Letrozole

Letrozole remt krachtig aromatase afkomstig van verschillende bronnen, waaronder humane placentaire microsomen, deeltjesfracties van menselijke borstkanker, rattenovariummicrosomen, MCF-7 cellen getransfecteerd met aromatase (MCF-7Ca), JEG-3 humane choriocarcinoomcellen, CHO cellen, hamsterovariumweefsel en deeltjesfracties van menselijke borstkanker met IC50 van 11, 2, 7, 0,07, 0,07, 1,4, 20 en 0,8 nM. In de niet-cellulaire systemen wordt de IC50 van deze verbinding geschat op 1-13 nM. [1] Het remt maximaal de estradiolproductie in vitro in LH-gestimuleerd hamsterovariumweefsel bij 0,1 μM met een IC50 van 0,02 μM en beïnvloedt de progesteronproductie niet significant tot 350 μM. In ACTH-gestimuleerd rattenbijnierweefsel in vitro wordt de aldosteronproductie geremd met een IC50 van 210 μM. [2] Deze chemische stof remt de groei van de MCF-7 epitheliale borstkankercellen op een dosisafhankelijke manier met een IC50 van 1 nM. Remming kan zelfs bij zeer lage geteste concentraties (0,1 nM) worden waargenomen. Behandeling van normale MCF-12A epitheelcellen met deze verbinding beïnvloedde hun groei niet, zelfs niet bij hoge letrozoleconcentraties (100 nM) of verlengde kweekperioden. Gelijktijdige toediening van 17-β-estradiol hiermee (10 nM) verminderde het stimulerende effect van de enzymatische activiteit van MMP-2 en -9 die door estradiol werden vrijgegeven. [3]

Letrozole remt aromatase in vivo met een ED50 van 1-3 μg/kg p.o. [2] Deze verbinding vertoont anti-endocriene effecten. Het remt androstenedion-geïnduceerde uterushypertrofie bij onvolgroeide ratten met een ED50 van 1-3 μg/kg. Bij de volwassen vrouwelijke rat onderbreekt deze verbinding (0,3-1 mg/kg dagelijks p.o., 14 dagen) de ovariële cycliciteit volledig en vermindert het uterusgewicht en serumestradiol (E2)-concentraties in een vergelijkbare mate als na ovariëctomie. [1] Deze chemische stof induceert dosisafhankelijke regressie van oestrogeen-afhankelijke, 9,10-dimethylbenz-a-anthraceen-geïnduceerde mammatumoren bij volwassen vrouwelijke ratten. De ED50 ervoor is bepaald op 10 - 30 µg/kg/dag, met volledige remming bij een dagelijkse dosis van 10 µg/dag. [4] Het produceert dosisafhankelijke remming van tumorgroei van MCF-7-cellen getransfecteerd met het humane aromatase-gen (MCF-7Ca) geïmplanteerd in athymische naakte muizen, met volledige remming bij 20 mg/kg per dag p.o. [5]

• Activiteit van humane placentaire aromatase

  De test wordt uitgevoerd in een totaal volume van 1 ml bij 37 ℃. Tenzij anders vermeld, bevat het incubatiemengsel 11 nM [4- ¹⁴C] androstene-3, 17-dion ([4- ¹⁴C]A), 24 mM NADPH (tetranatriumzout Type III), de geschikte concentraties van de gewenste remmer en 120 μg microsomaal eiwit. Het (4- ¹⁴C)A wordt toegevoegd als een oplossing in 1,7% ethanol in 0,05 M kaliumfosfaatbuffer (pH 7,4), zodat de uiteindelijke concentratie ethanol niet meer dan 0,02% (v/v) bedraagt. De reactie wordt gestart door de toevoeging van enzym en na 20 min gestopt door de toevoeging van 7 vol ethylacetaat. Het mengsel wordt geschud op een vortexmixer en gedurende 5 min gecentrifugeerd bij 600 g. De waterige fase wordt opnieuw geëxtraheerd met 7 vol ethylacetaat, en de gecombineerde extracten worden tot droogte verdampt met behulp van een Evapo-Mix. Meer dan 99% van de radioactiviteit van toegevoegd [4- ¹⁴C] wordt teruggevonden met dit extractiesysteem. Het verkregen residu wordt opgelost in 150 μL aceton, en 100 μL aliquots worden gedurende 65 min gechromatografeerd op dunne-laagplaten voorbekleed met silicagel 60 met behulp van ethylacetaat: isooctaan (140:60, v/v; systeem A) of tolueen: chloroform: methanol (70:140:20; systeem B). De radioactieve zones van de plaat worden gelokaliseerd met een Berthold LB 2760 dunne-laagscanner. De radioactieve estradiol (E2) en estron (E1) pieken worden geïdentificeerd door vergelijking met authentieke standaarden. De corresponderende bindingsband van silicagel wordt overgebracht naar flacons die 10 mL scintillatievloeistof bevatten en geteld met een 6880 Liquid Scintillatiesysteem.

• Cellijnen

  Human breast cancer cells MCF-7

• Concentraties

  ~100 nM

• Incubatietijd

  1 days

• Methode

  Cells are seeded in duplicate at 5,000 to 10,000 cells per well in 24-well plates. The day after plating, different concentrations of Letrozole are added. At the end of incubation, cells are trypsinizated and placed in Isotone solution and counted immediately using a Coulter particle-counter.

• Dierlijke modellen

  Human breast carcinoma xenografts MCF-7 with human aromatase gene (MCF-7Ca)

• Doseringen

  20 mg/kg/day

• Toediening

  orally administered by gavage once every 2 days