Chelerythrine Chloride (NSC 646662)

CatalogusnummerS1292 Batch:S129204

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C21H18NO4.HCl
Moleculair gewicht 384.83 CAS-nr. 3895-92-9
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 4 mg/mL (10.39 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO 40%PEG300 5%Tween80 50%ddH2O

Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.

 0.15mg/ml (0.39mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 3 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Chelerythrine Chloride (NSC 646662, Broussonpapyrine) is een potente, selectieve antagonist van PKC met een IC50 van 0,66 μM.
Doelen
PKC
(Cell-free assay)
0.66 μM
In vitro

Chelerythrine Chloride (NSC 646662) interageert met het katalytische domein van PKC, is een competitieve remmer ten opzichte van de fosfaatacceptor (histon IIIS) met een Ki-waarde van 0,7 μM en een niet-competitieve remmer ten opzichte van ATP. Het vertoont krachtige cytotoxische effecten tegen L-1210-cellen met een IC50 van 0,53 μM. Deze verbinding verandert geen activiteit van PKA, TPK en Ca/CM-PK, en het remmende effect op de PKC-activiteit varieert niet tussen de verschillende substraten, waaronder GS, MLC, MBP en Fibrinogen. Het remt de PKC-activiteit in ruwe celextracten van SQ-20B-cellen op een dosisafhankelijke manier. Chelerythrine vermindert de cellevensvatbaarheid, zoals bepaald door de MTT-test, op een dosisafhankelijke manier in SCC35-, JSQ3-, SQ20B- en SCC61-cellen. Bij 5 μM onderdrukt het de VEGF-geïnduceerde expressie van ICAM-1, VCAM-1 en E-selectine in HUVEC's. Het onderdrukt ook de VEGF-geïnduceerde NF-κB-activiteit in HUVEC's bij dezelfde concentratie en onderdrukt zowel de basale als de VEGF-geïnduceerde leukocytenadhesie in HUVEC's. Bij concentraties van 6 mM-30 mM induceert het snel pyknose, krimp en daaropvolgende celdood in hartmyocyten. Chelerythrine (30 μM)-geïnduceerde myocytendood gaat gepaard met nucleaire fragmentatie en activering van caspase-3 en -9 in primaire kweek van neonatale rattenventrikelmyocyten. Bij 10 μM veroorzaakt het cytochroom c-afgifte uit mitochondriën, wat suggereert dat ROS de chelerythrine-geïnduceerde cytochroom c-afgifte in hartmyocyten medieert. Het verdringt het fluorescent gelabelde BH3-domeinpeptide van een recombinant GST-BcLXL-fusie-eiwit met een IC50 van 1,5 μM. Bij 2,5 μM en 5 μM gedurende 16 uur induceert het een substantiële afname van het mitochondriale potentiaal, zoals aangegeven door een toename van JC-1 groene fluorescentie in menselijke neuroblastoom SH-SY5Y-cellen. Bij 5 μM induceert het ook de verschijning van sub-G1-DNA dat indicatief is voor apoptose in SH-SY5Y-cellen. Bij 10 μM induceert het mitochondriale potentiaalverandering, CytC-afgifte uit de mitochondriën in SH-SY5Y-cellen.

In vivo

Chelerythrine Chloride (NSC 646662) (5 mg/kg i.p.) resulteert in vertraging van tumorgroei bij muizen met SQ-20B-xenografts. Behandeling met deze verbinding (5 mg/kg) verhoogt significant TUNEL-positieve kernen in het myocardium, evenals gekloofde vormen van caspase-3 en -9 bij volwassen ratten.

Kenmerken Chelerythrine is minstens 100 keer selectiever voor PKC's dan voor andere kinasen.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • assay voor proteïnekinase C

    De gezuiverde proteïnekinase C wordt bereid uit rattenhersenen. Kortom, het incubatiemengsel (200 μL) bevat 20 mM Tris/HCl-buffer (pH 7,5), 10 mM MgCl2, 200 μg/mL histonen, micellen gemaakt met 700 μM fosfatidylserine en 180 μM 1,2-dioleine in 0,3% triton X100, 0,2 mM CaCl2, 100 μM ATP, [γ-32P ]-ATP (105 dpm), te testen Chelerythrine Chloride (NSC 646662) (opgelost in dimethylsulfoxide) en het enzym (0,5 μg eiwit). Na incubatie bij 30℃ gedurende 3 minuten wordt de reactie beëindigd door de toevoeging van 3 mL 20% trichloorazijnzuur. Zuurprecipiteerbare materialen worden verzameld op Whatman GFE-filters en uitgebreid gewassen met ijskoud 20% trichloorazijnzuur. De radioactiviteit op de filters wordt gemeten met een vloeistofscintillatieteller. Proteïnekinase C-activiteit wordt gecorrigeerd voor niet-specifieke activiteit door te testen in afwezigheid van micellen en CaCl2.
Celassay:

[1]
  • Cellijnen

    L-1210 cells

  • Concentraties

    ~10 μM

  • Incubatietijd

    2 days

  • Methode

    The lymphocytic mouse leukemia L1210 cells are plated sparsely at 1×104 cells per well in 24-well cluster plates in RPMI 1640 medium containing 10% foetal calf serum, 4 mM glutamine, 100 U/mL penicillin, 100 pg/mL streptomycin sulphate and Chelerythrine Chloride (NSC 646662) to be tested (solubilized in dimethylsulphoxyde ). After a 2 day incubation period at 37 ℃ in a humidified atmosphere (5% CO2 in air), growth is monitored by counting cell numbers in a coulter-counter. IC50 values are calculated on the basis of the linear regression lines established for this compound.
Dierstudie:

[2]
  • Dierlijke modellen

    mice bearing SQ-20B xenografts

  • Doseringen

    5 mg/kg

  • Toediening

    Intraperitoneal injection

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2244923/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10690561/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11108718/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11603925/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12702731/

Sellecks Chelerythrine Chloride (NSC 646662) Is geciteerd door 4 Publicaties

Trace amine-associated receptor 1 regulation of Kv1.4 channels in trigeminal ganglion neurons contributes to nociceptive behaviors [ J Headache Pain, 2023, 24(1):49] PubMed: 37158881
Effect of feeding regimen on circadian activity rhythms of food anticipatory by ghrelin hormone in a pig model [ Nutr Neurosci, 2022, 1-19] PubMed: 35249475
An Early and Robust Activation of Caspases Heads Cells for a Regulated Form of Necrotic-like Cell Death [ J Biol Chem, 2015, 290(34):20841-55] PubMed: 26124276
Signaling pathways of a structural analogue of apelin-12 involved in myocardial protection against ischemia/reperfusion injury [ Peptides, 2015, 73:67-76] PubMed: 26348269

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.