PHA-665752

CatalogusnummerS1070 Batch:S107005

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C32H34Cl2N4O4S
Moleculair gewicht 641.61 CAS-nr. 477575-56-7
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 128 mg/mL (199.49 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving PHA-665752 is een potente, selectieve en ATP-competitieve c-Met remmer met een IC50 van 9 nM in celvrije assays, >50-voudige selectiviteit voor c-Met dan RTK's of STK's.
Doelen
c-Met
(Cell-free assay)		 RON
(Cell-free assay)		 Flk1
(Cell-free assay)
9 nM 68 nM 200 nM
In vitro PHA-665752 remt significant de c-Met kinaseactiviteit met een Ki van 4 nM, en vertoont een >50-voudige selectiviteit voor c-Met vergeleken met diverse tyrosine- en serine-threoninekinases. Deze verbinding remt potent de HGF-gestimuleerde c-Met autofosforylering met een IC50 van 25-50 nM. Het blokkeert ook significant HGF- en c-Met-afhankelijke functies zoals celmotiliteit en celproliferatie met IC50 van respectievelijk 40-50 nM en 18-42 nM. Bovendien remt deze chemische stof potent HGF-gestimuleerde of constitutieve fosforylering van stroomafwaartse mediatoren van c-Met zoals Gab-1, ERK, Akt, STAT3, PLC-γ en FAK in meerdere tumorcellijnen. Het remt de celgroei in TPR-MET-getransformeerde BaF3-cellen met een IC50 van <60 nM, en remt constitutieve celmotiliteit en -migratie met 92,5% bij 0,2 μM. Remming van c-Met door deze verbinding (0,2 μM) induceert ook celapoptose van 33,1% en G1-celcyclusarrest met cellen in de G1-fase die toenemen van 42,4% tot 77,0%. Het kan samenwerken met rapamycine om de celgroei van TPR-MET-getransformeerde BaF3-cellen en niet-kleincellige longkanker H441-cellen te remmen.
In vivo Toediening van PHA-665752 induceert een dosisafhankelijke tumorgroeiremming van S114-xenografts met 20%, 39% en 68%, bij een dosis van respectievelijk 7,5, 15 en 30 mg/kg/dag. Deze verbindingbehandeling vermindert significant de tumorgroei van NCI-H69, NCI-H441 en A549 in muizenxenografts met respectievelijk 99%, 75% en 59%. Het remt ook significant angiogenese met >85%, door de vermindering van de productie van vasculaire endotheliale groeifactor en de verhoging van de productie van de angiogeneseremmer trombospondine-1.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[1]
  • In vitro enzymtest

    Het c-Met kinase-domein GST-fusie-eiwit wordt gebruikt voor de c-Met-assay. De IC50-waarde van PHA-665752 voor de remming van c-Met is gebaseerd op fosforylering van kinasepeptide-substraten of poly-glu-tyr in aanwezigheid van ATP en divalente kationen (MgCl2 of MnCl2 10-20 mM). Het lineaire bereik (d.w.z. de tijdsperiode waarin de snelheid gelijk blijft aan de initiële snelheid) wordt bepaald voor c-Met, en de kinetische meting en IC50-bepaling worden binnen dit bereik uitgevoerd.
Celassay:[1]
  • Cellijnen

    S114, GTL-16, NCI-H441, and BxPC-3

  • Concentraties

    Dissolved in DMSO, final concentrations ~10 μM

  • Incubatietijd

    18, or 72 hours

  • Methode

    For proliferation assays, cells are grown in medium with 0.1% FBS for 48 hours after which they are treated with various concentrations of PHA-665752 in HGF (50 ng/mL) in a medium containing 2% FBS. After 18 hours, cells are incubated with BrdUrd for 1 hour, fixed, and stained with anti-BrdUrd peroxidase-conjugated antibody, and plates are read at 630 nm. For apoptosis assays, cells are grown in medium with 2% FBS in presence and absence of HGF (50 ng/mL) and various concentrations of this compound for 72 hours. After 72 hours, a mixture containing ethidium bromide and acridine orange is added, and apoptotic cells (bright orange cells or cell fragments) are counted by fluorescence microscopy.
Dierstudie:[1]
  • Dierlijke modellen

    Female athymic mice (nu/nu) bearing S114 or GTL-16 tumor xenografts

  • Doseringen

    ~30 mg/kg/day

  • Toediening

    Injection via bolus i.v.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14612533/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15788682/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17440059/

Klantproductvalidatie

A, representative Western blot analyses of samples obtained from NSCLC cells exposed to 1 umol/L erlotinib or PHA-665,752 for 6 hours. Levels of total and phosphorylated forms of EGFR, MET, and HER3. B, representative Western blot analyses of samples obtained as described in A showing the levels of EGFR downstream signaling mediators. Protein samples obtained from untreated and treated cells were separated by SDS-PAGE and immunoblotted with each antibody. Tubulin served to ensure equal loading.

Gegevens van [ Clin Cancer Res , 2014 , 20, 4806-15 ]

A, SCID mice bearing established HCC827/GR tumor cell xenografts were treated with each drug. The length and width of the tumors were measured at the days indicated and tumor volumes were calculated. The bars represent mean tumor volume ?SD. B, immunohistochemical staining for Ki-67 and TUNEL, as described in Materials and Methods. Quantitative data for proliferation and apoptotic indices are shown as Ki-67+ cells (left) and TUNEL+ cells (right). *, P < 0.01 and **, P < 0.001 for the combination of gefitinib plus NPS-1034 or gefitinib plus PHA-665752 versus either the control or drug alone.

Gegevens van [ Cancer Res , 2014 , 74, 253-62 ]

PHA-665752 increases the radiosensitivity and reverses the radioresistance induced by HGF in NPC cells. Radiosensitization induced by PHA-665752 is accompanied by the persistence of the c-H2AX foci. Representative immunofluorescence micrographs of the c-H2AX foci formation in PHA-665752 (1 uM), HGF (20 ng/ml), IR and their combination groups. The micrographs were taken at x 400 magnification.

Gegevens van [ Biochem Biophys Res Commun , 2014 , 449(1), 49-54 ]

Radiosensitization induced by PHA-665752 is accompanied by the persistence of the γ-H2AX foci. (Top) Representative immunofluorescence micrographs of the γ-H2AX foci formation in PHA-665752 (1 uM), HGF (20 ng/ml), IR and their combination groups. The micrographs were taken at x400 magnification. (Bottom) The median number of the γ-H2AX foci per cell. The bars indicate the SD. ∗P < 0.01 compared with the IR alone group.

Gegevens van [ Biochem Biophys Res Commun , 2014 , 449, 49-54 ]

Sellecks PHA-665752 Is geciteerd door 100 Publicaties

Inhibition of TFF3 synergizes with c-MET inhibitors to decrease the CSC-like phenotype and metastatic burden in ER+HER2+ mammary carcinoma [ Cell Death Dis, 2025, 16(1):76] PubMed: 39920140
Macrophage Subpopulation Promotes Skeletal Muscle Regeneration Through HGF/MET Signaling-Mediated Skeletal Muscle Stem Cell Proliferation [ Aging Cell, 2025, e70042.] PubMed: 40132988
Overcoming MET-targeted drug resistance in MET-amplified lung cancer by aurora kinase B inhibition [ Biochim Biophys Acta Mol Cell Res, 2025, 1872(7):120001] PubMed: 40499687
MET receptor serves as a promising target in melanoma brain metastases [ Acta Neuropathol, 2024, 147(1):44] PubMed: 38386085
LncRNA CHROMR/miR-27b-3p/MET axis promotes the proliferation, invasion, and contributes to rituximab resistance in diffuse large B-cell lymphoma [ J Biol Chem, 2024, 300(3):105762] PubMed: 38367665
Single targeting of MET in EGFR-mutated and MET-amplified non-small cell lung cancer [ Br J Cancer, 2023, 128(12):2186-2196] PubMed: 37059804
Cancer-Associated Fibroblasts Promote Radioresistance of Breast Cancer Cells via the HGF/c-Met Signaling Pathway [ Int J Radiat Oncol Biol Phys, 2023, 116(3):640-654] PubMed: 36586496
MET Receptor Tyrosine Kinase Inhibition Reduces Interferon-Gamma (IFN-γ)-Stimulated PD-L1 Expression through the STAT3 Pathway in Melanoma Cells [ Cancers (Basel), 2023, 15(13)3408] PubMed: 37444518
Cabozantinib inhibits HBV-RNA transcription by decreasing STAT3 binding to the enhancer region of cccDNA [ Hepatol Commun, 2023, 10.1097/HC9.0000000000000313] PubMed: 37938099
Dual-targeting therapy against HER3/MET in human colorectal cancers [ Cancer Med, 2023, 10.1002/cam4.5673] PubMed: 36751113

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.