Patupilone (Epothilone B)

CatalogusnummerS1364 Batch:S136404

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C27H41NO6S
Moleculair gewicht 507.68 CAS-nr. 152044-54-7
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 100 mg/mL (196.97 mM)
Ethanol 100 mg/mL (196.97 mM)
Water Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
30%PEG400 0.5%Tween80 5%propylene glycol

Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.

 5.000mg/ml (9.85mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 300 μL of 16.67 mg/ml clarified PEG400 stock solution to 5 μL of Tween80, mix evenly to clarify it; add 50 μL Propylene glycol to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 645 μL ddH2O Dilute to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Patupilone (EPO906, Epothilone B) is een microtubulus-stabiliserend middel met een EC0.01 van 1,8 μM, momenteel in Fase 2.
Doelen
Tubulin
(Cell-free assay)
1.8 μM(EC0.01)
In vitro

Patupilone (Epothilone B) vertoont een betere activiteit dan Epothilone A, met een EC0.01 van 1,8 μM. Het remt potent de celproliferatie in HCT116-cellen, met een IC50 van 0,8 nM. Deze verbinding induceert mitotische arrest en vertoont cytotoxiciteit in KB3-1-, KBV-1-, Hela- en Hs578T-cellen, met een IC50 van 3 nM tot 92 nM. Het concurreert met Taxol in binding aan microtubuli, met een IC50 van 3,3 μM. In MCF-7-cellen die GFP-α-tubuline overexpressen, blokkeert het (3,5 nM) efficiënt de microtubulusdynamiek. Ondertussen induceert het mitotische arrest met een IC50 van 3,5 nM. In multipel myeloom (MM)-cellen, waaronder RPMI 8226, U266, MM.1S, LR5 en MR20, onderdrukt het direct de proliferatie met een IC50 van 1 nM tot 10 nM. Op vergelijkbare wijze induceert het (10 nM) ook celcyclusarrest en apoptose. Een recente studie onthult dat het, in ovariumkanker Hey-cellen, (5 nM–100 nM) het oppervlakte-epitheelceladhesie-antigeen (EpCAM) versterkt, zonder de transcriptie of het totale cellulaire niveau van EpCAM te beïnvloeden.

In vivo

In een muizenxenograftmodel van RPMI 8226-cellen verlengt Patupilone (Epothilone B) (2,5 mg/kg–4 mg/kg) de overleving en onderdrukt het de tumorgroei. Op vergelijkbare wijze remt deze verbinding in dezelfde dosis ook de tumorgroei in muizenxenograftmodellen van prostaatkankercellen, waaronder DU145 en PC3.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • Tubulinepolymerisatie assay

    Kalfsbrein microtubulusproteïnen (MTP) worden gezuiverd, wat ongeveer 15%–20% microtubulus-geassocieerde proteïnen omvat. De buffer (MES-buffer) die wordt gebruikt voor de Epothilone B-microtubulusstudies bevat 0,1 M 2-morfolinoethaansulfonzuur (MES), 1 mM EGTA en 0,5 mM MgCl2 bij pH 6,6. Monsters voor elektronenmicroscopie worden op met koolstof-over-Parlodion gecoate roosters (300 mesh) geplaatst en negatief gekleurd met 2% uranylacetaat. Microtubulusassemblage in aanwezigheid of afwezigheid van Patupilone (Epothilone B) wordt spectrofotometrisch gecontroleerd met behulp van een spectrofotometer uitgerust met een thermostatisch gereguleerde vloeistofcirculator. De temperatuur wordt op 35 °C gehouden en veranderingen in troebelheid (representatief voor polymeermassa) worden gemeten bij 350 nm. Effectieve concentratie (EC0.01), gedefinieerd als de geïnterpoleerde concentratie die een initiële helling van 0,01 OD/min kan induceren, wordt berekend met behulp van de formule EC0.01 = concentratie/helling en uitgedrukt als het gemiddelde met standaardafwijking verkregen uit drie verschillende concentraties.
Celassay:

[2]
  • Cellijnen

    KB3-1, KBV-1, Hela, and Hs578T cells

  • Concentraties

    0–1 μM

  • Incubatietijd

    72 hours

  • Methode

    For mitotic block and aberrant mitosis, cells are plated either in 48-well plates (for blue and cell counting) or onto coverslips. After 24 hours, they are treated with Patupilone (Epothilone B) and scored at regular intervals. For the cytotoxicity analysis, cells are counted and scored as blue positive or negative. Concurrently, coverslips and aliquots of cells in the culture supernatant are fixed and stained with Hoechst33342 in PBS. These cells are scored for cells blocked at the G2/M transition and aberrant mitosis.
Dierstudie:

[4]
  • Dierlijke modellen

    Mice xenograft model of RPMI 8226 cells

  • Doseringen

    2.5 mg/kg–4 mg/kg

  • Toediening

    Inject intravenously

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11506611/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7757983/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14522931/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15367426/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20674962/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15948135/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1672157/

Klantproductvalidatie

<p>Matrigel invasion assay of H1299 cells treated with SDF-1α or SDF-1α plus Epothilone B prior to 0 or 2 Gy irradiation. After the treatment for 12 h, the H1299 cells that migrated to the bottom surface of the membrane were stained with Giemsa, and the number of migrated cells was calculated manually.</p>

, , Oncotarget, 2015, 6(13):10893-907.

<p>Combination treatment with epothilone B and ABT-737 inhibited PI3K/AKT/mTOR pathway. SKOV-3 cells were treated with epothilone B (0.4 nM), ABT-737 (5 μM), or the combination, OVCAR-8 cells were treated with epothilone B (0.3 nM), ABT-737 (3 μM), or the combination, SGC-7901 were treated with epothilone B (0.4 nM), ABT-737 (5 μM), or the combination. Cells were exposed to compounds for 48 h, after which protein extracts were immunoblotted with specified antibodies for p-4E-BP-1, p-mTOR, p-AKT, caspase-3, PARP and β-actin.</p>

, , J Cancer Res Clin Oncol, 2016, 142(11):2281-9.

<p>Cells were seeded in 96 well paltes, and then treated with the indicated concentration of Epothilone B for 48 h. Cell survival was measured by a standarad MTT assay.</p><div><div> </div></div><p> </p>

, , Dr. Helen Sadik of Johns Hopkins University

Combination treatment with epothilone B and ABT-737 inhibited PI3K/AKT/mTOR pathway. SKOV-3 cells were treated with epothilone B (0.4 nM), ABT-737 (5 μM), or the combination, OVCAR-8 cells were treated with epothilone B (0.3 nM), ABT-737 (3 μM), or the combination, SGC-7901 were treated with epothilone B (0.4 nM), ABT-737 (5 μM), or the combination. Cells were exposed to compounds for 48 h, after which protein extracts were immunoblotted with specified antibodies for p-4E-BP-1, p-mTOR, p-AKT, caspase-3, PARP and β-actin.

Gegevens van [ , , J Cancer Res Clin Oncol, 2016, 142(11):2281-9 ]

Sellecks Patupilone (Epothilone B) Is geciteerd door 17 Publicaties

Rehabilitation enhances epothilone-induced locomotor recovery after spinal cord injury [ Brain Commun, 2023, 5(1):fcad005] PubMed: 36744011
A new form of axonal pathology in a spinal model of neuromyelitis optica [ Brain, 2022, awac079] PubMed: 35202467
Predicting heterogeneity in clone-specific therapeutic vulnerabilities using single-cell transcriptomic signatures [ Genome Med, 2021, 13(1):189] PubMed: 34915921
Tubulin isotypes optimize distinct spindle positioning mechanisms during yeast mitosis [ J Cell Biol, 2021, 220(12)e202010155] PubMed: 34739032
Various effects of two types of kinesin-5 inhibitors on mitosis and cell proliferation [ Biochem Pharmacol, 2021, 193:114789] PubMed: 34582773
Epothilones Improve Axonal Growth and Motor Outcomes after Stroke in the Adult Mammalian CNS [ Cell Rep Med, 2020, 1(9):100159] PubMed: 33377130
Deletion of Glutathione S-Transferase Omega 1 Activates Type I Interferon Genes and Downregulates Tissue Factor [ Cancer Res, 2020, canres.530.2020] PubMed: 32571799
Paclitaxel Enhances the Innate Immunity by Promoting NLRP3 Inflammasome Activation in Macrophages. [ Front Immunol, 2019, 10:72] PubMed: 30761140
CETSA-based target engagement of taxanes as biomarkers for efficacy and resistance [ Sci Rep, 2019, 9(1):19384] PubMed: 31852908
Systemic administration of epothilone D improves functional recovery of walking after rat spinal cord contusion injury [Ruschel J, et al. Exp Neurol, 2018, 306:243-249] PubMed: 29223322

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.