Idarubicin HCl

Idarubicin heeft een significante cytotoxische activiteit tegen meercellige sferoïden, vergelijkbaar met de antiproliferatieve effecten op monolaagcellen. [1] Idarubicin remt CYP450 2D6.[2] Idarubicin is ongeveer 57,5 keer en 25 keer actiever dan respectievelijk doxorubicine en epirubicine. Idarubicin kan P-glycoproteïne-gemedieerde multiresistentie overwinnen. [3] Idarubicin remt de vorming van superoxide radicalen door PMN. [4] Idarubicin kan worden gekoppeld aan de monoklonale antilichamen (anti-Ly-2.1, anti-L3T4 of anti-Thy-1) met behoud van eiwitoplosbaarheid en antilichaamactiviteit. [5] Idarubicin remt de proliferatie van NALM-6 cellen met een IC50 van 12 nM. [6]

De reductie van Idarubicin is afhankelijk van ketonreductasen en verloopt stereoselectiever dan die van de meeste ketonen, wat bijna uitsluitend het (13S)-epimeer oplevert. De hoge stereospecificiteit bij Idarubicin-reductie kan het gevolg zijn van chirale inductie door de aanwezigheid van asymmetrische centra nabij de carbonylgroep in Idarubicin. [7]

• CYP450 metabolisme experimenten

  De evaluatie van het metabolisme van Idarubicin door de CYP450 iso-enzymen 3A4, 2D6, 2C8, 2C9 en 1A2 wordt voltooid met behulp van geïsoleerde humane CYP450-eiwitten voor elke isovorm. De high-throughput P450-remmingstestmethode wordt gebruikt voor deze evaluaties. De metabolisme-experimenten zijn ontworpen om de volgende eigenschappen van elk geneesmiddel te onderzoeken: (1) of Idarubicin een substraat is van de CYP450 3A4, 2C8, 2C9, 1A2 of 2D6 iso-enzymen; (2) of het metabolisme wordt beïnvloed door bekende remmers van elk iso-enzym; (3) of Idarubicin remmers is van CYP450 iso-enzymen; en (4) of caspofungin of itraconazol het CYP450-metabolisme van Idarubicin remmen. Dibenzylfluoresceïne (DBF) (CYP3A4, CYP2C8, CYP2C9), 3-cyano-7-ethoxycoumarine (Cyp1A2) en 7-methoxy-4-(aminomethyl)-coumarine (MAMC) (CYP2D6) zijn de bekende substraten die als controles worden gebruikt om de respectieve iso-enzymactiviteit te bevestigen en de effecten van Idarubicin op de iso-enzymactiviteit te evalueren. Bovendien worden ketoconazol, quercetine, suflaphenazol, furafylline en kinidine gebruikt als controle CYP450-remmers voor respectievelijk de 3A4, 2C8, 2C9, 1A2 of 2D6 iso-enzymen. Het substraat, de remmer plus Idarubicin zoals aangegeven, worden toegevoegd aan elk eiwitmonster en geïncubeerd gedurende 20-60 minuten, zoals aanbevolen door de fabrikant, bij 37oC. Reacties worden gestopt met een organische oplosmiddeloplossing en vervolgens worden de monsters geanalyseerd met een fluorescentieplaatlezer, indien van toepassing. Voor elk experiment worden controlest monsters met een bekende hoeveelheid substraat en gesynthetiseerde metaboliet, in afwezigheid van het iso-enzym, bereid voor kwalitatieve vergelijkingen. Alle experimenten worden in drievoud uitgevoerd.

• Cellijnen

  NALM-6 cells

• Concentraties

  0.1 nM-10 μM

• Incubatietijd

  24 hours

• Methode

  The anti-proliferative activity of the Idarubicin in the conjugate is compared to that of free drug by measuring the inhibition of [³H]thymidine uptake. Briefly, NALM-6 cells (1.5 × 10⁶/mL) are added to a flat-bottomed microtitre plate (100 μL/well) and incubated for 1 hours at 37ºC. Free Idarubicin and Idarubicin-mAb conjugates are sterilised by filtration and diluted in sterile PBS; various concentrations are added to the wells (100 μL/well) in duplicate and the plates are incubated at 37ºC, 7% CO₂ for 24 hours. Following incubation, 50 μL medium containing 1 μCi [³H]thymidine is added to each well and the plates are incubated for a further 4 hours. Cells are harvested onto glass-fibre filter-paper, dried and counted in a scintillation counter. Specificity studies are performed using the same technique where the ability of Idarubicin-anti-CD19 conjugates to kill CD19 + cells is compared to the cytotoxicity of irrelevant Idarubicin-JGT conjugates. NALM-6 cells (1.5× 10⁶/mL, 300 μL tube) are incubated for 30 rain on ice with various concentrations of Idarubicin-anti-CD 19 or Idarubicin-JGT conjugates. Following three washes in ice-cold RPMI-1640 medium (4 mL/wash), the cells are resuspended in fresh medium and transferred to 96-well plates (100 μL/well). Each tube is set up in duplicate and two wells are plated out per tube (a total of 4 wells per drug concentration). Cells are pulsed with [³H]thymidine 24 hours later and harvested.

• Dierlijke modellen

  Rat, rabbit, mouse, dog

• Doseringen

  2 mg/kg, 0 mg/kg -75 mg/kg, 3 mg/kg and 0 mg/kg -75 mg/kg

• Toediening

  Administered via i.v.