Imatinib (STI571) Mesylate

In vitro-assays voor de remming van een panel van tyrosine- en serine/threonine-proteïnekinasen tonen aan dat Imatinib Mesylate de v-Abl-tyrosinekinase en PDGFR krachtig remt met een IC50 van respectievelijk 0,6 en 0,1 μM. [1] Deze verbinding remt de SLF-afhankelijke activering van wild-type c-kit kinase-activiteit met een IC50 voor deze effecten van ongeveer 0,1 μM, wat vergelijkbaar is met de concentratie die nodig is voor de remming van PDGFR. [2] Het vertoont groeiremmende activiteit op de humane bronchiale carcinoïd-cellijn NCI-H727 en de humane pancreatische carcinoïd-cellijn BON-1 met een IC50 van respectievelijk 32,4 en 32,8 μM. [3] Een recente studie toont aan dat deze chemische stof het potentieel heeft om zijn antileukemie-effecten uit te oefenen bij chronische myeloïde leukemie door hERG1 K(+) kanalen te downreguleren, die sterk tot expressie komen in leukemiecellen en van uitzonderlijk belang lijken te zijn bij het bevorderen van leukemogenese. [4]

Imatinib Mesylate produceert een verschillend antitumor-effect op drie xenograft-tumoren afkomstig van chirurgische monsters van verse humane kleincellige longkankers, met respectievelijk 80%, 40% en 78% groeiremming van SCLC6, SCLC61 en SCLC108 tumoren, en geen significante remming van SCLC74 groei. [5] Bij met vetrijk voedsel gevoede ApoE(-/-) muizen vermindert deze verbinding het door vetrijk voedsel geïnduceerde lipidekleuringsgebied significant met 30%, 27% en 35% vergeleken met onbehandelde controles met vetrijk dieet, wanneer gedoseerd via maagsonde met respectievelijk 10, 20 en 40 mg/kg, en onderdrukt het de lipideaccumulatie in de halsslagader. [6]

• PDGF-receptor kinase-activiteit

  De PDGF-receptor wordt gedurende 2 uur op ijs geïmmunoprecipiteerd uit BALB/c 3T3 celextracten met konijnenantiserum tegen de murine PDGF-receptor. Proteïne A-Sepharose-parels worden gebruikt om de antigeen-antilichaamcomplexen te verzamelen. De immunoprecipitaten worden tweemaal gewassen met TNET (50 mM Tris, pH 7.5, 140 mM NaCl, 5 mM EDTA, 1% Triton X-100), eenmaal met TNE (50 mM Tris, pH 7.5, 140 mM EDTA), en eenmaal met kinasebuffer (20 mM Tris, pH 7.5, 10 mM MgCl₂). Na stimulatie met PDGF (50 ng/mL) gedurende 10 minuten bij 4 °C, worden verschillende concentraties van dit preparaat aan het reactiemengsel toegevoegd. De PDGF-receptor kinase-activiteit wordt bepaald door incubatie met 10 μCi [7-³³P]-ATP en 1 μM ATP gedurende 10 minuten bij 4 °C. Immuuncomplexen worden gescheiden door SDS-PAGE op 7.5% gels.

• Cellijnen

  BON-1 cells and NCI-H727 cells

• Concentraties

  ~100 μM

• Incubatietijd

  48 hours

• Methode

  BON-1 cells and NCI-H727 cells are seeded into flat-bottomed 96-well plates in triplicate and allowed to adhere overnight in 10% fetal bovine serum-supplemented DMEM or RPMI 1640 complete medium, respectively; the medium is then exchanged for serum-free medium (negative control) or serum-free medium containing serial dilutions of this compound. After 48 hours (control cultures do not reach confluence), the number of metabolically active cells is determined by the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay, and absorbance is measured in a Packard Spectra microplate reader at 540 nm. Growth inhibition is calculated using the following formula: inhibition rate = (1 − a / b) × 100%, where a and b are the absorbance values of the treated and control groups, respectively.

• Dierlijke modellen

  SCLC6, SCLC61, SCLC 74 and SCLC108 small cell lung cancers are injected into Swiss mice (nu/nu, female).

• Doseringen

  70 or 100 mg/kg

• Toediening

  Administered via i.p.