Clemastine (HS-592) Fumarate

Clemastinefumaraat remt de door histamine geïnduceerde stijging van [Ca²⁺]_i in HL-60-cellen met een IC50 van 3 nM, vergeleken met chloorfeniramine of difenhydramine met IC50-waarden van respectievelijk 20 nM en 100 nM. [1]

Bij concentraties van ≥25 μM blokkeert Clemastinefumaraat significant de NK- en ADCC-reacties van lymfocyten tegen respectievelijk de menselijke erytroleukemiecellijn K562 en de menselijke B-lymfoblastcellijn SB. [2]

Clemastinefumaraat remt de door histamine geïnduceerde contractie van cavia-ileum met een IC50 van 231 nM. [3]

Clemastinefumaraat remt krachtig het HERG K⁺-kanaal op een concentratie-afhankelijke manier in HEK 293-cellen die stabiel HERG-kanalen tot expressie brengen met een IC50 van 12 nM, wat kan worden verzwakt door de Y652A- of F656A-mutatie van HERG. [4]

Clemastinefumaraat potentiëert significant de ATP-geïnduceerde toename van [Ca²⁺]_i in HEKhP2X7-cellen, niet afhankelijk van histamine receptor-blokkade, maar van het sensibiliseren van de P2X7-receptor op een concentratie-afhankelijke manier met een EC50 van 10 μM, en verhoogt de IL-1β-afgifte door LPS-geïnduceerde menselijke macrofagen. [5]

Toediening van Clemastinefumaraat (5-20 mg/kg) vertoont een significant remmend effect op gelijktijdig geïnduceerd zymosan-pootoedeem en crotonolie-ooroedeem bij ratten op een dosisafhankelijke manier, met een remming van respectievelijk 53,6% en 46,8% bij een dosis van 20 mg/kg, en met ID50-waarden van respectievelijk 18,0 mg/kg en 20,5 mg/kg. [6]

Clemastinefumaraatbehandeling vermindert sterk de aangeboren immuunreacties op Listeria monocytogenes bij muizen door te interfereren met de extracellulaire signaal-gereguleerde kinase (ERK)-gemedieerde productie van pro-inflammatoire cytokines zoals TNF-α en IL-6, verrassend genoeg niet afhankelijk van het blokkeren van de histamine H1 receptor, wat leidt tot een significant hogere mortaliteit. [7]

• Remming van [Ca²⁺]_i

  HL-60-cellen worden gesuspendeerd bij 1×10⁷ cellen/mL in een buffer bestaande uit 138 mM NaCl, 6 mM KC1, 1 mM MgSO4, 1 mM Na₂HPO₄, 5 mM NaHCO₃, 5.5 mM glucose en 20 mM HEPES-NaOH, pH 7.4, aangevuld met 0.1% (w/v) runderserumalbumine. De kleurstof fura-2/AM wordt toegevoegd in een concentratie van 4 μM, en cellen worden 10 minuten geïncubeerd bij 37 °C. Daarna worden de cellen verdund met de bovengenoemde buffer tot een concentratie van 5×10⁶ cellen/mL en 45 minuten geïncubeerd bij 37 °C. Vervolgens worden de cellen verdund met de bovengenoemde buffer tot een eindconcentratie van 0.5 × 10⁶ cellen/mL en gecentrifugeerd bij 250 g gedurende 10 minuten bij 20 °C. Cellen worden gesuspendeerd bij 1.0 × 10⁶ cellen/mL in de bovengenoemde buffer en bewaard bij 20 °C tot meting. HL-60-cellen worden tot 4 uur na belading met fura-2/AM gebruikt en gesuspendeerd in 2 mL van de bovengenoemde buffer, met behulp van acrylfluorescentiecuvetten. HL-60-cellen worden 3 minuten geïncubeerd bij 37 °C, in aanwezigheid van 1 mM Ca²⁺ en verschillende concentraties Clemastinefumaraat, vóór de toevoeging van histamine (100 μM). Fluorescentie wordt bepaald bij 37 °C, met constant roeren van de cellen bij 1×10³ tpm, met behulp van een Ratio II spectrofluorometer. De basale fluorescentie (basale [Ca²⁺]_i) wordt 1 minuut gemeten. De basale [Ca²⁺]_i-waarden worden afgetrokken van de overeenkomstige piek [Ca²⁺]_i-waarden, om de toename van [Ca²⁺]_i te berekenen. De excitatie- en emissiegolflengten zijn respectievelijk 340 en 500 nm. De IC50-waarde wordt beoordeeld aan de hand van de competitieve curve.

• Dierlijke modellen

  Male Wistar rats with paw oedema induced by subplantar injection of zymosan and ear oedema induced by croton oil

• Doseringen

  5-20 mg/kg

• Toediening

  Intraperitoneally