Cyclopamine (11-Deoxojervine)

CatalogusnummerS1146 Batch:S114612

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C27H41NO2
Moleculair gewicht 411.62 CAS-nr. 4449-51-8
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro Ethanol 21 mg/mL (51.01 mM)
DMSO Insoluble
Water Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Clear solution
5%Ethanol 40%PEG300 5%Tween80 50%ddH2O

Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.

 1.000mg/ml (2.43mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL 20 mg/ml clarified Ethanol stock solution to 400 μL PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL Tween80 to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 500 μL ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Cyclopamine (11-deoxojervine) is een specifieke Hedgehog (Hh) signaalroute antagonist van Smoothened (Smo) met een IC50 van 46 nM in TM3Hh12 cellen.
Doelen
Smoothened
(TM3Hh12 cells)
46 nM
In vitro Cyclopamine remt de Hedgehog signaalroute met een IC50 van 46 nM, en blokkeert de activiteit van humane Smo receptor uitgedrukt in CHO-K1 cellen in de [3H]Hh-Ag bindingsassay met een IC50 van 280 nM. Deze verbinding remt de Hedgehog pathway activiteit significant op een dosisafhankelijke manier in uit de darm afgeleide tumorcellijnen die Patched (PTCH) mRNA tot expressie brengen, en induceert groeiremming van die tumorcellijnen met 75-95% bij een concentratie van 3 μM, maar is ineffectief tegen colon tumorcellen zonder PTCH mRNA expressie, wat suggereert dat de effecten van deze chemische behandeling Hedgehog pathway-gerelateerd zijn in plaats van algemeen cytotoxisch. Door de Hedgehog signalering te blokkeren via directe interactie met Smo, remt het (10 μM) de proliferatie van SMOhigh Cyclopamine-responsieve cellijnen L3.6sl en Panc 05.04 met 75-80%, en verhoogt het de apoptose met 2,5 tot 3,5 keer, zonder de BxPC3-SMOlow cellijn te beïnvloeden. Deze behandeling vermindert significant Snail mRNA en verhoogt E-cadherine transcripten in de E3LZ10.7 cellijn. Onafhankelijk van de remming van celgroei, remt het significant het invasieve fenotype van Hedgehog-afhankelijke L3.6pl cellen, wat een >500-voudige reductie veroorzaakt in het aantal transmigrerende cellen, maar niet dat van de Hedgehog-onafhankelijke cellijn Panc-1.
In vivo Toediening van Cyclopamine in een dosis van 50 mg/kg/dag gedurende 22 dagen elimineert de HUCCT1 xenografts in muizen zonder duidelijke bijwerkingen. Deze behandeling met het verbinding in een dosis van 1,2 mg gedurende 7 dagen induceert significante apoptose van tumorcellen en vermindert de tumormassa met 50-60% in respectievelijk Panc 05.04- en L3.6sl-afgeleide tumoren, maar niet in de BxPC3-SMOlow tumoren. [3] Toediening van deze chemische stof alleen remt tumor metastasen diepgaand in xenografts van E3LZ10.7 en L3.6pl, en heelt metastasen volledig wanneer gecombineerd met gemcitabine.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[1]
  • Hedgehog celtest

    Deze assay meet het eindstadium van de Hh signaalroute, d.w.z. de transcriptionele modulatie van Gli, met behulp van Luciferase als uitlezing (Gli-Luc assay). Cyclopamine wordt voor de assay bereid door seriële verdunning in DMSO en vervolgens toegevoegd aan lege assayplaten. TM3Hh12-cellen (TM3-cellen die Hh-responsieve reportergenconstructie pTA-8xGli-Luc bevatten) worden opnieuw gesuspendeerd in F12 Ham's/DMEM (1:1) met 5% FBS en 15 mM Hepes pH 7.3, toegevoegd aan assayplaten en ongeveer 30 minuten bij 37 °C in 5% CO2 geïncubeerd met deze verbinding. Vervolgens wordt 1 nM Hh-Ag 1.5 aan de assayplaten toegevoegd en geïncubeerd bij 37 °C in aanwezigheid van 5% CO2. Na 48 uur wordt Bright-Glo of MTS-reagens aan de assayplaten toegevoegd en wordt de luminescentie of absorptie bij 492 nm bepaald. De IC50-waarde, gedefinieerd als het buigpunt van de logistische curve, wordt bepaald door niet-lineaire regressie van de Gli-gestuurde luciferase-luminescentie of het absorptiesignaal van de MTS-assay versus log10 (concentratie) van deze chemische stof met behulp van het R statistische softwarepakket.
Celassay:[2]
  • Cellijnen

    SEG1, OE33, KYAE, KYSE180, SNU1, AGS, SNU16, NCI-N-87, HUCCT1, PANC1, PL5, PL6, BXPC3, HS766T, KYSE150, GBD1, DLD1, and HCT116

  • Concentraties

    Dissolved in DMSO, final concentration 3 μM

  • Incubatietijd

    4 days

  • Methode

    Cells are exposed to Cyclopamine in 96-well plates. Cell viability is measured by MTS (soluble tetrazolium salt) assay. Viable cell mass is determined by optical density measurements at 490 nm (OD490) at 2 and 4 days using the CellTiter96 colorimetric assay. Relative growth is calculated as OD (day 4)﹣OD (day 2)/OD (day 2).
Dierstudie:[2]
  • Dierlijke modellen

    Athymic (nude) mice inoculated subcutaneously with HUCCT1 cells

  • Doseringen

    50 mg/kg/day

  • Toediening

    Subcutaneous injection

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19091559/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14520411/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14520413/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17332349/

Klantproductvalidatie

<p>(A)[3H]thymidine incorporation assay of B16F10 melanoma cells treated with DMSO or cyclopamine after incubation with SA-CM from WT and Cav1KO dermal fibroblasts. Representative phase-contrast images of B16F10 cells treated with SA-CM from WT and Cav1KO fibroblasts with cyclopamine are shown on the right. Similar experiments (B) were done with A-375 cells incubated with SA-CM from hTBJ1-shCtrl and hTBJ1-shCAV1 cells.</p>

Gegevens van [ Cancer Res , 2012 , 72, 2262-74 ]

<p>(A) The effects of cyclopamine (10 μM) in pancreatic cancer cell invasion. The number of migrated cells was quantified by counting the number of cells from 10 random fields at 200 magnification. (B) The effects of cyclopamine on the expression of EMT-related molecules E-cadherin and vimentin, and Hh pathway-related proteins SMO and Gli-1 were analyzed by Western blotting following treatment of MiaPaCa-2 and Panc-1 with SDF-1 for 48 h in the presence or absence of the SMO inhibitor cyclopamine. Normal culture was used as a negative control. (C) The EMT-related molecules Ecadherin and vimentin mRNA levels, and Hh pathway-related genes at mRNA level were analyzed by real-time RT-PCR following treatment of MiaPaCa-2 and Panc-1 with SDF-1 for 48 h in the presence or absence of the SMO inhibitor Cyclopamine. Normal culture was used as a negative control.</p>

Gegevens van [ Cancer Lett , 2012 , 322, 169-176 ]

<p>(A) Exogenous Shh peptide (500 ng/mL) for 72 hours promoted expansion of CD34+ cells and CD34- cells, cyclopamine (10 μM) for 72 hours induced apoptosis of CD34+ cells and CD34- cells, as measured by 3-(3,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazoliumbromide (MTT) assay, n =4, bars, standard deviation. *Statistically significant compared with CD34+ cells. (B) Exogenous Shh peptide (500 ng/mL) promoted cell expansion after 48 hours and cyclopamine (10 μM) induced cell apoptosis within 24 hours measured by MTT assay (n=6).</p>

Gegevens van [ Exp Hematol , 2012 , 40, 418-27 ]

<p>For MTT assays, cells (2,000 ~ 5,000 cells/well) were subcultured into 96-well plates according to their growth properties. Cell proliferation was assayed at 72 hr after treatment of Cyclopamine by adding 20 μl of 5 mg/ml 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) solution per 100 μl of growth medium. After incubating for 3-4 h at 37°C, the media were removed and 150 µl/well of MTT solvent (either absolute DMSO or isopropanol containing 4 mM HCl and 0.1% Nonidet-40) was added to dissolve the formazan. The absorbance of each well was measured by ELx808 (BioTek, Winooski, VT) or Wallac Victor2 (Perkin-Elmer Life Sciences, Boston, MA) Microplate Reader. Viable cells are presented as percent of control, vehicle-treated cells.</p><div><div> </div></div><p> </p>

, , Dr. Yong-Weon Yi from Georgetown University Medical Center

Sellecks Cyclopamine (11-Deoxojervine) Is geciteerd door 148 Publicaties

The O-glycosyltransferase C1GALT1 promotes EWSR1::FLI1 expression and is a therapeutic target for Ewing sarcoma [ Nat Commun, 2025, 16(1):1267] PubMed: 39894896
PlexinD1 is a driver and a therapeutic target in advanced prostate cancer [ EMBO Mol Med, 2025, 17(2):336-364] PubMed: 39748059
PPARG contributes to urothelial integrity in the murine ureter by activating the expression of Shh and superficial cell-specific genes [ Development, 2025, 152(8)dev204324] PubMed: 40167323
Interplay of SHH, WNT and BMP4 signaling regulates the development of the lamina propria in the murine ureter [ Development, 2025, 152(3)DEV204214] PubMed: 39817691
Hedgehog inhibitors exert anti-proliferation effects and synergistically interact with trastuzumab in HER2-positive gastric cancer models [ Acta Oncol, 2025, 64:715-728] PubMed: 40426308
Inhibition of PI3K and Hedgehog Signaling Pathway Inhibits Hypoxia-Induced Vasculogenic Mimicry Formation in Ovarian Cancer Stem Cells [ Balk Med J, 2025, 42(5):440-451] PubMed: 40888349
SHH Pathway Inhibition and Astrocyte Co-culture Induce Distinct Responses in Glioblastoma and Cancer Stem Cells [ Res Sq, 2025, rs.3.rs-7214243] PubMed: 40894044
Proximity based proteomics reveals Git1 as a regulator of Smoothened signaling [ bioRxiv, 2025, 2025.01.06.631593] PubMed: 39829937
Foxo3-mediated physiological cell competition ensures robust tissue patterning throughout vertebrate development [ Nat Commun, 2024, 15(1):10662] PubMed: 39690179
Phosphorylation of human glioma-associated oncogene 1 on Ser937 regulates Sonic Hedgehog signaling in medulloblastoma [ Nat Commun, 2024, 15(1):987] PubMed: 38307877

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.