In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO
40%PEG300
5%Tween80
50%ddH2O
Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.
5.000mg/ml
(10.13mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution
5% DMSO
95% Corn oil
Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.
0.625mg/ml
(1.27mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 12.5 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar. * Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties. * Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)
Voorbereiden van stamoplossingen
Biologische activiteit
Beschrijving
Epothilone A is een paclitaxel-achtig microtubule-stabiliserend middel met een EC0.01 van 2 μM.
Doelen
Tubulin
2 μM(EC0.01)
In vitro
Epothilone A, ontdekt uit de myxobacterie Sorangium cellulosum, is een Taxol-achtig microtubule-stabiliserend middel dat tubulinepolymerisatie induceert, wat leidt tot celcyclusarrestatie in de G2-M overgang, cytotoxiciteit en apoptose. Deze verbinding remt krachtig celproliferatie in HCT116-cellen, met een IC50 van 4,4 nM. Het vertoont ook cytotoxiciteit in KB3-1, KBV-1, Hela en Hs578T-cellen, met IC50-waarden variërend van 13 nM tot 160 nM. Deze chemische stof is meer wateroplosbaar dan Taxol en concurreert met Taxol in binding met microtubuli, met een IC50 van 2,3 μM. Echter, zowel deze verbinding als Taxol delen geen gemeenschappelijk farmacofoor en exploiteren de tubuline-bindingspocket uniek en onafhankelijk. Recentelijk is ontdekt dat microbiologische transformatie van deze verbinding door Aspergillus niger AS 3.739 verschillende metabolieten oplevert die ook toxisch zijn voor MCF-7-cellen, maar met veel hogere IC50-waarden.
Kalfshersen microtubule-eiwitten (MTP) worden gezuiverd, wat ongeveer 15%–20% microtubule associated proteins omvat. De buffer (MES-buffer) gebruikt voor de Epothilone A-microtubule-studies bevat 0,1 M 2-morfolinoethaansulfonzuur (MES), 1 mM EGTA, 0,5 mM MgCl2 en 3 M glycerol bij pH 6,6. Monsters voor elektronenmicroscopie worden geplaatst op koolstof-over-Parlodion-gecoate grids (300 mesh) en negatief gekleurd met 2% uranylacetaat. Microtubule-assemblage in aanwezigheid of afwezigheid van deze verbinding wordt spectrofotometrisch gemonitord met behulp van een spectrofotometer uitgerust met een thermostatisch gereguleerde vloeistofcirculator. De temperatuur wordt op 35 °C gehouden en veranderingen in troebelheid (representatief voor polymeermassa) worden gemonitord bij 350 nm. Effectieve concentratie (EC0.01), gedefinieerd als de geïnterpoleerde concentratie die in staat is om een initiële helling van 0,01 OD/min te induceren, wordt berekend met de formule EC0.01 = concentratie/helling en uitgedrukt als het gemiddelde met standaarddeviatie verkregen uit drie verschillende concentraties.
24 hours for mitotic arrest or 72 hours for cytotoxicity
Methode
For mitotic block and aberrant mitosis, cells are plated either in 48-well plates (for trypan blue and cell counting) or onto coverslips. After 24 hours, cells are treated with Epothilone A and are scored at regular intervals. For the cytotoxicity analysis, cells are counted and scored as trypan blue positive or negative. Concurrently, coverslips and aliquots of cells in the culture supernatant are fixed and stained with Hoechst 33342 in PBS. These cells are scored for cells blocked at the G2-M transition and aberrant mitosis.
Referenties
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11506611/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7757983/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15297674/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19431017/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1672157/
Sellecks Epothilone A Is geciteerd door 6 Publicaties
β3 accelerates microtubule plus end maturation through a divergent lateral interface
[ Mol Biol Cell, 2025, 36(4):ar36]
RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.
VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.
NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.
