min mice

• Doseringen

  25, 50, 75, or 100 mg/kg

• Toediening

  Oral gavage once daily