KW-2449

CatalogusnummerS2158 Batch:S215801

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C20H20N4O
Moleculair gewicht 332.4 CAS-nr. 1000669-72-6
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 67 mg/mL (201.56 mM)
Ethanol 67 mg/mL (201.56 mM)
Water Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving KW-2449 is een multiple-targeted inhibitor, voornamelijk voor Flt3 met een IC50 van 6,6 nM, redelijk potent voor FGFR1, Bcr-Abl en Aurora A; weinig effect op PDGFRβ, IGF-1R, EGFR. Fase 1.
Doelen
FLT3 (D835Y)
(Cell-free assay)		 Abl (T315I)
(Cell-free assay)		 FLT3
(Cell-free assay)		 Abl
(Cell-free assay)		 FGFR1
(Cell-free assay)		 Meer bekijken
1 nM 4 nM 6.6 nM 14 nM 36 nM
In vitro KW-2449, een multikinase-remmer van FLT3, ABL, ABL-T315I en Aurora Kinase, wordt onderzocht om leukemiepatiënten te behandelen. Deze verbinding vertoont krachtige groeiremmende effecten op leukemiecellen met FLT3-mutaties door remming van de FLT3-kinase, wat resulteert in de neerwaartse regulatie van gefosforyleerd-FLT3/STAT5, G1-arrest en apoptose. Orale toediening van deze chemische stof vertoont dosisafhankelijke en significante tumorgroeiremming in een FLT3-gemuteerd xenograftmodel met minimale beenmergsuppressie. Bij wild-type FLT3 humane leukemie induceert het de reductie van gefosforyleerd histon H3, G2/M-arrest en apoptose. Bij imatinib-resistente leukemie draagt dit middel bij aan het opheffen van de resistentie door de gelijktijdige neerwaartse regulatie van BCR/ABL- en Aurora Kinase. De remmende activiteit van deze verbinding wordt niet beïnvloed door de aanwezigheid van humaan plasmaproteïne, zoals α1-zuur glycoproteïne. Het heeft een krachtige groeiremmende activiteit tegen verschillende typen leukemie via verschillende werkingsmechanismen. Deze remmer heeft een significante activiteit en rechtvaardigt klinisch onderzoek bij leukemiepatiënten met FLT3-mutaties, evenals imatinib-resistente mutaties. Fosforyleringsniveaus van FLT3 en STAT5 worden door deze chemische stof op een dosisafhankelijke manier verlaagd. Bovendien remt het krachtig ABL-T315I, dat geassocieerd is met IM-resistentie, met een IC50 van 4 nM. Aan de andere kant heeft deze verbinding weinig effect op PDGFRβ, IGF-1R, EGFR en verschillende serine/threoninekinasen, zelfs bij een concentratie van 1 μM. Het heeft krachtige groeiremmende activiteiten tegen niet alleen FLT3/ITD-expresserende leukemiecellen, maar ook tegen FLT3/KDM-geactiveerde en wild-type FLT3-overexpresserende leukemiecellen. In overeenstemming met het groeiremmende effect onderdrukt dit middel de fosforyleringen van FLT3 (P-FLT3) en zijn stroomafwaartse molecuul phospho-STAT5 (P-STAT5) in MOLM-13-cellen op een dosisafhankelijke manier. Bovendien verhoogt het het percentage cellen in de G1-fase van de celcyclus en vermindert het wederkerig het percentage cellen in de S-fase, wat resulteert in de toename van de apoptotische celpopulatie. Deze verbinding kan constitutief actieve WT-FLT3-kinase defosforyleren, maar remt de proliferatie van leukemiecellen niet als ze niet voornamelijk verslaafd zijn aan FLT3-kinase. Het wordt snel geabsorbeerd en omgezet in een belangrijk metaboliet M1. Preklinische studies tonen aan dat deze chemische stof door monoamine-oxidase-B (MAO-B) en aldehyde-oxidase wordt omgezet in zijn belangrijkste metaboliet M1. Dit middel medieert cytotoxiciteit door remming van FLT3/ITD. Het is een directe remmer van FLT3 en induceert remming van zijn stroomafwaartse doelwit STAT5. Deze verbinding interageert synergetisch met HDACIs om apoptose te induceren in Ph+ CML-cellen op een tijd- en concentratieafhankelijke manier. Het versterkt synergetisch de lethaliteit van vorinostat/SNDX275 in CML-cellen. Deze remmerregimes zijn actief tegen aanvullende imatinib-resistente Bcr-Abl+ leukemiecellen. Het vermindert matig de fosforylering van histon H3, een indicator van Aurora B-activiteit, in nocodozol-behandelde K562-cellen.
In vivo In het MOLM-13 tumortransplantaatmodel toont orale toediening van KW-2449 gedurende 14 dagen een krachtig en significant antitumor effect op een dosisafhankelijke manier.
Kenmerken Onderzocht als FLT3-remmer in klinische proeven, met andere in vroege ontwikkeling.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[2]
  • FLT3 fosforylering

    Leukemiecellen worden gewassen in fosfaatgebufferde fysiologische zoutoplossing (PBS) en vervolgens gelyseerd door de cellen te resuspenderen in lysisbuffer (20 mM Tris pH 7,4, 100 mM NaCl, 1% Igepal, 1 mM EDTA, 2 mM NaVO4, plus Complete protease-remmer KW-2449 gedurende 30 minuten onder schudden. Het extract wordt geklaard door centrifugatie bij 1,6 × 104 g en het supernatant wordt geanalyseerd op eiwit (Bio-Rad). Een alquot van 50 μg wordt verwijderd als een hele cellisat voor analyse van STAT5, en de rest wordt gebruikt voor immunoprecipitatie met anti-FLT3. Anti-FLT3-antilichaam wordt aan het extract toegevoegd voor nachtelijke incubatie, waarna proteïne A-sepharose wordt toegevoegd voor nog 2 uur. Afzonderlijke natriumdodecylsulfaat-polyacrylamide-elektroforese (SDS-PAGE)-gels voor hele cellisaten en immunoprecipitaten worden parallel uitgevoerd. Na overdracht naar Immobilon-membranen wordt immunobloot uitgevoerd met antifosfotyrosine-antilichaam (4G10) om gefosforyleerd FLT3 te detecteren of, voor de hele cellisatgeels, met een rattenmonoklonaal antilichaam tegen gefosforyleerd STAT5 (residu Y694) en vervolgens gestript en opnieuw geprobeerd met anti-FLT3-antilichaam om totale FLT3 te meten. Eiwitten worden gevisualiseerd met behulp van chemiluminescentie, belicht op Kodak BioMax XAR-film, ontwikkeld en gescand met een Bio-Rad GS800 densitometer. De concentratie van deze verbinding waarvoor de fosforylering van FLT3 of STAT5 wordt geremd tot 50% van de uitgangswaarde (IC50), wordt bepaald met behulp van lineaire regressieanalyse van de dosis-responsencurves. Voor directe analyse van FLT3 en STAT5 in circulerende blasten wordt perifeer bloed verzameld in ge hepariniseerde buisjes en onmiddellijk gekoeld op ijs. Monsters worden 10 minuten gecentrifugeerd bij 900 g, bij 4 °C. Het plasma wordt verwijderd en bevroren bewaard bij -80 °C. De buffy coat wordt voorzichtig overgebracht naar ijskoud PBS, in lagen aangebracht op gekoelde Ficoll-Hypaque en 5 minuten gecentrifugeerd bij 600 g, bij 4 °C. Alle volgende stappen worden uitgevoerd bij 4 °C. Mononucleaire cellen worden verzameld en snel eenmaal gewassen in rode bloedcellen lysisbuffer (0,155 M NH4Cl, 0,01 M KHCO3, 0,1 mM EDTA), waarna ze eenmaal in PBS worden gewassen. Cellen worden vervolgens gelyseerd zoals beschreven voor FLT3- en STAT5-analyse.
Celassay: [1]
  • Cellijnen

    MOLM-13 and RS4;11 cells

  • Concentraties

    33nM, 75nM, 0.1μM, 0.3μM and 0.15μM

  • Incubatietijd

    24, 48, and 72 hours

  • Methode

    Cell viability is determined by the sodium 3′-[1-(phenylaminocarbonyl)-3, 4-tetrazolium]-bis (4-methoxy-6-nitro) benzene sulfonic acid hydrate assay after incubation with or without KW-2449 for 72 hours at 37 °C. The number of viable cells is determined using the Cell Proliferation Kit II. For cell-cycle analysis, MOLM-13 and RS4;11 cells are treated with this compound. After 24, 48, and 72 hours of incubation at 37 °C, DNA contents are analyzed. Cell cycle distribution of K562, TCC-Y, and TCC/Ysr is analyzed 24 hours after treatment with this chemical or imatinib.
Dierstudie:[3]
  • Dierlijke modellen

    CBySmn.CB17-Prkdsscid/J (BALB/C) mice are injected with BV173/E255K/Luc cl4 cells.

  • Doseringen

    32 mg/kg/day, 5 days/week

  • Toediening

    Orally (p.o.) administered

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19541823/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19029442/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21474579/

Klantproductvalidatie

<p>Western blot analysis of p-histone and histone. 0-10μM KW2449 was added.</p><div><div> </div></div><p> </p>

, , Dr. Zhang of Tianjin Medical University

Sellecks KW-2449 Is geciteerd door 12 Publicaties

Integrative analysis of drug response and clinical outcome in acute myeloid leukemia [ Cancer Cell, 2022, S1535-6108(22)00312-9] PubMed: 35868306
A community challenge for a pancancer drug mechanism of action inference from perturbational profile data [ Cell Rep Med, 2022, 3(1):100492] PubMed: 35106508
Phosphorylation of SHP2 at Tyr62 Enables Acquired Resistance to SHP2 Allosteric Inhibitors in FLT3-ITD-Driven AML [ Cancer Res, 2022, 82(11):2141-2155] PubMed: 35311954
KW-2449 and VPA exert therapeutic effects on human neurons and cerebral organoids derived from MECP2-null hESCs [ Stem Cell Res Ther, 2022, 13(1):534] PubMed: 36575558
Evaluation of CML TKI Induced Cardiovascular Toxicity and Development of Potential Rescue Strategies in a Zebrafish Model [ Front Pharmacol, 2021, 12:740529] PubMed: 34733159
Mechanisms of Oncogenesis in the Primary Liver Cell Cancer [ DTIC, 2021, 53] PubMed: None
The Global Phosphorylation Landscape of SARS-CoV-2 Infection [ Cell, 2020, 182(3):685-712.e19] PubMed: 32645325
Synergistic Anti Leukemia Effect of a Novel Hsp90 and a Pan Cyclin Dependent Kinase Inhibitors. [ Molecules, 2020, 8;25(9) pii: E2220] PubMed: 32397330
Small-Molecule and CRISPR Screening Converge to Reveal Receptor Tyrosine Kinase Dependencies in Pediatric Rhabdoid Tumors. [ Cell Rep, 2019, 28(9):2331-2344] PubMed: 31461650
Drug Target Commons: A Community Effort to Build a Consensus Knowledge Base for Drug-Target Interactions [Tang J Cell Chem Biol, 2018, 25(2):224-229] PubMed: 29276046

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.