BIX 02189

CatalogusnummerS1531 Batch:S153102

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C27H28N4O2
Moleculair gewicht 440.54 CAS-nr. 1094614-85-3
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro Ethanol 80 mg/mL (181.59 mM)
DMSO 60 mg/mL (136.19 mM)
Water Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving BIX02189 is een selectieve remmer van MEK5 met een IC50 van 1,5 nM, remt ook de katalytische activiteit van ERK5 met een IC50 van 59 nM in celvrije assays, en remt geen nauw verwante kinasen MEK1, MEK2, ERK2 en JNK2.
Doelen
MEK5
(Cell-free assay)		 ERK5
(Cell-free assay)
1.5 nM 59 nM
In vitro BIX02189 blokkeert de katalytische activiteit van MEK5 en ERK5 met IC50-waarden van respectievelijk 1,5 nM en 59 nM. Ze zijn potenter dan het effect veroorzaakt door BIX02188 met IC50-waarden van respectievelijk 4,3 nM en 810 nM. BIX02189 vertoont remmende activiteit tegen CSF1R (FMS) met een IC50 van 46 nM, maar vertoont geen activiteit tegen verwante kinasen MEK1, MEK2, ERK1, p38α, JNK2, EGFR en STK16 met IC50-waarden van >3,7 μM. Voorbehandeling met BIX02189 remt sorbitol-geïnduceerde fosforylering van ERK5 in HeLa-cellen op een dosisafhankelijke manier, en vertoont geen remmende activiteit tegen de fosforylering van ERK1/2, p38 en JNK1/2 MAPK's. Behandeling met alleen BIX02189 gedurende 24 uur in HeLa- of HEK293-cellen vertoont geen cytotoxisch effect. BIX02189 remt MEK5/ERK5/MEF2C-gestuurde luciferase-expressie in HeLa- en HEK293-cellen met IC50-waarden van respectievelijk 0,53 μM en 0,26 μM. Dit is significanter dan het effect veroorzaakt door BIX02188. BIX02189 remt de activering van ERK5 en onderdrukt de C-terminus van Hsc70-interagerend eiwit (CHIP) gemedieerde p53-ubiquitinatie, wat leidt tot de omkering van het beschermende effect veroorzaakt door laminaire stroming (L-stroom) in humane navelstrengendotheelcellen (HUVEC's) blootgesteld aan 15d-PGJ2. BIX02189 (10 uM) remt ERK5-fosforylering en vermindert de transcriptionele activiteit van myocytenversterkende factor 2 (MEF2) in neonatale ratcardiomyocyten (NRCM's) gestimuleerd door isoproterenol. BIX02189 verhoogt de sorbitol-geïnduceerde apoptose in NRCM's, wat de beschermende rol van ERK5 in cardiomyocyten bevestigt.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • Katalytische test

    MEK5-eiwit geïsoleerd uit het baculovirus-expressiesysteem wordt gebruikt om de kinase-activiteit te meten met behulp van PKLight ATP Detection Reagent. De test wordt uitgevoerd met 15 nM GST-MEK5 en 0,75 μM ATP in een testbuffer bestaande uit 25 mM Hepes, pH 7,5, 10 mM MgCl2, 50 mM KCl, 0,2% BSA, 0,01% CHAPS, 100 μM Na3VO4, 0,5 mM DTT en 1% DMSO in aanwezigheid van variërende concentraties BIX02189. Het kinasereactiemengsel wordt gedurende 90 minuten bij kamertemperatuur geïncubeerd, gevolgd door toevoeging van 10 μL ATP-detectiereagens gedurende 15 minuten. Het relatieve lichteenheid (RLU) signaal wordt gemeten en de RLU-signalen worden omgezet in percentage van controle (POC) waarden voor de bepaling van de IC50-waarde.
Celassay:

[1]
  • Cellijnen

    HeLa cells

  • Concentraties

    Dissolved in DMSO, final concentration ~10 μM

  • Incubatietijd

    Pretreatment for 1.5 hours

  • Methode

    The cells are serum starved for 20 hours prior to stimulation with sorbitol at a final concentration of 0.4 M for 20 minutes at 37 °C. BIX02189 is added 1.5 hours prior to the addition of sorbitol. The cells are harvested and lysed in 50 μL RIPA buffer containing Halt protease and phosphate inhibitors at 4 °C for 5-10 minutes. The lysates are centrifuged for 10 minutes at 14,000 rpm and 50 μL lysate is added to 50 μl 2× sample buffer and boiled for 4 minutes at 95 °C. Twenty microliters sample is run on SDS–PAGE 10% Tris-glycine gels and transferred to nitrocellulose. Western blotting is done with appropriate antibodies.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18834865/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22254155/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20075332/

Klantproductvalidatie

<p>Expression of iNOS, Fra-1, Fra-2, JunB, JunD, and FosB in PMN. (A) PMN were treated with or without SB203580 (40 μM), BIX02189 (30 μM), or SP600125 (40 μM) for 1 h before addition of NDMA (0.74 μg/μl). The cytoplasmic and nuclear fractions obtained from the cells were used to detect iNOS, Fra-1, Fra-2, JunB, JunD, and FosB protein levels by Western blot. The results shown are representative of five independent experiments.</p>

Gegevens van [ J Immunotoxicol , 2013 , 10, 32-39 ]

Gegevens van [ J Biol Chem , 2012 , 287, 40722-31 ]

<p>Inhibition of ERK5 suppresses laminar flow-mediated Nrf2-dependent gene expression. B, HUVECs were exposed to atheroprotective flow for 16–24 h in the presence of either DMSO or BIX02189 (10uM). Protein expression of HO-1, NQO1, eNOS, pERK5, ERK5, and tubulin was determined by immunoblotting with specific antibodies. Data are representative from three independent experiments.</p>

Gegevens van [ J Biol Chem , 2012 , 287, 40722-31 ]

<p>Inhibition of ERK5 suppresses Nrf2 nuclear translocation in mouse aorta in vivo. Nrf2 nuclear translocation in mouse aortic endothelium was analyzed by en face immunofluorescence staining assay using anti-Nrf2 antibody (red). Mice were treated with either 10 mg/kg of BIX02189 (in 25% DMSO) or vehicle control (same volume of 25% DMSO) by ntraperitoneal injection. Endothelium of thoracic aorta was stained with anti-vascular endothelial-cadherin (VE-cadherin) antibody for endothelial cell-cell junction staining (green), Topro3 for nuclear staining (blue), and anti-Nrf2 antibody (red) and photographed under a confocal microscope..</p>

Gegevens van [ J Biol Chem , 2012 , 287, 40722-31 ]

Sellecks BIX 02189 Is geciteerd door 75 Publicaties

Integrated drug response prediction models pinpoint repurposed drugs with effectiveness against rhabdomyosarcoma [ PLoS One, 2024, 19(1):e0295629] PubMed: 38277404
Protective effects of macrophage-specific integrin α5 in myocardial infarction are associated with accentuated angiogenesis [ Nat Commun, 2023, 10.1038/s41467-023-43369-x] PubMed: 37985764
Etiopathogenic role of ERK5 signaling in sarcoma: prognostic and therapeutic implications [ Exp Mol Med, 2023, 55(6):1247-1257] PubMed: 37332046
The WNK1-ERK5 route plays a pathophysiological role in ovarian cancer and limits therapeutic efficacy of trametinib [ Clin Transl Med, 2023, 13(4):e1217] PubMed: 37029785
MAP kinase ERK5 modulates cancer cell sensitivity to extrinsic apoptosis induced by death-receptor agonists [ Cell Death Dis, 2023, 14(11):715] PubMed: 37919293
Extracellular signal-Regulated Kinase 5 (ERK5) is required for the Yes-associated protein (YAP) co-transcriptional activity [ Cell Death Dis, 2023, 14(1):32] PubMed: 36650140
MAP kinase ERK5 modulates cancer cell sensitivity to extrinsic apoptosis induced by death-receptor agonists [ Cell Death Dis, 2023, 10.1038/s41419-023-06229-6] PubMed: 37919293
Neuregulin modulates hormone receptor levels in breast cancer through concerted action on multiple signaling pathways [ Clin Sci (Lond), 2023, 137(1):1-15] PubMed: 36511917
Impact of Liver Inflammation on Bile Acid Side Chain Shortening and Amidation [ Cells, 2022, 11(24)3983] PubMed: 36552746
Glucose Starvation or Pyruvate Dehydrogenase Activation Induce a Broad, ERK5-Mediated, Metabolic Remodeling Leading to Fatty Acid Oxidation [ Cells, 2022, 11(9)1392] PubMed: 35563698

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.