GSK1059615

CatalogusnummerS1360 Batch:S136001

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C18H11N3O2S
Moleculair gewicht 333.36 CAS-nr. 958852-01-2
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 2 mg/mL (5.99 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO 40%PEG300 5%Tween80 50%ddH2O

Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.

 0.100mg/ml (0.30mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 2 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
Clear solution
5% DMSO 95% Corn oil

Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.

 0.100mg/ml (0.30mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 2 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving GSK1059615 is een dubbele remmer van PI3Kα/β/δ/γ (reversibel) en mTOR met een IC50 van respectievelijk 0,4 nM/0,6 nM/2 nM/5 nM en 12 nM. Fase 1.
Doelen
PI3Kα
(Cell-free assay)		 PI3Kβ
(Cell-free assay)		 PI3Kδ
(Cell-free assay)		 PI3Kγ
(Cell-free assay)		 mTOR
(Cell-free assay)
0.4 nM 0.6 nM 2 nM 5 nM 12 nM
In vitro Het pyridinylchinoline derivaat GSK1059615 is een nieuwe, ATP-competitieve en reversibele remmer van de klasse I familie van PI3K's. Deze verbinding remt PI3K signalering, induceert G1-arrest en apoptose, met name in borsttumorcellen. Gegevens samengevat in een andere review laten ook zien dat deze remmer PI3Kα, β, γ en δ remt, met een Ki van respectievelijk 0,42 nM, 0,6 nM, 0,47 nM en 1,7 nM. Een ander rapport toont aan dat deze chemische stof PI3Kα remt met een IC50 van 2 nM. In T47D en BT474 kankercellen remt het de fosforylering van Akt bij S473, met een IC50 van 40 nM.
In vivo In xenograft muismodellen van BT474- of HCC1954-borstkankercellen remt GSK1059615 (25 mg/kg) effectief de tumorgroei.
Kenmerken Een nieuwe, ATP-competitieve en reversibele remmer van zowel PI3Kα, β, δ, en γ, als mTOR.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[4]
  • HTRF In vitro profileringstesten voor PI3K-remming

    De meting van de GSK1059615-afhankelijke remming van de PI3K's wordt uitgevoerd met behulp van een HTRF-gebaseerde PI3K-profileringstestkit. 400 pM enzym wordt gebruikt in PI3Kα- en δ-tests, 200 pM in PI3Kβ-tests en 1 nM in de PI3Kγ-test. Bovendien worden de PI3Kα-, β- en δ-tests uitgevoerd met 150 mM NaCl en 100 μM ATP, terwijl de PI3Kγ-test wordt uitgevoerd zonder NaCl en met 15 μM ATP. Alle reacties worden uitgevoerd bij 10 μM PIP2. Deze verbinding wordt serieel verdund (3-voudig in DMSO) en 50 nL wordt overgebracht naar een 384-wells testplaat met laag volume. PI3K Reactiebuffer wordt bereid door de stock 1:4 te verdunnen met gedeïoniseerd water. Vers bereid DTT wordt toegevoegd in een eindconcentratie van 5 mM op de dag van gebruik. Enzymtoevoeging en pre-incubatie van deze chemische stof worden gestart door de toevoeging van 2,5 µL PI3K in reactiebuffer. Platen worden 15 min bij kamertemperatuur geïncubeerd. Reacties worden gestart door toevoeging van 2,5 µL 2× substraatoplossing (PIP2 en ATP in 1× reactiebuffer). Platen worden een uur bij kamertemperatuur geïncubeerd. Reacties worden geblust door de toevoeging van 2,5 µL stopoplossing. De gebluste reacties worden vervolgens verwerkt om productvorming te detecteren door 2,5 µL Detectieoplossing toe te voegen. Na een incubatie van 1 uur in het donker wordt het HTRF-signaal gemeten op de Envision-plaatlezer, ingesteld op 330 nm excitatie en dubbele emissiedetectie bij 620 nm (Eu) en 665 nm (APC). De IC50-waarde wordt vervolgens verkregen.
Celassay:[4]
  • Cellijnen

    T47D and BT474 cells

  • Concentraties

    0–1 μM, serially diluted (3-fold) in DMSO

  • Incubatietijd

    30 min

  • Methode

    Cells are plate at a density of 1 × 104 cells per well in clear flat-bottomed 96-well plates and incubated overnight. Then, GSK1059615 is added and the plates are incubated for 30 min. At the end of incubation, media is aspirated from the plates, and the plate is wash once with cold PBS. 80 μL MSD Lysis buffer is added into each well and the plates are incubated on a shaker at 4 °C for at least 30 min. For Akt duplex assay, plates are washed with 200 μL/well wash buffer for 4 times and tapped on paper towel to blot. Then, 60 μL lysates is added to each well and the plates are incubated on shaker at room temperature for 1 hour. After another 4 times washing, antibody is added (25 μL per well) and the plates are incubated on shaker for 1 hour and washed again. Finally, Read Buffer is added (150 μL per well) and the plates are read immediately. IC50 values are then obtained.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19589091/
  • #
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20582534/
  • http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/ml900028r

Klantproductvalidatie

<p>Breast cancer cells were pretreated with 100ng/ml EGF for 15 min and then treated with the indicated concentrations of GSK1059615 for 24 hours.</p><div><div> </div></div><p> </p>

, , Dr. Zhang of Tianjin Medical University

, , Antonino Maria Spartà from University of Bologn

<p>For MTT assays, cells (2,000 ~ 5,000 cells/well) were subcultured into 96-well plates according to their growth properties. Cell proliferation was assayed at 72 hr after treatment of GSK1059615 by adding 20 μl of 5 mg/ml 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) solution per 100 μl of growth medium. After incubating for 3-4 h at 37°C, the media were removed and 150 µl/well of MTT solvent (either absolute DMSO or isopropanol containing 4 μM HCl and 0.1% Nonidet-40) was added to dissolve the formazan. The absorbance of each well was measured by ELx808 (BioTek, Winooski, VT) or Wallac Victor2 (Perkin-Elmer Life Sciences, Boston, MA) Microplate Reader. Viable cells are presented as percent of control, vehicle-treated cells.</p>

, , Dr. Yong-Weon Yi from Georgetown University Medical Center

<p>We treated all of drugs in T47D which has a PI3KCA H1044R mutation with the concentration shown below for 1 hour and performed western blot analysis using antibodies to phospho-AKT(SERINE 472), and total AKT.</p><div><div> </div></div><p> </p>

, , Saraswati Sukumar of Johns Hopkins University School of Medicine

Sellecks GSK1059615 Is geciteerd door 15 Publicaties

PIK-75 overcomes venetoclax resistance via blocking PI3K-AKT signaling and MCL-1 expression in mantle cell lymphoma [ Am J Cancer Res, 2022, 12(3):1102-1115] PubMed: 35411248
Phytochemicals inhibit migration of triple negative breast cancer cells by targeting kinase signaling. [ BMC Cancer, 2020, 20(1):4] PubMed: 31898540
Lethal Poisoning of Cancer Cells by Respiratory Chain Inhibition plus Dimethyl α-Ketoglutarate [ Cell Rep, 2019, 27(3):820-834] PubMed: 30995479
FRET biosensor-based kinase inhibitor screen for ERK and AKT activity reveals differential kinase dependencies for proliferation in TNBC cells. [ Biochem Pharmacol, 2019, 169:113640] PubMed: 31536726
[ ACS Pharmacol Transl Sci, 2019, ] PubMed: 32259061
Inhibition of RPTOR overcomes resistance to EGFR inhibition in triple-negative breast cancer cells [ Int J Oncol, 2018, 52(3):828-840] PubMed: 29344641
Development of a test that measures real-time HER2 signaling function in live breast cancer cell lines and primary cells. [Huang Y, et al. BMC Cancer, 2017, 17(1):199] PubMed: 28302091
Single and Combination Drug Screening with Aqueous Biphasic Tumor Spheroids [ SLAS Discov, 2017, 22(5):507-515] PubMed: 28324660
Gerosuppression by pan-mTOR inhibitors [ Aging (Albany NY), 2016, 8(12):3535-3551] PubMed: 28077803
Multiparametric Analysis of Oncology Drug Screening with Aqueous Two-Phase Tumor Spheroids. [ Mol Pharm, 2016, 13(11):3724-3735] PubMed: 27653969

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.